公开(公告)号：CN102421893A

公开(公告)日：2012-04-18

申请号：CN201080019156.4

申请日：2010-04-26

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 东畑正敏 ,  奥田光美 ,  佐藤刚 ,  远藤圭二 ,  佐伯胜久

IPC: C12N9/54 ,  C11D3/386

CPC classification number: C11D3/38618 ,  C11D3/386 ,  C11D3/38681 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明提供一种碱性蛋白酶变体，其源自于由SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列构成的或由与其具有90％或更高一致性的氨基酸序列构成的碱性蛋白酶，该变体具有突变，其中一个或多个选自于所述SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列的(a)位点6、(b)位点15、(c)位点16、(d)位点65、(e)位点66、(f)位点82、(g)位点83、(h)位点204、(i)位点319和(j)位点337或其对应位点的氨基酸残基被下列氨基酸残基取代：(a)或其对应位点：Typ、Leu、Val、Ile、Met、Tyr、Gln、Lys、Thr、Phe、Arg、Ser、Cys、Ala、或His；(b)或其对应位点：Glu、Met、Asp、Val、Gln、Arg、Cys、Trp、Ala、或Phe；(c)或其对应位点：Met、Glu、Arg、Val、Lys、Phe、Tyr、Ile、His、Asp、或Cys；(d)或其对应位点：Trp；(e)或其对应位点：His、Trp、Ser、或Leu；(f)或其对应位点：Ala、Glu、Gln、Ser、Cys、Gly、His、Lys、Arg、Met、或Asn；(g)或其对应位点：Ala、Ser、或Cys；(h)或其对应位点：Glu、Asp、Cys、Val、Thr、Pro、His、Ile、Trp、Ser、Asn、Lys、或Arg；(i)或其对应位点：Trp、Val、Thr、Leu、Ile、Cys、Glu、Lys、Tyr、Arg、Phe、Gln、Met、Pro、Asp、Asn、His、或Ser；和(j)或其对应位点：Arg、Gly、Ser、Lys、Gln、Thr、His、Ala、Cys、或Val。

公开(公告)号：CN1570092A

公开(公告)日：2005-01-26

申请号：CN200410045104.0

申请日：2004-04-09

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 佐藤刚 ,  奥田光美 ,  小山伸吾 ,  伊泽启文 ,  小林彻

IPC: C12N9/00 ,  C12N9/50

CPC classification number: C11D3/386 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明提供选自序列号1所示氨基酸序列中(a)63位、(b)89位、(c)120位、(d)63位及187位、(e)226位、(f)296位、(g)304位或相当于所述位点的氨基酸残基是下述氨基酸残基的碱性蛋白酶及其编码基因：(a)位点：丝氨酸、(b)位点：组氨酸、(c)位点：精氨酸、(d)位点：丝氨酸、(e)位点：酪氨酸、(f)位点：缬氨酸、(g)位点：丝氨酸。所提供的蛋白酶不仅对复合污渍具有良好的洗净效果还提高了耐热性。

公开(公告)号：CN1357624A

公开(公告)日：2002-07-10

申请号：CN01130397.2

申请日：2001-11-22

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 秦田勇二 ,  小川晃范 ,  影山泰 ,  佐藤刚 ,  荒木裕行 ,  住友伸行 ,  奥田光美 ,  佐伯胜久

IPC: C12N9/50 ,  C12N15/57 ,  C12N15/63 ,  C11D3/386

CPC classification number: C12N9/54 ,  C11D3/38609 ,  C11D3/38618

Abstract: 本发明提供了一种碱性蛋白酶;一种编码该碱性蛋白酶的基因;一种含有该基因的重组载体;一种含有该重组载体的转化体;和一种含有该碱性蛋白酶的洗涤剂组合物。本发明能够提供甚至在有高浓度脂肪酸下具有活性、具有高的比活和洗涤性,并且可用作加入到洗涤剂中的酶的碱性蛋白酶。

