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公开(公告)号：KR100789845B1
公开(公告)日：2007-12-28
申请号：KR1020050028951
申请日：2005-04-07
Abstract: 본 발명은 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주 및 상기 세포주의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) US2 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 및 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계를 포함하는 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 US2 단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주는 주요 조직적합성 복합체 제 1형 항원(major histocompatibility complex: MHC Class I)의 발현이 저해되어 세포성 면역거부반응이 최소화됨으로써, 핵이식을 통한 US2 단백질 발현 돼지의 생산에 이용하여 이종장기이식 연구 및 이의 산업적 이용성에 유용하게 사용할 수 있다.
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公开(公告)号：KR1020080034556A
公开(公告)日：2008-04-22
申请号：KR1020060100639
申请日：2006-10-17
Applicant: 경남과학기술대학교 산학협력단 , (주)엠젠
Abstract: A production method of a transgenic cloned embryo having a goat somatic cell nucleus transfected with hGM-CSF(human granulocyte macrophage-colony stimulating factor) gene is provided to produce a cloned goat expressing the hGM-CSF from the mammary gland, thereby improving the production yield of hGM-CSF. A production method of a transgenic cloned goat embryo comprises the steps of: (1) transforming a somatic cell of goat with a recombinant expression vector containing an hGM-CSF gene to prepare a nucleus donor cell; (2) collecting an ovum from the goat to prepare a nucleus recipient ovum; and (3) denucleating the recipient ovum, transplanting the nucleus donor cell into the recipient ovum and fusing them to prepare the transgenic cloned embryo.
Abstract translation: 提供了具有用hGM-CSF（人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子）基因转染的山羊体细胞核的转基因克隆胚胎的制备方法，以从乳腺产生表达hGM-CSF的克隆山羊，从而提高产量 hGM-CSF产量。 转基因克隆山羊胚胎的制备方法包括以下步骤：（1）用含有hGM-CSF基因的重组表达载体转化山羊的体细胞以制备核供体细胞; （2）从山羊收集卵，制备受精卵; （3）使受体卵脱核，将核供体细胞移植到受体卵中并使其融合以制备转基因克隆的胚胎。
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公开(公告)号：KR1020070024069A
公开(公告)日：2007-03-02
申请号：KR1020050078585
申请日：2005-08-26
Abstract: A method for producing transgenic pig capable of expressing colony stimulating factor(CSF) gene in the mammary gland is provided to be able to easily obtain the transgenic pig, which is able to solve the problems of post-translational modification or mass-production and is used as a supplemental agent of treating leukemia and an immuno-potentiating agent, by expressing hGM-CSF in mammary gland. The method comprises the steps of: (a) isolating somatic cell from pig fetus on days 40-80 pregnancy; (b) after preparing an expression vector including a promoter specific to mammary gland such as alphas1-casein, beta-casein, beta-lactoglobulin and whey acidic protein; and a polynucleotide encoding the CSF such as hGM-CSF, introducing it into the somatic cell; (c) after selecting the expression vector-introduced clone somatic cell, culturing it; (d) removing nucleus of ovum collected from sow and fusing it with the clone somatic cell; and (e) transplanting the fused nuclear transfer embryos to surrogate mother pig and delivering piglets.
Abstract translation: 提供了能够在乳腺中表达集落刺激因子（CSF）基因的转基因猪的制备方法，以便能够容易地获得能够解决翻译后修饰或批量生产的问题的转基因猪，并且是 用作通过在乳腺中表达hGM-CSF来治疗白血病和免疫增强剂的补充剂。 该方法包括以下步骤：（a）在妊娠40-80天从胎儿分离体细胞; （b）在制备包括对乳腺特异性的启动子如α-α-酪蛋白，β-酪蛋白，β-乳球蛋白和乳清酸性蛋白质的表达载体后; 和编码CSF的多核苷酸，例如hGM-CSF，将其引入体细胞; （c）选择表达载体导入的克隆体细胞后进行培养; （d）去除从母猪收集的卵子的细胞核并与克隆体细胞融合; 和（e）将融合的核转移胚胎移植到替代母猪和递送仔猪。
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4.发明公开이종 이식시 일어나는 초급성 거부반응을 억제하기 위한ＣＤ５９ 유전자를 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주및 그의 제조 방법 无效表达CD59基因的转基因小鼠皮肤细胞系抑制XENOTRANSPLANTATION所产生的高效抑制剂及其制备方法
公开(公告)号：KR1020080020251A
公开(公告)日：2008-03-05
申请号：KR1020060083489
申请日：2006-08-31
Applicant: (주)엠젠
Abstract: A transgenic pig clonal somatic cell line expressing protectin CD59 gene is provided to minimize complement activation by inhibiting cytotoxicity destruction in xenotransplantation, so that the cell line is useful for inhibition of hyperacute rejection occurred by xenotransplantation. A transgenic pig clonal somatic cell line expressing protectin CD59 gene(KCLRF-BP-00139) contains an expression cassette pcDNA-CD59(neo) encoding CD59 gene having the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1. A method for manufacturing the transgenic pig clonal somatic cell line expressing protectin CD59 gene(KCLRF-BP-00139) comprises the steps of: (1) separating a somatic cell from the fetal pig by using primers of SEQ ID NOs:2 and 3; (2) preparing an expression vector containing a CD59 gene and transducing the expression vector into the somatic cell; and (3) selecting and culturing the transduced somatic cells. Further, the CD59 gene is SEQ ID NO:1.
