一种海岛棉杂交后代雄性不育材料的创制方法

    公开(公告)号:CN112626109A

    公开(公告)日:2021-04-09

    申请号:CN202110086584.9

    申请日:2021-01-22

    Abstract: 本发明提供了一种海岛棉杂交后代雄性不育材料的创制方法,属于棉花育种技术领域。海岛棉杂交后代雄性不育材料的创制方法,设计合成GhNSP基因的sgRNA1和sgRNA2;将sgRNA1和sgRNA2串联构建到CRISPR/Cas9基因编辑载体中;将构建的载体在农杆菌介导下转入陆地棉,筛选获得转基因材料和海岛棉进行杂交,对杂交后代进行Hi‑Tom检测,筛选含CRISPR/Cas9与sgRNA的T‑DNA片段的杂交后代,得到海岛棉杂交后代雄性不育材料。本发明提供的方法简单、高效创制出海岛棉杂交后代雄性不育材料,为海岛棉材料的遗传改良提供新思路,同时对海岛棉材料的基因功能验证具有重要意义。

    一种棉花基因的编辑方法
    152.
    发明授权

    公开(公告)号:CN108203714B

    公开(公告)日:2021-03-02

    申请号:CN201611188402.4

    申请日:2016-12-20

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种棉花基因的编辑方法。公开了用于棉花基因组编辑的CRISPR‑Cas9系统及其构建方法。本发明克隆得到两个陆地棉U6启动子pGhU6‑7和pGhU6‑9,并突变了Bsa Ⅰ酶切位点。利用优化后的启动子构建了在棉花中具有编辑能力的CRISPR‑Cas9载体的两个载体pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ、pRGEB32‑GhU6.9‑NPT Ⅱ。选取1个棉花内源基因GhCLA为目标基因,设计四个靶向该基因的sgRNA,引导Cas9蛋白在GhCLA的特异位点进行切割。通过棉花的白化表型、酶切图、测序验证,表明pGhU6‑7I和pGhU6‑9I驱动的CRISPR‑Cas9基因编辑系统在棉花内具有编辑能力。

    一种表达载体及其在制备转基因棕色棉花中的应用

    公开(公告)号:CN112359056A

    公开(公告)日:2021-02-12

    申请号:CN202011216020.4

    申请日:2020-11-04

    Abstract: 本发明公开了一种表达载体及其在制备转基因棕色棉花中的应用,属于棉花基因工程技术领域,本发明提供了一种表达载体Gb_expa2::Gh_RE,其中包含如序列表SEQ ID NO.1所示的红株突变体基因Gh_RE和如序列表SEQ ID NO.2所示的启动子Gb_expa2,并将该表达载体导入到棉花的宿主细胞中,从而在伸长期的棉花纤维中高量表达Gh_RE,在发育的纤维中产生花青素积累,并最终在成熟的棉花纤维中产生明显的色素积累,表现出明显的棕色,即本发明通过基因工程技术得到了一种新的棉花棕色纤维材料,并为在纤维中产生色素积累提供了新思路。

    一种带有标记的棉花雄性不育系的创制方法

    公开(公告)号:CN112094862A

    公开(公告)日:2020-12-18

    申请号:CN201911304475.9

    申请日:2019-12-17

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种带有标记的棉花雄性不育系的创制方法。本发明提供利用CRISPR‑Cas9系统创造带有新型标记的棉花雄性不育系。本发明的特征在于,选取特异针对GhEMS1基因的靶位点sgRNA1、sgRNA2,与Cas9蛋白在棉花内稳定表达,获得带有新型标记的棉花雄性不育系。转基因再生植株的花药表面带有黑斑表型可稳定地遗传至下一代,且不育性稳定。本发明的优点在于克服了传统人工去雄方法做杂交费时费力的缺陷,并且不育株带有黑斑标记,便于早期确定不育株。

