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公开(公告)号:CN105039356B
公开(公告)日:2019-07-12
申请号:CN201510570284.2
申请日:2015-09-09
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi沉默SceIF4E1基因培育抗条纹花叶病毒转基因甘蔗的方法,包括SceIF4E1基因的克隆、RNAi干扰载体构建、遗传转化、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定。以SceIF4E1作为RNAi干扰靶序列,经遗传转化后获得的转基因植株,产生了对甘蔗条纹花叶病毒不同株系的广谱抗性,具有抗病性好、抗性持久且生物安全性高的特点,使转基因甘蔗的培育摆脱了对抗源基因的依赖,并且可以有效缩短甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的方法培育抗花叶病转基因甘蔗,在转基因生物安全上,优于转入病毒序列的转基因甘蔗。
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公开(公告)号:CN105823889A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610217004.4
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: G01N33/68 , C12N15/8205 , G01N21/64 , G01N33/5097
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCMV?P3N?PIPO?GFP、pSCMV?P3N?PIPO?RFP、pSCMV?P3N?PIPO?YFP和pSCMV?P3N?PIPO?CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105039356A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510570284.2
申请日:2015-09-09
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi沉默SceIF4E1基因培育抗条纹花叶病毒转基因甘蔗的方法,包括SceIF4E1基因的克隆、RNAi干扰载体构建、遗传转化、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定。以SceIF4E1作为RNAi干扰靶序列,经遗传转化后获得的转基因植株,产生了对甘蔗条纹花叶病毒不同株系的广谱抗性,具有抗病性好、抗性持久且生物安全性高的特点,使转基因甘蔗的培育摆脱了对抗源基因的依赖,并且可以有效缩短甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的方法培育抗花叶病转基因甘蔗,在转基因生物安全上,优于转入病毒序列的转基因甘蔗。
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公开(公告)号:CN105823890B
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201610217176.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明涉及一种利用高粱花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SrMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSrMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSrMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSrMV‑P3N‑PIPO‑CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105823888A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610216221.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: G01N33/68 , C12N15/66 , C12N15/8205 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗条纹花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCSMV?P3N?PIPO?GFP、pSCSMV?P3N?PIPO?RFP、pSCSMV?P3N?PIPO?YFP和pSCSMV?P3N?PIPO?CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN118064387A
公开(公告)日:2024-05-24
申请号:CN202410172828.9
申请日:2024-02-07
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/40 , C12N15/82 , A01H6/82 , A01H6/46 , A01H5/00 , A01G7/06 , A01G22/45 , A01G22/55 , A01N63/40 , A01P1/00 , C12R1/94
Abstract: 本发明公开了一种甘蔗花叶病毒弱毒突变体的构建及其应用。所述突变体是在甘蔗花叶病毒SCMV‑FZ1的HC‑Pro蛋白上进行定点突变获得,所述定点突变是指将HC‑Pro蛋白上的第345位的氨基酸由F突变为Y得到;所述甘蔗花叶病毒SCMV‑FZ1的HC‑Pro蛋白编码序列如SEQ ID NO.1所示,所述甘蔗花叶病毒SCMV‑FZ1的HC‑Pro蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。SCMVSc的HC‑Pro蛋白是重要的致病因子,本发明鉴定到了其致病因子活性的关键氨基酸位点,通过对该位点的突变,创制了弱毒SCMVSc株系,并成功地用于交叉保护防治强毒SCMVSc株系对甘蔗的侵染。
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公开(公告)号:CN105823889B
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201610217004.4
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSCMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSCMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSCMV‑P3N‑PIPO‑CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105823890A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610217176.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: G01N33/68 , C12N15/8205 , G01N21/64 , G01N33/5097
Abstract: 本发明涉及一种利用高粱花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SrMV?P3N?PIPO?GFP、pSrMV?P3N?PIPO?RFP、pSrMV?P3N?PIPO?YFP和pSrMV?P3N?PIPO?CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105821051A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610217153.0
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8283
Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi阻断病毒胞间移动培育抗花叶病转基因甘蔗的方法,包括RNAi载体构建、遗传转化、转基因甘蔗植株的筛选鉴定及对花叶病的抗性鉴定。本发明采用融合PCR技术,克隆了SCMV的P3N?PIPO的编码序列,以pGBKT7?SCMV?P3NPIPO为诱饵从甘蔗的酵母文库中筛选到了与P3N?PIPO互作的甘蔗基因ScPCaP。以ScPCaP作为RNAi干扰靶序列,经遗传转化后获得了对SCMV,SrMV和SCSMV均有抗性的转基因甘蔗植株,并具有抗性广谱、抗病性好、抗性持久的特点,有效缩短了甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的利用RNAi阻断病毒胞间移动的方法培育抗花叶病转基因甘蔗,在转基因生物安全上,优于转入病毒序列的转基因甘蔗。
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公开(公告)号:CN105039355A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510570201.X
申请日:2015-09-09
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi沉默翻译起始因子基因培育抗花叶病甘蔗的方法,包括SceIF4E1基因和SceIF4E2基因的克隆、RNAi干扰载体构建、遗传转化、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定。以SceIF4E1和SceIF4E2作为RNAi干扰靶序列,经遗传转化后获得的转基因植株,产生了对甘蔗花叶病的三种病原即甘蔗花叶病毒、高粱花叶病毒和甘蔗条纹花叶病毒不同株系的广谱抗性,具有抗病性好、抗性持久且生物安全性高的特点,使转基因甘蔗的培育摆脱了对抗源基因的依赖,并且可以有效缩短甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的方法培育抗花叶病转基因甘蔗,在转基因生物安全上,优于转入病毒序列的转基因甘蔗。
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