公开(公告)号：CN119410715A

公开(公告)日：2025-02-11

申请号：CN202411608722.5

申请日：2024-11-12

Applicant: 重庆医科大学附属第二医院

Inventor： 苏画画 ,  刘熙 ,  谭昌洪 ,  陈利芬

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/113 ,  C12N9/12 ,  C12N5/10 ,  C12N9/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  A61K31/7105 ,  A61K31/711 ,  A61P25/00

Abstract: 本发明公开了利用慢病毒技术敲低或过表达BV2小胶质细胞PDK4基因的方法及其在铁死亡研究中的应用，涉及分子生物学和细胞生物学技术领域，包括以下步骤：通过小鼠PDK4基因的全长序列设计shRNA序列以实现基因敲低，或设计cDNA序列以进行基因过表达；构建含有shRNA序列或cDNA序列的慢病毒载体，该载体带有绿色荧光蛋白GFP和嘌呤酶素抗性基因；然后进行慢病毒包装与纯化；获得并培养BV2小胶质细胞；将慢病毒感染BV2小胶质细胞，通过嘌呤霉素筛选，得到稳定敲低或稳定过表达PDK4基因的BV2小胶质细胞株。本方案能得到稳定表达PDK4的细胞株，并系统研究其在铁死亡中的作用。