    一种棉花免疫系统的激活剂及其应用

    公开(公告)号:CN109105036A

    公开(公告)日:2019-01-01

    申请号:CN201810388685.X

    申请日:2018-04-27

    Abstract: 本发明属于棉花植物保护技术领域,具体涉及一种棉花免疫系统激活剂及其应用。本发明利用分子生物学手段研究外源激活剂与棉花免疫系统的相互关系,发现吲哚可以作为一种棉花免疫系统激活剂。当外施200μM以上浓度的吲哚溶液后可以显著增强棉花对黄萎病的抗性。通过全基因组转录组分析发现,吲哚处理后显著激活了棉花免疫系统中与抗病相关和水杨酸合成、信号路径相关基因的表达。本发明可以发展为一种防控棉花黄萎病的新型试剂,通过喷施或滴灌的方式处理棉花幼苗,能提高棉花对黄萎病菌的抗性。

    陆地棉棉仁含油量基因GhKAS1的分子标记及其筛选方法

    公开(公告)号:CN108165658A

    公开(公告)日:2018-06-15

    申请号:CN201810200184.4

    申请日:2018-03-12

    Abstract: 本发明提供了陆地棉棉仁含油量基因GhKAS1的分子标记及其筛选方法。本发明通过设计Indel引物对503份陆地棉自然品种进行基因型分析,结合两年四个环境的油份表型数据检测到一个与棉仁含油量相关的基因为雷蒙德氏棉中预测的GrKAS1;将GrKAS1基因在陆地棉基因组中搜索到6个拷贝,以其为模板分别设计引物,分别对503份陆地棉品种用聚丙烯凝胶电泳分析及关联分析;对陆地棉品种中的10份极端材料中的GhKAS1基因进行测序,找出突变位点,自设计引物对503份陆地棉资源群体进行分析,利用聚丙烯凝胶电泳分析及关联分析。本发明发掘了与棉籽油含量相关的分子标记,为棉籽油的分子标记辅助选择育种提供参考依据。

    棉花同源结构域转录因子基因GbHDTF1及应用

    公开(公告)号:CN103451189B

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201310345168.1

    申请日:2013-08-09

    Abstract: 发明名称:棉花同源结构域转录因子基因GbHDTF1及应用本发明属于植物基因工程领域,涉及从海岛棉中分离得到一个调控棉花内源抗病相关激素茉莉酸合成和响应的基因GbHDTF1。该基因的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示;其编码蛋白质的序列如SEQ ID NO:2所示。还公开了含有SEQ ID NO.1所示序列的基因的表达载体,通过表达由上述核酸序列形成的双链核酸分子并用于抑制棉花内源基因GbHDTF1的表达以促进茉莉酸的合成及响应。提供了含有表达载体的宿主细胞,其包括大肠杆菌和农杆菌。GbHDTF1基因具有调控棉花内源抗病相关激素茉莉酸合成和响应的功能,通过遗传转化可应用于抗黄萎病棉花新材料的培育。

    利用棉花基因GbF3H改变花瓣颜色

    公开(公告)号:CN102485897B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201010582448.0

    申请日:2010-12-06

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及一种分离、克隆的GbF3H基因,功能验证表明该基因是一种能够改变棉花花瓣颜色的功能基因,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示,它编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,编码368个氨基酸。所述的基因GbF3H与植物类黄酮代谢及花青素的合成相关。通过RNAi抑制该基因的表达可以显著减少棉花花瓣的花青素含量,使花色变淡;而超量表达该基因可以提高棉花花瓣的花青素含量。利用本发明克隆的通过转化可能改变植物花瓣的颜色,也可以应用于花卉颜色的改良,同时有望开发出花色相关的分子标记。

    棉花硬脂酰去饱和化酶GbSSI2基因及应用

    公开(公告)号:CN103421821A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310019959.5

    申请日:2013-01-18

    Abstract: 本发明涉及棉花硬脂酰去饱和化酶GbSSI2基因及应用,本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种从海岛棉中鉴定的基因GbSSI2的分离克隆、功能验证和应用。GbSSI2基因的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示;其编码基因的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。功能验证表明,GbSSI2基因具有调控棉花内源抗病相关激素水杨酸和茉莉酸的合成的功能,通过遗传转化可应用于棉花抗黄萎病品系的培育。

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