公开(公告)号：CN103289947A

公开(公告)日：2013-09-11

申请号：CN201310255508.1

申请日：2013-06-25

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 黄天培 ,  林群新 ,  关雄 ,  张灵玲 ,  吴昌标 ,  钱小莉 ,  郑颖 ,  沙莉 ,  黄响珠 ,  周勇 ,  林燕珍 ,  戴瑞卿

IPC: C12N1/21 ,  A01N47/44 ,  A01P5/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种杀松材线虫的工程菌及其应用。本发明的一种杀松材线虫的工程菌（CGMCCNO：7661），以松材线虫为靶标，通过生物活性测定法结合基因鉴定和质谱分析法获得获得杀松材线虫的Bt杀虫晶体蛋白；取表达载体pGEX-KG质粒，与重组质粒pMD18T-cry1Ea11构建融合表达载体pGEX-cry1Ea11，转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)，获得一种杀松材线虫工程菌BL21(DE3)-pGEX-cry1Ea11。本发明为进一步研究利用Bt杀虫晶体蛋白防治松材线虫的生物农药打下基础，拓宽了Bt杀虫谱，为生物防治松材线虫开辟了一条新的途径。

公开(公告)号：CN101161811A

公开(公告)日：2008-04-16

申请号：CN200610069339.2

申请日：2006-10-12

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 关雄 ,  郑毅 ,  黄志鹏 ,  黄必旺 ,  黄天培 ,  沙莉 ,  李今煜 ,  张群林 ,  吴昌标 ,  余洁 ,  张灵玲

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/56 ,  A01N63/02 ,  C12R1/125

Abstract: 一种高产耐高温蛋白酶的苏云金芽孢杆菌筛选及培养方法，采用酪蛋白底物琼脂鉴定平板初筛与发酵酶活测定复筛的方法获得高产耐高温蛋白酶苏云金芽孢杆菌Bt140；采用Plackett－Burman设计与响应面分析法快速获得了Bt140最佳的发酵产酶配方与发酵条件，最终摇瓶发酵水平可达918.56U/mL。Bt140生产耐高温蛋白酶时，不影响发酵结束收集芽孢生产杀虫剂，使该菌兼具有蛋白酶与杀虫剂两种产品的生产能力。以1吨发酵为例，除了获得相应的Bt杀虫剂外，还获得60～90Kg1万单位的酶粉。

公开(公告)号：CN101161811B

公开(公告)日：2010-08-25

申请号：CN200610069339.2

申请日：2006-10-12

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 关雄 ,  郑毅 ,  黄志鹏 ,  黄必旺 ,  黄天培 ,  沙莉 ,  李今煜 ,  张群林 ,  吴昌标 ,  余洁 ,  张灵玲

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/56 ,  A01N63/02 ,  C12R1/125

Abstract: 一种高产耐高温蛋白酶的苏云金芽孢杆菌筛选及培养方法，采用酪蛋白底物琼脂鉴定平板初筛与发酵酶活测定复筛的方法获得高产耐高温蛋白酶苏云金芽孢杆菌Bt140；采用Plackett-Burman设计与响应面分析法快速获得了Bt140最佳的发酵产酶配方与发酵条件，最终摇瓶发酵水平可达918.56U/mL。Bt140生产耐高温蛋白酶时，不影响发酵结束收集芽孢生产杀虫剂，使该菌兼具有蛋白酶与杀虫剂两种产品的生产能力。以1吨发酵为例，除了获得相应的Bt杀虫剂外，还获得60～90kg1万单位的酶粉。