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公开(公告)号：CN114480500B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202210214443.5
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/66 , A01K67/033
Abstract: 本发明提供了一种转基因丝胶茧生物反应器的构建方法，其通过转基因技术获得两种丝胶茧系统，选取丝胶茧中丝胶含量较多的一种的丝胶茧为生物反应器，通过以Ser1为启动子，增强型绿色荧光蛋白EGFP为目的基因，构建转基因表达载体并且获得转基因家蚕。本发明根据利用piggyBac介导的家蚕遗传改良技术，利用转基因丝胶茧作为注射受体，在家蚕中部丝腺表达外源蛋白，使外源蛋白的提取和纯化更加容易，为探索开发利用丝胶茧受体表达重组蛋白提供素材基础。
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公开(公告)号：CN114540364B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202210213529.6
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N15/55 , A01K67/033
Abstract: 本发明提供一种提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法及其家蚕品种，提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法通过GAL4/UAS系统，分别构建了在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmDimm和特异性敲除BmYki和BmSd，均获得了后部丝腺增大的转基因家蚕；通过在家蚕后部丝腺中特异性敲除BmYki能提高家蚕的丝素蛋白含量，或通过在家蚕后部丝腺中特异性敲除BmSd能提高家蚕的丝素蛋白含量，或通过在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmDimm能提高家蚕的丝素蛋白含量。本发明根据家蚕基因组序列数据库中家蚕丝腺表达内源基因的序列密码子偏好性，对Cas9蛋白的基因序列进行了优化设计，使Cas9基因更有利于在家蚕个体丝腺中表达；通过GAL4/UAS系统及CRISPR/Cas9基因编辑技术对家蚕丝腺进行了组织特异性的敲除和过表达。
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公开(公告)号：CN114717261B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202210212501.0
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
Abstract: 本发明提供一种通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法及其家蚕品种，其中所述通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法通过特异启动子FibH、FibL调控家蚕内源丝蛋白FibL、P25基因，育成四种蚕丝机械性能优异的家蚕品系即HL、LL、HP、LP，育成之品系由于丝素蛋白含量和组装的差异，使蚕丝机械性能较其改造前大幅提升，相较改良前提高幅度最大可达1倍以上，该蚕丝可作为一种良好的材料使用于医学、军工、光电等各个领域，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN114480410A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210214298.0
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/89 , A01K67/04
Abstract: 本发明提供一种利用袋蛾丝蛋白提高蚕丝机械性能的转基因方法及其家蚕品种，其通过构建一种特异表达外源袋蛾丝蛋白EvH的家蚕转基因系统、家蚕转基因系统通过蚕丝蛋白FibH启动子启动在特异部位上调、转基因表达载体以袋蛾EvH蛋白的N端序列为基础，根据家蚕密码子偏好进行优化后进行构建转基因。本发明育成蚕丝机械性能大幅提高的家蚕品系。育成之品系生产的蚕丝具有优异的机械性能。
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公开(公告)号：CN114717261A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210212501.0
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
Abstract: 本发明提供一种通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法及其家蚕品种，其中所述通过特异调控家蚕内源丝蛋白提高蚕丝机械性能的方法通过特异启动子FibH、FibL调控家蚕内源丝蛋白FibL、P25基因，育成四种蚕丝机械性能优异的家蚕品系即HL、LL、HP、LP，育成之品系由于丝素蛋白含量和组装的差异，使蚕丝机械性能较其改造前大幅提升，相较改良前提高幅度最大可达1倍以上，该蚕丝可作为一种良好的材料使用于医学、军工、光电等各个领域，具有重要的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114540364A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210213529.6
