公开(公告)号：CN105274070A

公开(公告)日：2016-01-27

申请号：CN201510681787.7

申请日：2015-10-20

Applicant: 南京普瑞特生物科技有限公司 ,  刘志斌

Inventor： 刘志斌 ,  刘经辉 ,  吴庆斌 ,  周敦秀

IPC: C12N9/04 ,  C12P33/06

CPC classification number: C12N9/0006 ,  C12P33/06 ,  C12Y101/01201

Abstract: 本发明提供7β-羟基类固醇脱氢酶突变子及其应用和合成方法；一种7β-类固醇脱氢酶的突变子，其特征在于所述突变子的氨基酸序列Seq ID NO：4，编码核苷酸序列为Seq ID NO：3；或所述突变子的氨基酸序列Seq ID NO：6，编码核苷酸序列为Seq ID NO：5。使用高效的7β-类固醇脱氢酶及其突变子酶，以及辅酶再生系统来催化合成胆酸化合物特别是熊去氧胆酸，底物浓度高达100g/L，转化率为99.2-99.5%，重量收率高达94-96%。酶可以通过发酵方法廉价易得，生产成本和产品质量优于化学合成方法，适合于工业化生产。

公开(公告)号：CN105441399A

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201510435545.X

申请日：2011-12-16

Applicant: 细胞制药有限公司

Inventor： D·沃伊斯特-博茨 ,  M·布劳恩 ,  A·艾格纳 ,  B·孙 ,  C·坎特佐 ,  S·布莱施 ,  D·巴孔伊 ,  W·胡梅尔

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12P33/06 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/0006 ,  C12N9/0008 ,  C12P33/00 ,  C12P33/02 ,  C12Y101/01201 ,  C12N15/62 ,  C12P33/06

Abstract: 本发明涉及新的7β-羟基类固醇脱氢酶突变体，编码这些酶突变体的序列，制备酶突变体的方法及其在胆酸化合物的酶促反应，特别是在制备熊去氧胆酸(UDCS)中的用途；本发明也涉及使用酶突变体合成UDCS的新方法；和使用重组的，经多重修饰的微生物制备UDCS。

公开(公告)号：CN109182284A

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201811135213.X

申请日：2018-09-28

Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司

Inventor： 黄斌 ,  周晶辉 ,  赵强 ,  许岗

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/00 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/0006 ,  C12N15/70 ,  C12P33/00 ,  C12Y101/01201

Abstract: 本发明提供了一种7β-羟基类固醇脱氢酶突变体、编码序列、重组表达载体、基因工程菌及应用。对来源于产气柯林斯菌的7β-羟基类固醇脱氢酶进行突变，获得的突变体Ca7β-2的还原活力提高了7.6倍，还原氧化活力比值提高了4倍，在浓度为100mM的UDCA条件下孵育1小时，活力仅下降了8.4％；在30℃，pH8.0条件下催化合成UDCA和T-UDCA，转化时间由24小时缩短到2小时，其中底物7-KLCA的摩尔转化率为100％，底物T-7-KLCA摩尔转化率为99.5％。突变后的7β-HSDH极大程度地降低了生产成本，提高了生产效率，更适合于工业化应用。

公开(公告)号：CN106636285A

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201710012364.5

申请日：2017-01-09

Applicant: 眉山市新功生物科技有限公司 ,  邦泰生物工程(深圳)有限公司

Inventor： 傅荣昭 ,  刘立辉 ,  刘滔滔 ,  曹磊

IPC: C12P33/00 ,  C12N9/04

CPC classification number: C12P33/00 ,  C12N9/0006 ,  C12Y101/01201

Abstract: 本发明涉及一种利用生物酶催化技术制备熊去氧胆酸的方法及其制备用7β‑类固醇脱氢酶。该方法以3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸为底物，在NADP、葡萄糖、葡萄糖脱氢酶以及缓冲溶液存在的条件下，用7β‑类固醇脱氢酶催化3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸制备熊去氧胆酸，其中7β‑类固醇脱氢酶来源于Turneriella parva。该方法操作简单、反应条件温和易控、反应时间短、对底物的转化率高达99.8%以上，所获得的产品的含量在98.5%以上。

