公开(公告)号：KR1020040079189A

公开(公告)日：2004-09-14

申请号：KR1020030014132

申请日：2003-03-06

Applicant: (주)엠젠 ,  박광욱

Inventor： 박광욱 ,  박창식 ,  설재구 ,  허기남

IPC: C12N5/16

CPC classification number: C12N15/8778 ,  A01K67/0273 ,  A01K2227/108 ,  A61D19/04 ,  C12N5/16 ,  C12N13/00 ,  C12N2517/00

Abstract: PURPOSE: A method for production of cloned animal embryos by nuclear transfer is provided to reduce the number of cloning processes. Therefore, itt can be useful for preservation of animals threatened with extinction, production of useful proteins, development of disease model, and supply of deficient organs. CONSTITUTION: The method for production of cloned animal embryos by nuclear transfer comprises the steps of: (i) inhaling a first polar body and 10 to 20% of cytoplasm without dying the nuclear of an egg cell by using a glass pipe having diameter of 20 to 40 micrometer to remove the nuclear from the egg cell; (ii) introducing a somatic cell into the first polar body and nuclear removed egg cell to prepare an egg-somatic cell complex within 1 minute during the inhalation process; and (iii) subjecting the egg-somatic cell complex to electric stimulation of 0.5 to 2 kv/cm and 6 to 150 microseconds 1 to 3 times to fuse and activate the egg-somatic cell complex, wherein the egg cell is collected from a mammal selected from pig, cow, sheet, mouse, rat, rabbit, dog and cat.

Abstract translation: 目的：提供通过核转移生产克隆动物胚胎的方法，以减少克隆过程的数量。 因此，它可以用于保护受灭绝威胁的动物，生产有用的蛋白质，发展疾病模型和供应不足的器官。 构成：通过核转移生产克隆动物胚胎的方法包括以下步骤：（i）通过使用直径为20的玻璃管，吸入第一极体和10-20％细胞质而不致死卵细胞核 至40微米，以从卵细胞中除去核; （ii）在吸入过程中在1分钟内将体细胞引入第一极体和核移除的卵细胞中以制备卵体细胞复合物; 和（iii）使卵体细胞复合物经受0.5至2kv / cm和6至150微秒的电刺激1至3次以融合并活化卵体细胞复合物，其中从哺乳动物收集卵细胞 选自猪，牛，片，鼠，大鼠，兔，狗和猫。

公开(公告)号：KR1020060106590A

公开(公告)日：2006-10-12

申请号：KR1020050084409

申请日：2005-09-10

Applicant: (주)엠젠

Inventor： 박광욱 ,  한귀승 ,  설재구 ,  허기남 ,  박창식

IPC: C12N15/06 ,  C12N5/16

Abstract: 본 발명은 HLA-G 유전자를 발현하는 형질전환 복제 돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) HLA-G 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계; 4) 모돈으로부터 채취한 난자의 핵을 제거하고 상기 체세포와 융합시키는 단계; 및 5) 상기 융합된 복제란을 대리모돈에 이식하고 자돈을 출산하는 단계를 포함하는 HLA-G 유전자를 발현하는 형질 전환 복제돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 HLA-G 유전자를 발현하는 형질 전환 복제돼지는 기존 방법의 후-번역 수정(post-translational modification) 또는 대량 생산등의 문제점을 극복할 수 있으며, 자연살해 세포(natural killer cell, NK cell)의 활성을 저해시켜 대상세포의 용해를 막아 이식 거부 반응을 억제함으로, 핵이식을 통한 HLA-G 유전자를 발현하는 돼지 생산 등 세포이용 치료 분야 및 이종 장기 이식 분야의 연구에 유용하게 사용할 수 있다.
HLA-G

公开(公告)号：KR1020060106319A

公开(公告)日：2006-10-12

申请号：KR1020050028951

申请日：2005-04-07

Applicant: (주)엠젠 ,  박광욱

Inventor： 박광욱 ,  유지연 ,  설재구 ,  허기남 ,  박창식

IPC: C12N15/06 ,  C12N5/16

Abstract: 본 발명은 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주 및 상기 세포주의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) US2 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 및 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계를 포함하는 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 US2 단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주는 주요 조직적합성 복합체 제 1형 항원(major histocompatibility complex: MHC Class I)의 발현이 저해되어 세포성 면역거부반응이 최소화됨으로써, 핵이식을 통한 US2 단백질 발현 돼지의 생산에 이용하여 이종장기이식 연구 및 이의 산업적 이용성에 유용하게 사용할 수 있다.

公开(公告)号：KR100500412B1

公开(公告)日：2005-07-12

申请号：KR1020030014132

申请日：2003-03-06

Applicant: (주)엠젠 ,  박광욱

Inventor： 박광욱 ,  박창식 ,  설재구 ,  허기남

IPC: C12N5/16

Abstract: 본 발명은 동물의 복제란 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 난자의 핵을 염색하지 않고 제 1 극체와 10 내지 20%의 세포질을 흡입(suction)하여 난자의 핵을 제거하는 단계; 제 1 극체와 핵을 제거한 상기 난자의 위란강에 체세포를 주입하여 난자-체세포 복합체를 제조하는 단계; 및 ⅲ) 0.5 내지 2 ㎸/㎝, 6 내지 150 ㎲로 1 내지 3회 시행하는 전기적 자극으로 상기 난자-체세포 복합체를 세포융합 및 활성화시키는 단계를 포함하는 동물의 복제란 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 복제란 제조방법은 고효율의 제핵률을 나타낼 뿐만 아니라 복제과정을 단순화시킴으로써 다양한 생물의 체세포를 복제하는데 유용하게 사용될 수 있다.