公开(公告)号：CN103805599B

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201410069931.7

申请日：2014-02-28

Applicant: 青岛农业大学 ,  青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  柳楠 ,  刘积凤 ,  李和刚 ,  刘开东

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一对用于绵羊DKK4基因打靶的前导RNA(sgRNA)，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK4基因，其余81nt的RNA片段为能与Cas9n核酸酶结合的骨架RNA片段；所述的sgRNA-F如序列表的序列2所示，所述的sgRNA-R如序列表的序列4所示。本发明通过Cas9系统在细胞或个体水平上对绵羊DKK4基因进行敲除或修饰，以解析绵羊DKK4基因的功能、构建绵羊DKK4基因突变库，为绵羊育种服务。

公开(公告)号：CN103805605A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201410069919.6

申请日：2014-02-28

Applicant: 青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  李和刚 ,  柳楠 ,  程明 ,  刘开东 ,  刘积凤

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C40B40/08

Abstract: 本发明公开了一对靶向绵羊DKK2基因的sgRNA，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK2基因，其余81nt的RNA片段为能与Cas9n核酸酶结合的骨架RNA片段；所述的sgRNA-F如序列表的序列2所示，所述的sgRNA-R如序列表的序列4所示。本发明通过Cas9系统在细胞或个体水平上对绵羊DKK2基因进行敲除或修饰，以解析绵羊DKK2基因的功能、构建绵羊DKK2基因突变库，为绵羊育种服务。

公开(公告)号：CN103805605B

公开(公告)日：2016-11-30

申请号：CN201410069919.6

申请日：2014-02-28

Applicant: 青岛农业大学 ,  青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  李和刚 ,  柳楠 ,  程明 ,  刘开东 ,  刘积凤

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C40B40/08

Abstract: 本发明公开了一对靶向绵羊DKK2基因的sgRNA，该sgRNA对由sgRNA‑F和sgRNA‑R组成，sgRNA‑F和sgRNA‑R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK2基因，其余81nt的RNA片段为能与Cas9n核酸酶结合的骨架RNA片段；所述的sgRNA‑F如序列表的序列2所示，所述的sgRNA‑R如序列表的序列4所示。本发明通过Cas9系统在细胞或个体水平上对绵羊DKK2基因进行敲除或修饰，以解析绵羊DKK2基因的功能、构建绵羊DKK2基因突变库，为绵羊育种服务。

公开(公告)号：CN103865898A

公开(公告)日：2014-06-18

申请号：CN201410109035.9

申请日：2014-03-24

Applicant: 青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  李和刚 ,  刘开东 ,  程明 ,  柳楠 ,  刘积凤 ,  江科 ,  孙友德 ,  王建华 ,  汪文鑫

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10 ,  C40B40/08

CPC classification number: C12N9/22

Abstract: 本发明公开了一对特异识别绵羊MMP2基因的多肽，其由多肽甲和多肽乙组成；所述多肽甲由16个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸；所述多肽乙由16个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸。本发明可实现在细胞或个体水平上对绵羊MMP2基因进行敲除或修饰，以解析绵羊MMP2基因的功能、构建绵羊MMP2基因突变库或获得相关疾病模型，为绵羊育种及医药研发服务。

公开(公告)号：CN103805606A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201410069920.9

申请日：2014-02-28

Applicant: 青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  李和刚 ,  柳楠 ,  刘积凤 ,  程明

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C40B40/08

Abstract: 本发明公开了一对特异识别绵羊DKK1基因的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK1基因，其余81nt的RNA片段为能与Cas9n核酸酶结合的骨架RNA片段；所述的sgRNA-F如序列表的序列2所示，所述的sgRNA-R如序列表的序列4所示。本发明通过Cas9系统在细胞或个体水平上对绵羊DKK1基因进行敲除或修饰，以解析绵羊DKK1基因的功能、构建绵羊DKK1基因突变库，为绵羊育种服务。

公开(公告)号：CN103805606B

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201410069920.9

申请日：2014-02-28

Applicant: 青岛农业大学 ,  青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  李和刚 ,  柳楠 ,  刘积凤 ,  程明

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C40B40/08

Abstract: 本发明公开了一对特异识别绵羊DKK1基因的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK1基因，其余81nt的RNA片段为能与Cas9n核酸酶结合的骨架RNA片段；所述的sgRNA-F如序列表的序列2所示，所述的sgRNA-R如序列表的序列4所示。本发明通过Cas9系统在细胞或个体水平上对绵羊DKK1基因进行敲除或修饰，以解析绵羊DKK1基因的功能、构建绵羊DKK1基因突变库，为绵羊育种服务。

公开(公告)号：CN103805599A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201410069931.7

申请日：2014-02-28

Applicant: 青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  柳楠 ,  刘积凤 ,  李和刚 ,  刘开东

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一对用于绵羊DKK4基因打靶的前导RNA(sgRNA)，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-F和sgRNA-R分别由101个核苷酸组成，其中5’末端20nt的RNA片段能识别绵羊染色体上DKK4基因，其余81nt的RNA片段为能与Cas9n核酸酶结合的骨架RNA片段；所述的sgRNA-F如序列表的序列2所示，所述的sgRNA-R如序列表的序列4所示。本发明通过Cas9系统在细胞或个体水平上对绵羊DKK4基因进行敲除或修饰，以解析绵羊DKK4基因的功能、构建绵羊DKK4基因突变库，为绵羊育种服务。

公开(公告)号：CN103865898B

公开(公告)日：2017-03-01

申请号：CN201410109035.9

申请日：2014-03-24

Applicant: 青岛农业大学 ,  青岛市畜牧兽医研究所

Inventor： 赵金山 ,  李和刚 ,  刘开东 ,  程明 ,  柳楠 ,  刘积凤 ,  江科 ,  孙友德 ,  王建华 ,  汪文鑫

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10 ,  C40B40/08

Abstract: 本发明公开了一对特异识别绵羊MMP2基因的多肽，其由多肽甲和多肽乙组成；所述多肽甲由16个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸；所述多肽乙由16个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有一个双连氨基酸。本发明可实现在细胞或个体水平上对绵羊MMP2基因进行敲除或修饰，以解析绵羊MMP2基因的功能、构建绵羊MMP2基因突变库或获得相关疾病模型，为绵羊育种及医药研发服务。