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公开(公告)号：CN110951799A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911340672.6
申请日：2019-12-23
Applicant: 福州大学 , 福建昌生生物科技发展有限公司
Abstract: 本发明提供了“一菌多酶”全细胞不对称合成(2S，3R)-对甲砜基苯丝氨酸的方法，属于生物催化和酶工程领域。通过在大肠杆菌BL21（DE3）工程菌中同时表达L-苏氨酸转醛酶（PsLTTA）、乙醇脱氢酶（ApADH）和甲酸脱氢酶（CbFDH），实现(2S，3R)-对甲砜基苯丝氨酸的不对称高效生物合成。本发明在常温常压下通过一步反应便可获得β-氨基醇类抗生素的关键手性砌块(2S，3R)-对甲砜基苯丝氨酸，同时解除了副产物乙醛对PsLTTA的抑制作用，为一种高效绿色生物合成途径。
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公开(公告)号：CN113528475A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202110831411.5
申请日：2021-07-22
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素‑‑睾酮中的应用。将羰基还原酶突变体PmCRm与甲酸脱氢酶BstFDH_m在大肠埃希氏菌中共表达，并以该共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂催化雄甾‑4‑烯‑3，17‑二酮合成睾酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性，可以在10 h以内完全转化28.8 g/L雄甾‑4‑烯‑3，17‑二酮生成目标产物睾酮，且无副产物产生，其底物投料量、转化率和时空转化率皆为国内生物法制备睾酮的最高水平，经过分离纯化，产物回收率高达95%以上，说明该生物催化剂是睾酮绿色合成的高效催化剂。
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公开(公告)号：CN110904188A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911342288.X
申请日：2019-12-23
Applicant: 福州大学 , 福建昌生生物科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种L-苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法，属于生物化学和酶工程领域。本发明取乙醛及乙醇脱氢酶反应液，随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况，计算OD340nm下降的平均反应速率VOD340nm，以乙醛浓度为自变量x，VOD340nm为因变量y，得到回归方程y＝ax，以及乙醛标准曲线。转醛反应液、L-苏氨酸转醛酶突变体全细胞反应液，充分混匀反应结束后，离心除去细胞沉淀，取上清液和乙醇脱氢酶反应液，随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况，计算OD340nm下降的平均速率VOD340nm；通过VOD340nm计算得到反应液中乙醛的浓度，以乙醛浓度的高低来筛选L-苏氨酸转醛酶突变体。本发明不受反应液中的杂质干扰，灵敏度和准确性高，重复性好，操作简便，便于推广应用。
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公开(公告)号：CN115786292B
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202211028698.9
申请日：2022-08-25
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种3β‑羟基甾体脱氢酶SfSDR及其在制备去氢表雄酮中的应用。本发明将3β‑羟基甾体脱氢酶SfSDR与葡萄糖脱氢酶BtGDH在大肠埃希氏菌中共表达，并以共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂协同酯酶Z03共同催化3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮合成去氢表雄酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性，可以在6 h以内完全转化32.8 g/L的3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮生成目标产物去氢表雄酮，无需添加有机溶剂且无副产物产生，经过分离纯化，产物回收率高达95%以上，说明该生物催化剂是去氢表雄酮绿色合成的高效催化剂。
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公开(公告)号：CN113430216B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202110845214.9
申请日：2021-07-26
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种苯丙酮单加氧酶，其氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得，并公开基于该苯丙酮单加氧酶的不对称生物催化合成亚砜类药物的技术方法。本发明通过基因挖掘筛选获得来源于Limnobacter sp.的苯丙酮单加氧酶基因，采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株，通过分子改造技术实现酶活力和立体选择性的提高。同时构建了单加氧酶突变体与不同脱氢酶的共表达菌株。以奥美拉唑硫醚为原料，采用全细胞或酶蛋白催化的方法，不对称催化合成光学纯埃索美拉唑。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物，没有副产物奥美拉唑砜，同时环境友好，是一种绿色生物催化合成途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118028392A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410229642.2
