公开(公告)号：CN116334117A

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202310116011.5

申请日：2023-02-14

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 张燎原 ,  孟婷 ,  陈登辉 ,  张基明 ,  叶秋丽 ,  古力 ,  张重义

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C12N15/57 ,  C07K14/415 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明公开了一种太子参环肽B体内生物合成表达载体及构建方法和合成方法，本发明选择GmPOPB作为体内合成环肽HB的蛋白酶，构建了pET28a‑MBP‑TEVsite‑TEV‑TEVsite‑HB‑J23100‑GmPOPB共表达载体，共表达载体含有两个启动子，其中T7启动子启动MBP融合蛋白的转录翻译，同时TEV蛋白酶识别切割位点完成线性HB前体与融合标签的分离，J23100启动子启动GmPOPB蛋白酶的转录翻译。细胞内线性HB前体在GmPOPB蛋白酶的催化下形成环肽HB，通过破碎细胞提取环肽HB。本发明通过体内生物合成方法合成太子参环肽B，该过程简单，成本低，可用于大规模制备环肽HB。