本发明公开了一种昆虫病原线虫制剂及其制备方法和应用，解决了现有技术中昆虫病原线虫(Entomopathogenic Nematode，EPN)田间使用效果不佳及持效期短的问题。本发明所述的一种昆虫病原线虫制剂，包括昆虫病原线虫异小杆属(Heterorhabditis beicherriana)和硫脲。本发明还公开了该昆虫病原线虫制剂在制备防治植物地下害虫的农药中的应用。本发明首次将传统农业中的肥料增效剂化合物(硫脲Thiourea)与生防制剂(昆虫病原线虫EPN)相结合使用，提高昆虫病原线虫EPN在实际的农业生产中速效性，进而解决EPN田间使用效果不佳及持效期短的问题。