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公开(公告)号：CN108300734A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810125980.6
申请日：2018-02-08
Abstract: 本发明提供一种基于pOp/LhG二元表达系统的外源基因清除技术基础载体及其制备方法和应用。针对原本只能应用于无性繁殖作物的外源基因清除技术，改进外源基因清除技术的基础载体，采用效应载体与激活载体组成的双载体形式，将效应载体和激活载体分别作用于不同亲本。效应载体包括标记基因表达框1、重组酶识别序列和重组酶表达框；激活载体包括标记基因表达框2、重组酶识别序列和激活表达框；分别含有效应载体的和含有激活载体的两亲本杂交时，实现特定组织和/或时期中将全部外源基因的清除，使该技术能够应用于有性繁殖作物中的异交繁殖作物，生物安全性高，具有良好的研究和应用前景。
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公开(公告)号：CN114807198A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210606954.1
申请日：2022-05-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种带有可视化蛋白融合抗生素筛选标记的CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。通过将抗生素筛选标记和可视化蛋白进行融合，由同一个启动子驱动，成功构建了一种载体大小更小、转化率更高的新的带有可视化蛋白标记的CRISPR/Cas9载体，并成功将该CRISPR/Cas9载体用于构建了番茄SlD14基因的基因编辑载体，最终培育出表型与野生番茄表型明显不同的转基因番茄植株，证明了该CRISPR/Cas9载体的有效性。
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公开(公告)号：CN113684225A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202110592538.6
申请日：2021-05-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种番茄SlHMGA3基因在培育果实延迟成熟的番茄中的应用，属于番茄基因工程技术领域，该应用方法先构建出番茄SlHMGA3基因CRISPR/Cas9表达载体；设计SlHMGA3基因的2个靶序列，然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后，插入到载体的两个酶切位点之间，得到SlHMGA3基因突变载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中，再利用其侵染番茄的子叶外植体，在阳性转基因番茄后代中筛选SlHMGA3基因突变但不包含基因敲除载体序列的番茄植株，获得果实延迟成熟的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。
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公开(公告)号：CN109757370A
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201711100467.3
申请日：2017-11-09
Applicant: 江苏省中国科学院植物研究所 , 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种福氏紫薇组培再生体系建立的方法，该方法利用福氏紫薇种子萌发获得无菌实生苗，然后剪取幼嫩叶片为外植体，通过对外植体进行脱分化培养，获得再分化能力强的愈伤组织，进而利用愈伤组织进行再分化培养和后续的生根培养实现再生植株。本发明利用无菌实生苗为外植体，避免了传统的外植体由于分化程度高而脱分化不易和污染率高的问题，操作简单、可行。具体包括以下几个步骤：1.实生无菌苗的获得；2.愈伤组织的诱导；3.愈伤组织的继代和增殖；4.愈伤组织的再分化；5.生根培养；6.植株再生。本发明中褔氏紫薇的愈伤增殖倍数达2.1倍，组培再生率达到95%以上，为紫薇遗传转化体系的建立奠定了坚实的实验基础。
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公开(公告)号：CN103215237A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310098927.9
申请日：2013-03-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N9/12 , C12N15/54 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12N5/10 , C12N1/21 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一组水稻抗褐飞虱基因及其编码蛋白及应用。本发明所述的一组水稻抗褐飞虱基因序列如SEQ ID NO.5～SEQ ID NO.8所示，其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.4所示。本发明的水稻抗虫相关蛋白影响植物的抗虫性。提高该蛋白编码基因的表达可导致感虫植物抗虫，从而可以培育植物抗褐飞虱转基因植物。所述基因及其编码蛋白可以应用于植物遗传改良。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101418349A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810243722.4
申请日：2008-12-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及水稻品种抗褐飞虱主基因Bph3的分子标记方法，属于遗传育种技术领域。对水稻抗虫品种Rathu Heenati(♀)与感虫品种02428(♂)杂交获得的F2各单株的基因型和F2:3各家系的抗褐飞虱的抗性级别进行遗传连锁分析，获得抗虫品种Rathu Heenati抗褐飞虱主基因Bph3。将该基因定位在分子标记A4和RM16533之间，且该区间的3个Indel标记RH784、RH786和RH007的选择效率均在97％左右。通过抗褐飞虱主基因的分子标记来检测抗虫品种Rathu Heenati及其衍生品种(系)中是否含有该主基因，可预测其对褐飞虱的抗性水平，大大提高抗褐飞虱水稻的选择效率。
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公开(公告)号：CN114940996B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202210599276.0
申请日：2022-05-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种番茄SlULT1基因在提高番茄抗旱性中的应用，涉及番茄基因工程技术领域，该应用方法首先设计SlULT1基因的2个靶序列，然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后，插入到CRISPR‑Cas9基因编辑载体的两个酶切位点之间，得到SlULT1基因编辑载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中，再利用其侵染番茄的子叶外植体，在阳性转基因番茄后代中筛选SlULT1基因突变但不包含基因编辑载体序列的番茄植株，获得抗旱性增强的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。
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公开(公告)号：CN113684225B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202110592538.6
申请日：2021-05-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种番茄SlHMGA3基因在培育果实延迟成熟的番茄中的应用，属于番茄基因工程技术领域，该应用方法先构建出番茄SlHMGA3基因CRISPR/Cas9表达载体；设计SlHMGA3基因的2个靶序列，然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后，插入到载体的两个酶切位点之间，得到SlHMGA3基因突变载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中，再利用其侵染番茄的子叶外植体，在阳性转基因番茄后代中筛选SlHMGA3基因突变但不包含基因敲除载体序列的番茄植株，获得果实延迟成熟的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。
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公开(公告)号：CN114940996A
公开(公告)日：2022-08-26
申请号：CN202210599276.0
申请日：2022-05-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种番茄SlULT1基因在提高番茄抗旱性中的应用，涉及番茄基因工程技术领域，该应用方法首先设计SlULT1基因的2个靶序列，然后将启动子连同包含2个靶点的sgRNA序列进行基因合成后，插入到CRISPR‑Cas9基因编辑载体的两个酶切位点之间，得到SlULT1基因编辑载体。构建的测序正确载体转入宿主细胞中，再利用其侵染番茄的子叶外植体，在阳性转基因番茄后代中筛选SlULT1基因突变但不包含基因编辑载体序列的番茄植株，获得抗旱性增强的番茄植株。为了便于对番茄植株进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记或具有抗性的抗生素标记物等。
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公开(公告)号：CN101956019B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201010536622.8
申请日：2008-12-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及水稻品种抗褐飞虱主基因Bph3的分子标记，属于遗传育种技术领域。对水稻抗虫品种RathuHeenati（♀）与感虫品种02428（♂）杂交获得的F2各单株的基因型和F2:3各家系的抗褐飞虱的抗性级别进行遗传连锁分析，获得抗虫品种RathuHeenati抗褐飞虱主基因Bph3。将该基因定位在分子标记A4和RM16533之间，且该区间的3个Indel标记RH784、RH786和RH007的选择效率均在97%左右。通过抗褐飞虱主基因的分子标记来检测抗虫品种RathuHeenati及其衍生品种（系）中是否含有该主基因，可预测其对褐飞虱的抗性水平，大大提高抗褐飞虱水稻的选择效率。
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