公开(公告)号：WO2014175512A1

公开(公告)日：2014-10-30

申请号：PCT/KR2013/007423

申请日：2013-08-19

Applicant: 서울대학교산학협력단

Inventor： 정택동 ,  황인성 ,  김은중 ,  전창수

IPC: C07K19/00 ,  C12N5/079

CPC classification number: C07K14/4756 ,  C07K14/43595 ,  C07K14/705 ,  C07K2319/20 ,  C07K2319/21 ,  C07K2319/40 ,  C07K2319/42 ,  C07K2319/60 ,  C07K2319/90 ,  C12N5/0619 ,  C12N2501/13 ,  C12N2501/58 ,  C12N2533/50

Abstract: 본 발명은 신경접착단백질(synaptogenic protein)의 세포외 도메인을 포함하는 폴리펩티드; 및 이의 C-말단에 태그된 바이오틴을 포함하는 복합체, 스트렙타비딘(streptavidin; SAV)이 코팅된 기재(substrate)에 상기 복합체를 결합시킨 인공시냅스 유도체 및 신경세포를 상기 인공시냅스 유도체를 포함하는 배지에 배양하는 단계를 포함하는 시냅스전 분화가 유도된 신경세포의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 뉴롤라이긴-1과 같은 신경접착단백질의 세포외 도메인을 포함하는 폴리펩티드의 C 말단에 바이오틴이 태그된 복합체는 지질이중층의 도움이 없이도 스트렙타비딘이 코팅된 기재에 배향이 조절되도록 부착되어 활성을 나타낼 수 있으며, 신경접착단백질의 세포외 도메인과 바이오틴 사이에 추가로 RFP를 포함하는 복합체는 대량생산, 정량 및 추적을 용이하게 할 뿐 아니라 정상적인 신경접착단백질의 활성을 나타내므로, 기재에 고정시켜 신경세포 배양에 첨가함으로써 효과적 및 흥분성 또는 억제성 시냅스 분화를 유도할 수 있으므로 인공시냅스 유도체로 활용할 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及包含突触体蛋白的细胞外结构域的多肽，以及诱导突触前分化的神经细胞的制造方法，包括在包含人造突触衍生物的培养基中培养的步骤：含有 生物素标记在多肽的C-末端; 用于将复合物偶联至链霉抗生物素蛋白（SAV）涂覆的底物的人造突触衍生物; 和神经细胞。 本发明的复合物，其在含有突触体蛋白质的细胞外结构域的多肽的C-末端标记生物素，例如神经丝氨酸蛋白酶-1，可以通过附着于链霉抗生物素蛋白包被的基质来显示活性，从而调节 取向，而无需支持的脂质双层的帮助，并且在细胞外结构域和突触体蛋白质的生物素之间含有另外的RFP的复合物有助于更容易地批量生产，定量和跟踪并显示正常突触体蛋白的活性，从而诱导兴奋性 或通过固定在底物上并加入到神经细胞培养物中的抑制性突触分化，从而可以用作人造突触衍生物。