사람 글루타민 합성효소 유전자를 포함하는 발현벡터 및 이를 이용하여 동물세포에서 에리트로포이에틴을 고수율로 생산하는 방법

    公开(公告)号:KR1019990056899A

    公开(公告)日:1999-07-15

    申请号:KR1019970076923

    申请日:1997-12-29

    Abstract: 본 발명은 사람 글루타민 합성효소 (glutamine synthase, GS) 유전자를 이용하여 동물세포에서 재조합 단백질을 고수율로 생산하는 방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 메티오닌 설폭시민 (methionine sulfoximine, MSX)에 의하여 증폭되는 글루타민 합성효소 유전자를 이용하여 외래 유전자를 대량으로 발현할 수 있는 발현 벡터, 이를 이용하여 얻은 재조합 에리트로포이에틴을 고수율로 생산하는 세포주 및 그의 제조 방법 그리고 이로부터 에리트로포이에틴을 얻는 제조 방법에 관한 것으로서, 상기 발현 벡터를 이용하면 다양한 재조합 단백질을 생산하는 세포주를 단일 단계의 증폭 과정을 거쳐 용이하게 선발할 수 있어 활성이 우수한 재조합 단백질을 CHO 세포 등에서 효과적으로 생산할 수 있다.

    사람 글루타민 합성효소 유전자를 포함하는 발현벡터 및 이를 이용하여 동물세포에서 에리트로포이에틴을 고수율로 생산하는 방법
    2.
    发明授权
    사람 글루타민 합성효소 유전자를 포함하는 발현벡터 및 이를 이용하여 동물세포에서 에리트로포이에틴을 고수율로 생산하는 방법 失效
    本发明提供一种含有人谷氨酰胺合成酶基因的表达载体以及使用该表达载体以高收率在动物细胞中产生促红细胞生成素的方法

    公开(公告)号:KR100267720B1

    公开(公告)日:2001-03-02

    申请号:KR1019970076923

    申请日:1997-12-29

    Abstract: PURPOSE: Provided are an expression vectors containing human glutamine synthase gene and a process for producing erythropoietin from an animal cell using the same vector, thereby producing the erythropoietin having improved activity in a higher yield. CONSTITUTION: The expression vector capable of mass-expressing a foreign gene from an animal cell is produced by inserting a human glutamine synthase gene connected to the downstream of a SV40 promoter, wherein 128 to 270 bases are removed, into an expression vector pcDNA, in which the expression vector pcDNA-gs has a restriction enzyme map of figure 3. A transformant E. coli/pcDNA-gs (KCTC 8860 P) is produced by transformation of E. coli with the expression vector pcDNA-gs. The expression vector pcDNA-EPO-dE1-gs is capable of producing erythropoietin in a higher yield. A transformant E. coli/pcDNA-EPO-dE1-gs is produced by transformation of E. coli with the expression vector pcDNA-EPO-dE1-gs. The erythropoietin is produced by fermenting the transformants in a methionine sulfoximine-increased medium to select the cell lines capable of producing erythropoietin in a higher yield and fermenting the cell lines.

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