申请日：2024-02-29
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种多酶级联合成去甲肾上腺素的方法，以3，4‑二羟基苯甲醛、L‑苏氨酸、甲酸钠或甲酸、NAD+为原料，通过L‑苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶、酪氨酸脱羧酶的级联催化合成去甲肾上腺素。通过本发明的合成方法，产物去甲肾上腺素的转化率可达到99％，时空产率是目前已报到的最高水平，具有巨大的工业化应用前景，适宜进一步推广应用。
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公开(公告)号：CN118389613A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410669480.4
申请日：2024-05-28
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种多酶级联合成羟基酪醇的方法，包括：1)以3,4‑二羟基苯甲醛、L‑苏氨酸、甲酸钠、NAD+为原料，通过L‑苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶催化合成L‑苏式‑3‑(3,4‑二羟基苯基)丝氨酸；2)以L‑苏式‑3‑(3,4‑二羟基苯基)丝氨酸为底物，添加葡萄糖、NAD+并通过苯丝氨酸脱水酶、α‑酮酸脱羧酶、醛还原酶及葡萄糖脱氢酶级联催化合成羟基酪醇。利用本发明提供的合成方法，羟基酪醇的产率>99％，时空产率达到0.88g/L/h，为目前最高水平，具有巨大的工业化应用前景，适宜进一步推广应用。
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公开(公告)号：CN117646044A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202310823682.5
申请日：2023-07-06
Applicant: 福州大学 , 福建昌生生物科技发展有限公司
IPC: C12P13/00
Abstract: 本发明公开多酶级联合成(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇的方法，以D‑丝氨酸、对甲砜基苯甲醛和D‑丙氨酸为底物，利用氨基酸氧化酶、丙酮酸脱羧酶和转氨酶为催化剂，通过多酶级联反应合成(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇。合成路线为：D‑丝氨酸首先被氨基酸氧化酶转化为β‑羟基丙酮酸，β‑羟基丙酮酸和对甲砜基苯甲醛在丙酮酸脱羧酶的催化下生成(R)‑1‑对甲砜基苯基‑1‑羟基‑2‑氧代‑3‑丙醇(即中间产物2a)，中间产物2a和D‑丙氨酸继续在转氨酶的催化下转化为(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇。本方案无需添加有机溶剂且无副产物生成，转化率高达99.9％，建立了一条新的(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇的高效绿色酶法合成路线。
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公开(公告)号：CN117185971A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311136364.8
申请日：2023-09-05
Applicant: 福州大学
IPC: C07C315/04 , C12P13/00 , C07C317/32
Abstract: 本发明公开了一种化学酶法偶联合成氟苯尼考的方法，以β‑氟丙酮酸钠盐、对甲砜基苯甲醛和D‑丙氨酸为底物，在丙酮酸脱羧酶和转氨酶的级联催化下，“一锅法”合成氟苯尼考胺，再经酰胺化反应合成氟苯尼考。合成路线包括：β‑氟丙酮酸钠盐和对甲砜基苯甲醛在丙酮酸脱羧酶的催化下生成(1R)‑3‑氟‑1‑羟基‑1‑对甲砜基苯基‑2‑丙酮；(1R)‑3‑氟‑1‑羟基‑1‑对甲砜基苯基‑2‑丙酮和D‑丙氨酸继续被反应体系中的转氨酶转化为氟苯尼考胺，最后氟苯尼考胺经一步化学的酰胺化反应合成氟苯尼考。本发明与传统的氟苯尼考化学合成法相比，步骤更少，且中间涉及构型的步骤均由高立体选择性的酶催化替代，省却拆分步骤，反应过程更加绿色环保，原子经济性更高，适宜推广应用。
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公开(公告)号：CN113528475B
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202110831411.5
申请日：2021-07-22
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素‑‑睾酮中的应用。将羰基还原酶突变体PmCRm与甲酸脱氢酶BstFDH_m在大肠埃希氏菌中共表达，并以该共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂催化雄甾‑4‑烯‑3，17‑二酮合成睾酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性，可以在10 h以内完全转化28.8 g/L雄甾‑4‑烯‑3，17‑二酮生成目标产物睾酮，且无副产物产生，其底物投料量、转化率和时空转化率皆为国内生物法制备睾酮的最高水平，经过分离纯化，产物回收率高达95%以上，说明该生物催化剂是睾酮绿色合成的高效催化剂。
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