公开(公告)号：CN102174463A

公开(公告)日：2011-09-07

申请号：CN201110034172.7

申请日：2011-01-30

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 段小群 ,  曾建红 ,  申响宝 ,  宋波 ,  卢曦 ,  李云秋

IPC: C12N5/04 ,  C12N5/02

Abstract: 本发明涉及一种罗汉果愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，1)接种和诱导罗汉果茎段愈伤组织，在添加NAA激素、蔗糖、琼脂的MS液体培养基上继代培养，选取愈伤组织；2)将步骤1)中得到的愈伤组织转接到无菌三角瓶中，置于振荡培养箱25℃黑暗条件下悬浮培养24h，将上层培养基连同单细胞和小细胞团转移到三角瓶中继续振荡培养，3d后采用同样的方法再转移一次，7d后将悬浮细胞经40μm筛网过滤后接种到新鲜培养基培养。达到一定体积后转移到大的三角瓶中，用同样的方法继续添加培养基振荡培养。3)培养21d收获，冲洗3次，真空抽滤后称重，烘干。本发明具有繁殖速度快、培养规模大和提供大量均匀一致植物细胞培养物的特点。

公开(公告)号：CN102174463B

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201110034172.7

申请日：2011-01-30

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 段小群 ,  曾建红 ,  申响宝 ,  宋波 ,  卢曦 ,  李云秋

IPC: C12N5/04 ,  C12N5/02

Abstract: 本发明涉及一种罗汉果愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法，1)接种和诱导罗汉果茎段愈伤组织，在添加NAA激素、蔗糖、琼脂的MS液体培养基上继代培养，选取愈伤组织；2)将步骤1)中得到的愈伤组织转接到无菌三角瓶中，置于振荡培养箱25℃黑暗条件下悬浮培养24h，将上层培养基连同单细胞和小细胞团转移到三角瓶中继续振荡培养，3d后采用同样的方法再转移一次，7d后将悬浮细胞经40μm筛网过滤后接种到新鲜培养基培养。达到一定体积后转移到大的三角瓶中，用同样的方法继续添加培养基振荡培养。3)培养21d收获，冲洗3次，真空抽滤后称重，烘干。本发明具有繁殖速度快、培养规模大和提供大量均匀一致植物细胞培养物的特点。