公开(公告)号：CN100494364C

公开(公告)日：2009-06-03

申请号：CN03107456.1

申请日：2003-03-21

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 奥田光美 ,  佐藤刚 ,  斋藤和广 ,  住友伸行 ,  伊泽启文 ,  佐伯胜久 ,  小林彻 ,  野村昌史

IPC: C12N9/50 ,  C12N15/57 ,  C12N15/63 ,  C11D3/386

CPC classification number: C11D3/386 ,  C12N9/54 ,  C12Y304/21062

Abstract: 本发明提供了一种碱性蛋白酶，其中，在SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的(a)65号位置，(b)101号位置，(c)163号位置，(d)170号位置，(e)171号位置，(f)273号位置，(g)320号位置，(h)359号位置，或(i)387号位置或与之相应的位置上的氨基酸残基是从以下氨基酸残基中选择的：位置(a)：脯氨酸，位置(b)：天冬酰胺，位置(c)：组氨酸，天冬氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，天冬酰胺，丝氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，谷氨酰胺，苏氨酸或缬氨酸，位置(d)：缬氨酸或亮氨酸，位置(e)：丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸或苏氨酸，位置(f)：异亮氨酸，甘氨酸或苏氨酸，位置(g)：苯丙氨酸，丙氨酸，苏氨酸，亮氨酸，异亮氨酸或甘氨酸，位置(h)：丝氨酸，亮氨酸，缬氨酸，异亮氨酸，或谷氨酰胺，和位置(i)：丙氨酸，赖氨酸，谷氨酰胺，谷氨酸，精氨酸和组氨酸。本发明能够有效生产并提供一种碱性蛋白酶，这种蛋白酶在即使存在高浓度脂肪酸的条件下也具有活性，并且在去除不仅含有蛋白，而且还含有皮脂等的复杂污渍方面具有出色的去污力，因此，可以作为一种酶掺入洗涤剂中。

公开(公告)号：CN109312323A

公开(公告)日：2019-02-05

申请号：CN201780035551.3

申请日：2017-06-07

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 山田耕造 ,  佐藤刚

IPC: C12N15/09 ,  C11D3/386 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明提供一种对螯合剂的稳定性得以提升的突变碱性蛋白酶。本发明的突变碱性蛋白酶是在序列号2所表示的氨基酸序列或与其具有至少95％的同一性的氨基酸序列中，与序列号2所表示的氨基酸序列的294位相当的位置上的氨基酸残基被取代。

公开(公告)号：CN102421893B

公开(公告)日：2014-10-29

申请号：CN201080019156.4

申请日：2010-04-26

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 东畑正敏 ,  奥田光美 ,  佐藤刚 ,  远藤圭二 ,  佐伯胜久

IPC: C12N9/54

CPC classification number: C11D3/38618 ,  C11D3/386 ,  C11D3/38681 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明提供一种碱性蛋白酶变体，其源自于由SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列构成的或由与其具有90％或更高一致性的氨基酸序列构成的碱性蛋白酶，该变体具有突变，其中一个或多个选自于所述SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列的(a)位点6、(b)位点15、(c)位点16、(d)位点65、(e)位点66、(f)位点82、(g)位点83、(h)位点204、(i)位点319和(j)位点337或其对应位点的氨基酸残基被下列氨基酸残基取代：(a)或其对应位点：Typ、Leu、Val、Ile、Met、Tyr、Gln、Lys、Thr、Phe、Arg、Ser、Cys、Ala、或His；(b)或其对应位点：Glu、Met、Asp、Val、Gln、Arg、Cys、Trp、Ala、或Phe；(c)或其对应位点：Met、Glu、Arg、Val、Lys、Phe、Tyr、Ile、His、Asp、或Cys；(d)或其对应位点：Trp；(e)或其对应位点：His、Trp、Ser、或Leu；(f)或其对应位点：Ala、Glu、Gln、Ser、Cys、Gly、His、Lys、Arg、Met、或Asn；(g)或其对应位点：Ala、Ser、或Cys；(h)或其对应位点：Glu、Asp、Cys、Val、Thr、Pro、His、Ile、Trp、Ser、Asn、Lys、或Arg；(i)或其对应位点：Trp、Val、Thr、Leu、Ile、Cys、Glu、Lys、Tyr、Arg、Phe、Gln、Met、Pro、Asp、Asn、His、或Ser；和(j)或其对应位点：Arg、Gly、Ser、Lys、Gln、Thr、His、Ala、Cys、或Val。

