公开(公告)号：CN103417691A

公开(公告)日：2013-12-04

申请号：CN201310367815.9

申请日：2013-08-22

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 肖文军 ,  熊硕 ,  秦昱 ,  滕杰

IPC: A61K36/752 ,  A61K131/00

Abstract: 一种以柑橘幼子的落果为原料生产柠檬苦素类提取物的方法，包括以食用乙醇从柑橘幼子的落果中提取柠檬苦素类粗提物，并将该粗提物以HP-20大孔吸附树脂分离纯化以得到纯度较高的柠檬苦素类提取物。该方法使用食用乙醇安全无毒地提取并分离柑橘幼子的落果中柠檬苦素类物质，真正地实现了安全、有效、经济、快速的柑橘落果资源的高值化利用，使废弃资源得到了充分的利用，充分体现了变废为宝的绿色化学生产理念。

公开(公告)号：CN104651426B

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201510077012.9

申请日：2015-02-13

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 肖文军 ,  滕杰 ,  龚志华 ,  陈栋 ,  邓燕莉

IPC: C12P17/16

Abstract: 一种利用茶多酚氧化酶同工酶PPO1酶促合成茶黄素TF的方法，该方法是以茶多酚氧化酶同工酶PPO1为酶源，以茶多酚中的儿茶素EC和EGC组分为主要反应底物，以一定pH值的缓冲液作为反应体系，经摇床振荡酶促反应以及后续的萃取、离心、浓缩、冷冻干燥等步骤，定向酶促合成单一茶黄素组分TF(theaflavin)的技术及工艺优化。该方法克服了传统以茶叶多酚氧化酶粗酶液酶促合成茶黄素中同时产生多种茶黄素组分、分离纯化茶黄素组分工艺技术繁琐以及制备高纯茶黄素组分难度大等缺陷，实现了酶促合成产物单一、反应终端无副产物的技术创新，避免了茶黄素组分后续分离纯化的技术瓶颈，为茶黄素组分绿色、安全、高效大规模工业化生产与利用奠定了理论和实践依据。

公开(公告)号：CN104651426A

公开(公告)日：2015-05-27

申请号：CN201510077012.9

申请日：2015-02-13

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 肖文军 ,  滕杰 ,  龚志华 ,  陈栋 ,  邓燕莉

IPC: C12P17/16

Abstract: 一种利用茶多酚氧化酶同工酶PPO1酶促合成茶黄素TF的方法，该方法是以茶多酚氧化酶同工酶PPO1为酶源，以茶多酚中的儿茶素EC和EGC组分为主要反应底物，以一定pH值的缓冲液作为反应体系，经摇床振荡酶促反应以及后续的萃取、离心、浓缩、冷冻干燥等步骤，定向酶促合成单一茶黄素组分TF(theaflavin)的技术及工艺优化。该方法克服了传统以茶叶多酚氧化酶粗酶液酶促合成茶黄素中同时产生多种茶黄素组分、分离纯化茶黄素组分工艺技术繁琐以及制备高纯茶黄素组分难度大等缺陷，实现了酶促合成产物单一、反应终端无副产物的技术创新，避免了茶黄素组分后续分离纯化的技术瓶颈，为茶黄素组分绿色、安全、高效大规模工业化生产与利用奠定了理论和实践依据。

公开(公告)号：CN104498448A

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201410849876.3

申请日：2014-12-31

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 肖文军 ,  滕杰 ,  龚志华 ,  邓燕莉

IPC: C12N9/02

CPC classification number: C12N9/0059 ,  C12Y110/03001

Abstract: 一种茶叶多酚氧化酶同工酶单体PP01和PP02及其制备方法，是针对当前茶叶多酚氧化酶纯化倍数低、上载样品蛋白量少、操作时间长，获得的同工酶仅为某一相对分子量的同工酶而未能获得氨基酸序列结构、分子量、等电点、酶学性质等明确的同工酶单体的技术现状，依次采用丙酮粉富集酶蛋白、硫酸铵分级沉淀、强阴离子交换色谱、凝胶介质层析、分子鉴定、酶学性质分析等技术及优化工艺，分离制备了氨基酸序列结构、分子量、等电点、酶学性质等明确的两种茶叶多酚氧化酶同工酶单体。该方法不仅具有成本低、制备量大、针对性强、操作周期短等优点，而且对深化茶叶多酚氧化酶同工酶的分离纯化技术、推动利用茶叶多酚氧化酶同工酶单体定向酶促合成茶黄素组分以及茶叶多酚氧化酶优势同工酶开发利用、同工酶固定化、酶蛋白结构解析、酶基因克隆与功能验证等具有重要理论实践意义。

公开(公告)号：CN104498448B

公开(公告)日：2016-04-06

申请号：CN201410849876.3

申请日：2014-12-31

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 肖文军 ,  滕杰 ,  龚志华 ,  邓燕莉

IPC: C12N9/02

Abstract: 一种茶叶多酚氧化酶同工酶单体PP01和PP02及其制备方法，是针对当前茶叶多酚氧化酶纯化倍数低、上载样品蛋白量少、操作时间长，获得的同工酶仅为某一相对分子量的同工酶而未能获得氨基酸序列结构、分子量、等电点、酶学性质等明确的同工酶单体的技术现状，依次采用丙酮粉富集酶蛋白、硫酸铵分级沉淀、强阴离子交换色谱、凝胶介质层析、分子鉴定、酶学性质分析等技术及优化工艺，分离制备了氨基酸序列结构、分子量、等电点、酶学性质等明确的两种茶叶多酚氧化酶同工酶单体。该方法不仅具有成本低、制备量大、针对性强、操作周期短等优点，而且对深化茶叶多酚氧化酶同工酶的分离纯化技术、推动利用茶叶多酚氧化酶同工酶单体定向酶促合成茶黄素组分以及茶叶多酚氧化酶优势同工酶开发利用、同工酶固定化、酶蛋白结构解析、酶基因克隆与功能验证等具有重要理论实践意义。