公开(公告)号：CN102791876A

公开(公告)日：2012-11-21

申请号：CN201080062617.6

申请日：2010-11-30

Applicant: 细胞制药有限公司

Inventor： L·刘 ,  R·施密德 ,  A·艾格纳

IPC: C12P33/06 ,  C12N9/02 ,  C12P33/02

CPC classification number: C12N9/0006 ,  C12P33/00 ,  C12P33/02 ,  C12P33/06 ,  C12Y101/01201

Abstract: 本发明涉及获自柯林斯菌属(Collinsella)，特别地菌株产气柯林斯菌(Collinsella aerofaciens)的细菌的新7β-羟类固醇脱氢酶、编码所述酶的序列、用于产生所述酶的方法，及它们在胆酸化合物的酶促转化中，和特别地在熊去氧胆酸(UDCA)的产生中的用途；本发明也涉及用于合成UDCA的新方法。

公开(公告)号：CN107287272A

公开(公告)日：2017-10-24

申请号：CN201610191921.X

申请日：2016-03-30

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 赵淑娟 ,  王峥涛 ,  杨莉 ,  史杰 ,  周吉燕 ,  胡之璧 ,  张金家

IPC: C12P41/00 ,  C12P33/00 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12P41/00 ,  C12N9/0006 ,  C12P33/00 ,  C12Y101/01159 ,  C12Y101/01201

Abstract: 本发明涉及由牛磺熊去氧胆酸的制备方法，属于生物技术领域，采用同时表达7α-羟基类固醇脱氢酶(7α-HSDH)和7β-羟基类固醇脱氢酶(7β-HSDH)基因的大肠杆菌进行液体发酵，直接将牛磺鹅去氧胆酸转化为牛磺熊去氧胆酸，稳定、可控，转化率高，简单、快捷，条件温和，无污染，牛磺鹅去氧胆酸来源于鸡胆汁、鹅胆汁或鸭胆汁，易于获得，对牛磺熊去氧胆酸的理论研究及其药用价值的广泛利用具有重要意义。

公开(公告)号：CN102791876B

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201080062617.6

申请日：2010-11-30

Applicant: 细胞制药有限公司

Inventor： L·刘 ,  R·施密德 ,  A·艾格纳

IPC: C12N9/02 ,  C12P33/06 ,  C12P33/02

CPC classification number: C12N9/0006 ,  C12P33/00 ,  C12P33/02 ,  C12P33/06 ,  C12Y101/01201

Abstract: 本发明涉及获自柯林斯菌属(Collinsella)，特别地菌株产气柯林斯菌(Collinsella aerofaciens)的细菌的新7β-羟类固醇脱氢酶、编码所述酶的序列、用于产生所述酶的方法，及它们在胆酸化合物的酶促转化中，和特别地在熊去氧胆酸(UDCA)的产生中的用途；本发明也涉及用于合成UDCA的新方法。

公开(公告)号：CN103502442A

公开(公告)日：2014-01-08

申请号：CN201180067680.3

申请日：2011-12-16

Applicant: 细胞制药有限公司

Inventor： D·沃伊斯特-博茨 ,  M·布劳恩 ,  A·艾格纳 ,  B·孙 ,  C·坎特佐 ,  S·布莱施 ,  D·巴孔伊 ,  W·胡梅尔

IPC: C12N9/04 ,  C12P33/02 ,  C12P33/06

CPC classification number: C12N9/0006 ,  C12N9/0008 ,  C12P33/00 ,  C12P33/02 ,  C12Y101/01201 ,  C12P33/06

Abstract: 本发明涉及新的7β-羟基类固醇脱氢酶突变体，编码这些酶突变体的序列，制备酶突变体的方法及其在胆酸化合物的酶促反应，特别是在制备熊去氧胆酸(UDCS)中的用途；本发明也涉及使用酶突变体合成UDCS的新方法；和使用重组的，经多重修饰的微生物制备UDCS。