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N15/55 , A01K67/033
Abstract: 本发明提供一种提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法及其家蚕品种，提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法通过GAL4/UAS系统，分别构建了在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmDimm和特异性敲除BmYki和BmSd，均获得了后部丝腺增大的转基因家蚕；通过在家蚕后部丝腺中特异性敲除BmYki能提高家蚕的丝素蛋白含量，或通过在家蚕后部丝腺中特异性敲除BmSd能提高家蚕的丝素蛋白含量，或通过在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmDimm能提高家蚕的丝素蛋白含量。本发明根据家蚕基因组序列数据库中家蚕丝腺表达内源基因的序列密码子偏好性，对Cas9蛋白的基因序列进行了优化设计，使Cas9基因更有利于在家蚕个体丝腺中表达；通过GAL4/UAS系统及CRISPR/Cas9基因编辑技术对家蚕丝腺进行了组织特异性的敲除和过表达。
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公开(公告)号：CN114480509A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210214552.7
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/89 , C12N15/12 , C12N15/85 , C07K14/435 , A01K67/04
Abstract: 本发明提供了一种诱导家蚕泌丝器官完全退化制备纯丝胶茧的转基因方法及其家蚕品种，其通过改造的GAL4/UAS高效双元表达系统，在家蚕后部丝腺细胞中特异上调BmFMBP1、BmE93和BmSdRFP基因导致后部丝腺器官完全退化消失，但仍能正常吐丝结茧。本发明以GAL4/UAS双元表达系统，在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmFMBP1、BmE93和BmSdRFP基因，发现双荧光阳性后代的后部丝腺完全退化，但是亦有吐丝结茧能力，且结茧为纯丝胶茧，且后代可育，为新型生物功能材料提供了有力的材料基础。
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公开(公告)号：CN114540421B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202210213352.X
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
Abstract: 本发明提供了一种针对家蚕MSG和PSG表达基因的可控编辑方法，其通过GAL4/UAS系统，分别构建了若干个在家蚕MSG中特异启动表达的GAL4表达载体和多个在家蚕PSG中特异启动表达的GAL4表达载体，通过将表达Cas9基因序列与U6驱动表达的gRNA靶点一起串联在UAS序列下游，最终构建成UAS表达载体，进而利用GAL4/UAS遗传操作工具达到家蚕基因的可控编辑。本发明根据家蚕基因组序列数据库中家蚕基因的序列密码子偏好性，对Cas9蛋白的基因序列进行了优化设计，使Cas9基因更有利于在家蚕丝腺中高效表达。本发明利用该可控的基因编辑技术可精准研究家蚕丝腺基因的功能和创制更多的生物遗传资源。
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公开(公告)号：CN114540420A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210213288.5
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/65 , C12N15/113 , A01K67/04
Abstract: 本发明提供一种通过特异上调家蚕蜕皮激素应答因子制备转基因丝胶茧的方法及其家蚕品种，其通过在家蚕PSG特异上调家蚕蜕皮激素应答因子，家蚕蜕皮激素应答因子包括BmEcRA、BmUSP、BmE74、BmHR4、BmHR3、BmFtz‑f1，使得家蚕PSG不同程度的退化，影响或阻止了丝素蛋白的合成，通过特异上调家蚕蜕皮激素应答因子制备转基因丝胶茧的方法获得的转基因家蚕具有只生产丝胶蛋白的特性，使其只能生产丝胶茧。该家蚕的蚕丝可作为一种良好的材料使用于医学、军工、光电等各个领域，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN114457121A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210212412.6
申请日：2022-03-04
Applicant: 西南大学
IPC: C12N15/89 , C12N15/12 , C12N15/85 , C07K14/435 , A01K67/04
Abstract: 本发明提供一种利用BmYki及其异构体定向抑制家蚕丝素基因的转基因方法及其家蚕品种，其通过GAL4/UAS双元表达系统，在后部丝腺中特异过表达BmYki及其异构体，Yki及其异构体均导致后部丝腺的3个丝素蛋白编码基因fibH、fibL、P25显著被抑制，依据转基因方法所生产的蚕的蚕茧为薄茧，且后代可育。本发明获得了4种过表达BmYki异构体的UAS转基因表达载体，2种用后部丝腺启动子直接启动表达BmY1314的转基因表达载体；本发明提供的4种在家蚕后部丝腺中过表达BmYki异构体的转基因家蚕及2种用后部丝腺启动子直接启动表达BmY1314的转基因家蚕在不同程度上抑制丝素基因的表达。
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