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公开(公告)号：CN116731132A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310589733.2
申请日：2023-05-22
Applicant: 蚌埠医学院
IPC: C07K14/35 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/04 , A61P31/06 , A61P37/04 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种结核分枝杆菌GroES重组蛋白的制备方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明以H37Ra基因组为模板，体外扩增获得GroES基因，构建重组pET‑28a‑GroES质粒，诱导表达和纯化获得GroES蛋白。经SDS‑PAGE和Westernblot结果显示，成功表达和纯化重组GroES蛋白。本发明使用纯化的重组GroES蛋白体外刺激PBMC后扩增培养，发现GroES蛋白具有显著地激活人γδT细胞活化增殖，比对照组增殖提高了3‑5倍。本发明在Mtb‑HAg耐热混合多肽中发现GroES蛋白是其主要成分之一，可在体外促进γδT细胞增殖的功能，为进一步研究GroES蛋白体外激活γδT细胞增殖机制，以及预防、治疗性疫苗和快速诊断试剂的研发奠定基础为结核病诊断和治疗策略奠定基础。
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公开(公告)号：CN113637689A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202111054257.1
申请日：2021-09-09
Applicant: 蚌埠医学院
IPC: C12N15/31 , C12N15/70 , C07K14/35 , C07K16/12 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种密码子优化的基因、重组表达载体、重组蛋白及多克隆抗体的制备方法和应用。本发明提供了一种密码子优化的PE_PGRS45基因，所述PE_PGRS45基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用本发明所述PE_PGRS45基因能够用于制备效价高的多克隆抗体。本发明具体实施例中试验结果表明，该基因的密码子适应指数(CAI)从0.73增加到0.90。
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公开(公告)号：CN117866896A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202410048833.9
申请日：2024-01-12
Applicant: 蚌埠医学院
IPC: C12N5/0786 , A61K35/15 , A61P35/00 , A61P31/06
Abstract: 本发明提供了一种Mtb‑HAg诱导的M2b型巨噬细胞来源外泌体及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了Mtb‑HAg在制备沉默免疫应答的制剂中的应用；所述沉默免疫应答包括抑制γδT细胞发挥免疫作用。在本发明中，Mtb‑HAg诱导的M2b来源外泌体能够抑制γδT细胞的免疫活性；所述Mtb‑HAg诱导的M2b来源外泌体能抑制γδT细胞的活力、促进γδT细胞凋亡、抑制γδT细胞增殖以及抑制γδT细胞杀伤肝癌细胞HepG2。本发明为Mtb在胞内的存活机制以及免疫逃逸机制提供了强有力的依据，同时对TB的治疗及生物标志物的开发与研究提供了一定的理论依据与新的研究思路。
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公开(公告)号：CN116444633A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310589726.2
申请日：2023-05-22
Applicant: 蚌埠医学院
IPC: C07K14/35 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/04 , A61P31/06 , A61P37/04 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种结核分枝杆菌GroEL1重组蛋白的制备方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明利用原核表达系统表达并纯化结核分枝杆菌H37Ra株GroEL1蛋白，并使用纯化后的重组GroEL1蛋白刺激不同个体人外周血γδT细胞，发现重组GroEL1蛋白能显著地刺激人γδT细胞活化增殖，流式细胞术检测γδT细胞的比例高达20％左右，高于空白对照组和IL‑2组的3‑5倍，成功地从Mtb的H37Ra菌株的耐热混合多肽中寻找到可有效刺激人γδT细胞增殖的活性多肽分子GroEL1蛋白，为未来GroEL1蛋白用于结核病的预防、诊断和治疗奠定基础。
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