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公开(公告)号:CN117106940A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202311306112.5
申请日:2023-10-10
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及病原菌检测方法领域,具体公开了一种鉴别布鲁氏菌的引物组及其检测方法和应用,所述引物组包括引物IS711、引物S、引物M、引物EA‑F、引物EA‑R、引物IA19‑F和引物IA19‑R。本发明提供了鉴别布鲁氏菌的引物组,建立了一种特异、敏感、快速的多重PCR方法,可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌和疫苗株A19的检测鉴别。
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公开(公告)号:CN111117941B
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN201911403588.4
申请日:2019-12-31
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/66 , G01N33/569 , C12R1/01
Abstract: 一种猪种布鲁氏菌IalB基因缺失菌株及其构建方法和应用,该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌IalB基因得到的,其主要步骤为:以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板,PCR扩增得到IalB基因上、下游同源臂,与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒,获得同源重组缺失质粒pUC18‑IalB‑KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞,经PCR鉴定,所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌IalB缺失菌株。与野生型菌株相比,该缺失菌株表现出细胞聚合性增强、生长活力减弱等特点,提示该缺失菌株可作为制备布鲁氏菌减毒活疫苗的良好材料。
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公开(公告)号:CN119662555A
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202411824574.0
申请日:2024-12-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/42 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种基于鼠抗牛IgG单克隆抗体的羊奶掺假牛奶快速检测胶体金试剂盒及其应用,属于畜牧兽医技术领域。本发明公开的一种基于鼠抗牛IgG单克隆抗体的羊奶掺假牛奶快速检测胶体金试剂盒,含有鼠抗牛IgG单克隆抗体。本发明试剂盒可以快速便捷检测羊奶中掺假牛奶,与现有技术相比,具有灵敏度更高、操作更简单、不依赖实验室条件、便于在生产中应用等优点。
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公开(公告)号:CN116789815A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310766951.9
申请日:2023-06-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/85 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/531 , C07K14/23
Abstract: 本发明提供了一种用于检测布鲁氏菌Bp26的特异性纳米抗体的制备方法,该方法利用Bp26重组蛋白在布鲁氏菌噬菌体展示文库中进行筛选,得到五种Bp26特异性纳米抗体的核苷酸和氨基酸序列,所述五种Bp26特异性纳米抗体包括纳米抗体Nb1、纳米抗体Nb2、纳米抗体Nb3、纳米抗体Nb4、纳米抗体Nb5。本发明还提供了一种所述Bp26特异性纳米抗体的表达载体的构建方法,及利用该构建方法构建的表达载体的应用,所述表达载体表达的融合蛋白可用于建立一种操作简便、快速的竞争ELISA方法,来检测血清中布鲁氏菌Bp26抗体。本发明的纳米抗体亲和力高,能特异性识别布鲁氏菌外膜蛋白Bp26,有效阻断布鲁氏菌阳性血清与Bp26的结合。
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公开(公告)号:CN110699312B
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN201911190912.9
申请日:2019-11-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 一株猪种布鲁氏菌BI‑1基因缺失菌株及其构建方法和应用,该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌BI‑1基因得到的,其主要步骤为:以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板,PCR扩增得到BI‑1基因上、下游同源臂,与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒,获得同源重组缺失质粒pUC18‑BI1‑KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞,经PCR鉴定,所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌BI‑1缺失菌株。与野生型菌株相比,该缺失菌株表现出生长速度减缓,菌落减小,细胞膜通透性增加,细胞聚合性增强等特点,提示该缺失菌株具有作为布鲁氏菌减毒活疫苗的潜质。
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公开(公告)号:CN118477174B
公开(公告)日:2025-01-21
申请号:CN202410716374.7
申请日:2024-06-04
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种布鲁氏菌OMP16单克隆抗体在制备抑制布鲁氏菌的产品中的应用,布鲁氏菌OMP16单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。经体内和体外试验,本发明验证了OMP16单克隆抗体作为一种治疗性抗体在治疗布鲁氏菌病上的潜力。
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公开(公告)号:CN117106940B
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202311306112.5
申请日:2023-10-10
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及病原菌检测方法领域,具体公开了一种鉴别布鲁氏菌的引物组及其检测方法和应用,所述引物组包括引物IS711、引物S、引物M、引物EA‑F、引物EA‑R、引物IA19‑F和引物IA19‑R。本发明提供了鉴别布鲁氏菌的引物组,建立了一种特异、敏感、快速的多重PCR方法,可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌和疫苗株A19的检测鉴别。
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公开(公告)号:CN116789815B
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202310766951.9
申请日:2023-06-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/85 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/531 , C07K14/23
Abstract: 本发明提供了一种用于检测布鲁氏菌Bp26的特异性纳米抗体的制备方法,该方法利用Bp26重组蛋白在布鲁氏菌噬菌体展示文库中进行筛选,得到五种Bp26特异性纳米抗体的核苷酸和氨基酸序列,所述五种Bp26特异性纳米抗体包括纳米抗体Nb1、纳米抗体Nb2、纳米抗体Nb3、纳米抗体Nb4、纳米抗体Nb5。本发明还提供了一种所述Bp26特异性纳米抗体的表达载体的构建方法,及利用该构建方法构建的表达载体的应用,所述表达载体表达的融合蛋白可用于建立一种操作简便、快速的竞争ELISA方法,来检测血清中布鲁氏菌Bp26抗体。本发明的纳米抗体亲和力高,能特异性识别布鲁氏菌外膜蛋白Bp26,有效阻断布鲁氏菌阳性血清与Bp26的结合。
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公开(公告)号:CN116254319A
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202310407844.7
申请日:2023-04-17
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种基于荧光素酶报告基因系统鉴定circSMARCA5的方法,属于基因工程技术领域。本发明公开的一种基于荧光素酶报告基因系统鉴定circSMARCA5的方法,利用pGL4‑circSMARCA5‑Luc‑CMV‑IRES2重组载体进行鉴定。本发明方法既可以鉴定circSMARCA5的真实存在,又可以实时监测circSMARCA5在细胞中的形成变化。
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公开(公告)号:CN113337530A
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN202110622916.0
申请日:2021-06-04
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/20 , C12N15/62 , C12N15/10 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K14/555 , C07K1/14 , C07K1/34 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的构建方法,包括以下步骤:(1)bIFNT成熟肽基因的扩增与获取;(2)bIFNT成熟肽基因克隆质粒的构建;(3)可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的构建;其中,所述可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的bIFNT成熟肽的基因序列如SEQ.ID.NO.1所示。同时,本发明还公开了可溶性bIFNT成熟肽表达菌株的构建方法及产物的诱导表达和纯化方法。本发明提供的方法成功构建了与天然bIFNT成熟肽基因序列完全一致的可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株和可溶性bIFNT成熟肽表达菌株,应用大肠杆菌原核表达体系,可实现低成本大规模制备rbIFNT。
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