公开(公告)号：CN104818338B

公开(公告)日：2018-02-23

申请号：CN201510249614.8

申请日：2015-05-15

Applicant: 王海滨

Inventor： 王海滨 ,  周其玲 ,  冯小霞 ,  陈厦 ,  王棽 ,  刘立明 ,  李永利 ,  马洪滨 ,  王雪飞 ,  高志强 ,  王嫣

IPC: C12Q1/68

Abstract: 一种直接实时荧光定量PCR的方法，该方法包括如下步骤：1)用熔点为58℃～60℃的石蜡油混合物包被聚苯乙烯微球，并置于PCR扩增管管底；所述石蜡油混合物包括石蜡油和树脂；2)混合热启动DNA聚合酶、引物和探针、pH值3.5～4.5乙酸缓冲液、氯化镁、氯化钾和dNTP即制得荧光PCR扩增试剂；3)用所述石蜡油混合物封闭所述荧光PCR扩增试剂于步骤1)的PCR扩增管管底；4)石蜡油冷凝后，加入核酸裂解试剂；5)检测样品。本发明的方法，无需核酸制备的过程，可将微量样本直接加到PCR反应管中，直接在荧光PCR仪器上进行检测，具有操作简便、快速的优点。

公开(公告)号：CN104818338A

公开(公告)日：2015-08-05

申请号：CN201510249614.8

申请日：2015-05-15

Applicant: 王海滨

Inventor： 王海滨 ,  周其玲 ,  冯小霞 ,  陈厦 ,  王棽 ,  刘立明 ,  李永利 ,  马洪滨 ,  王雪飞 ,  高志强 ,  王嫣

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2563/149

Abstract: 一种直接实时荧光定量PCR的方法，该方法包括如下步骤：1)用熔点为58℃～60℃的石蜡油混合物包被聚苯乙烯微球，并置于PCR扩增管管底；所述石蜡油混合物包括石蜡油和树脂；2)混合热启动DNA聚合酶、引物和探针、pH值3.5～4.5乙酸缓冲液、氯化镁、氯化钾和dNTP即制得荧光PCR扩增试剂；3)用所述石蜡油混合物封闭所述荧光PCR扩增试剂于步骤1)的PCR扩增管管底；4)石蜡油冷凝后，加入核酸裂解试剂；5)检测样品。本发明的方法，无需核酸制备的过程，可将微量样本直接加到PCR反应管中，直接在荧光PCR仪器上进行检测，具有操作简便、快速的优点。