公开(公告)号：CN109312323B

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN201780035551.3

申请日：2017-06-07

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 山田耕造 ,  佐藤刚

IPC: C12N15/09 ,  C11D3/386 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明提供一种对螯合剂的稳定性得以提升的突变碱性蛋白酶。本发明的突变碱性蛋白酶是在序列号2所表示的氨基酸序列或与其具有至少95％的同一性的氨基酸序列中，与序列号2所表示的氨基酸序列的294位相当的位置上的氨基酸残基被取代。

公开(公告)号：CN100587065C

公开(公告)日：2010-02-03

申请号：CN200410045104.0

申请日：2004-04-09

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 佐藤刚 ,  奥田光美 ,  小山伸吾 ,  伊泽启文 ,  小林彻

IPC: C12N9/00 ,  C12N9/50

CPC classification number: C11D3/386 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明提供选自序列号1所示氨基酸序列中(a)63位、(b)89位、(c)120位、(d)63位及187位、(e)226位、(f)296位、(g)304位或相当于所述位点的氨基酸残基是下述氨基酸残基的碱生蛋白酶及其编码基因：(a)位点：丝氨酸、(b)位点：组氨酸、(c)位点：精氨酸、(d)位点：丝氨酸、(e)位点：酪氨酸、(f)位点：缬氨酸、(g)位点：丝氨酸。所提供的蛋白酶不仅对复合污渍具有良好的洗净效果还提高了耐热性。

公开(公告)号：CN101560509A

公开(公告)日：2009-10-21

申请号：CN200910007668.8

申请日：2001-11-22

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 秦田勇二 ,  小川晃范 ,  影山泰 ,  佐藤刚 ,  荒木裕行 ,  住友伸行 ,  奥田光美 ,  佐伯胜久

IPC: C12N9/54 ,  C12N15/57 ,  C12N15/63 ,  C12N1/00 ,  C11D3/386 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明提供了一种碱性蛋白酶；一种编码该碱性蛋白酶的基因；一种含有该基因的重组载体；一种含有该重组载体的转化体；和一种含有该碱性蛋白酶的洗涤剂组合物。本发明能够提供甚至在有高浓度脂肪酸下具有活性、具有高的比活性和洗涤性，并且可用作加入到洗涤剂中的酶的碱性蛋白酶。

公开(公告)号：CN1539966A

公开(公告)日：2004-10-27

申请号：CN200410045102.1

申请日：2004-04-09

Applicant: 花王株式会社

Inventor： 奥田光美 ,  佐藤刚 ,  泷村靖 ,  住友伸行 ,  小林彻

IPC: C12N9/00 ,  C12N9/50

CPC classification number: C12N9/54 ,  C11D3/386

Abstract: 本发明提供选自序列号1所示氨基酸序列中(a)15位、(b)16位、(c)166位、(d)167位、(e)187位、(f)346位、(g)405位或相当于所述位点的氨基酸残基是下述氨基酸残基的碱性蛋白酶及其编码基因：(a)位点：组氨酸、(b)位点：苏氨酸或谷氨酰胺、(c)位点：甘氨酸、(d)位点：缬氨酸、(e)位点：丝氨酸、(f)位点：精氨酸、(g)位点：天冬氨酸。所提供的蛋白酶不仅对复合污渍具有良好的洗净效果还提高了蛋白质的分泌量和比活性，从而提高了生产性。