Abstract translation: 提供表达保护素CD59基因的转基因猪克隆体细胞系以通过抑制异种移植中的细胞毒性破坏来最小化补体激活，使得细胞系可用于通过异种移植发生的超急性排斥的抑制。 表达保护素CD59基因（KCLRF-BP-00139）的转基因猪克隆体细胞系含有编码具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的CD59基因的表达盒pcDNA-CD59（neo）。 用于制备表达保护素CD59基因（KCLRF-BP-00139）的转基因猪克隆体细胞系的方法包括以下步骤：（1）使用SEQ ID NO：2和3引物从胎猪分离体细胞; （2）制备含有CD59基因并将表达载体转导入体细胞的表达载体; （3）选择和培养转导的体细胞。 此外，CD59基因是SEQ ID NO：1。
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公开(公告)号：KR100790514B1
公开(公告)日：2008-01-02
申请号：KR1020050078585
申请日：2005-08-26
Abstract: 본 발명은 인간 ＧＭ-ＣＳＦ를 유선에서 발현하는 형질전환 복제 돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) 유선(mammary gland) 특이적 프로모터 및 CSF(Colony stimulating factor, 세포집락 자극 인자)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 상기 체세포에 도입시키는 단계; 3) 상기 발현 벡터가 도입된 클론 체세포를 선별한 후 배양하는 단계; 4) 모돈으로부터 채취한 난자의 핵을 제거하고 상기 체세포와 융합시키는 단계; 및 5) 상기 융합된 복제란을 대리모돈에 이식하고 자돈을 출산하는 단계를 포함하는 CSF 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조방법에 의하여 제조된 형질전환 돼지는 기존 방법의 후-번역 수정(post-translational modification) 또는 대량 생산등의 문제점을 극복할 수 있으며, hGM-CSF를 유선에서 발현함으로써 쉽게 획득할 수 있는 잇점과 함께 이를 백혈병 치료 보조제 및 면역 강화제 등으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1020040102982A
公开(公告)日：2004-12-08
申请号：KR1020030034844
申请日：2003-05-30
IPC: C12N5/16
CPC classification number: C12N15/8778 , C12N15/85
Abstract: PURPOSE: A method for producing porcine clonal somatic cell line expressing green fluorescent protein is provided, which method allows for observation of differentiation and development of introduced cells at a cell therapy. CONSTITUTION: The method for producing porcine clonal somatic cell line expressing green fluorescent protein comprises the steps of: (1) isolating a somatic cell from a fetal pig; (2) producing an expression vector, pEGFP-C1 or PCX-EGFP, containing a fluorescent protein gene and cloning the expression vector into the somatic cell; and (3) selecting the expression vector cloned somatic cell and culturing the selected clonal somatic cell, wherein the fetal pig is 30 to 40 day of pregnancy pig; the fluorescent protein is EGFP(enhanced GFP); and the porcine clonal somatic cell line is PCX-8(KCLRF-BP-00079).
Abstract translation: 目的：提供一种生产表达绿色荧光蛋白的猪克隆体细胞系的方法，该方法允许观察细胞治疗引入细胞的分化和发育。 构成：产生表达绿色荧光蛋白的猪克隆体细胞系的方法包括以下步骤：（1）从胎猪中分离体细胞; （2）产生含有荧光蛋白基因的表达载体pEGFP-C1或PCX-EGFP，并将表达载体克隆入体细胞; （3）选择克隆体细胞的表达载体并培养选定的克隆体细胞，其中胎猪为妊娠猪30〜40天; 荧光蛋白是EGFP（增强GFP）; 猪克隆体细胞系为PCX-8（KCLRF-BP-00079）。
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公开(公告)号：KR100827324B1
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：KR1020060100639
申请日：2006-10-17
Applicant: 경남과학기술대학교 산학협력단 , (주)엠젠
Abstract: 본 발명은 hGM-CSF 유전자로 형질전환된 산양 체세포의 핵과 산양 유래의 탈핵된 난자가 융합된 산양의 복제 수정란 및 (1) 산양의 체세포를 hGM-CSF 유전자로 형질전환시켜 공핵 세포를 준비하는 단계; (2) 산양으로부터 난자를 회수하여 수핵 난자를 준비하는 단계; (3) 상기 수핵 난자를 탈핵하고 공핵 세포를 이식한 후 융합시켜 수정란을 제조하는 단계를 포함한 산양 복제 수정란의 제조방법에 관한 것이다.
hGM-CSF, 공핵 세포, 수핵 난자, 산양 복제 수정란-
公开(公告)号：KR100502480B1
公开(公告)日：2005-07-29
申请号：KR1020030034844
申请日：2003-05-30
IPC: C12N5/16
Abstract: 본 발명은 형광단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) 형광단백질 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 및 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계를 포함하는 형광단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 형광단백질이 발현되는 돼지 클론 체세포주는 세포 치료시 주입 세포의 분화 및 발달 단계를 관찰할 수 있으며, 또한 핵이식을 통한 형광단백질 발현 돼지의 생산 등 발생공학 분야의 연구에 유용하게 사용될 수 있다.
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公开(公告)号：KR1020050034187A
公开(公告)日：2005-04-14
申请号：KR1020030070029
申请日：2003-10-08
IPC: C12N5/07
CPC classification number: A61D19/04 , A01K67/0273 , A01K2227/108 , C12N2517/00
Abstract: 본 발명은 돼지 복제란을 대리모돈에게 이식하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 수정란 수송 키트에서 복제란을 배양하는 단계; 2) 펜토탈소디움과 아이소프란으로 대리모돈을 마취시키는 단계; 및 3) 배란직전 내지 배란 후 2일 이내의 난소를 가지는 대리모돈에게 단계 1의 복제란을 이식하는 단계를 포함하는 돼지 복제란을 대리모돈에게 이식하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 돼지 복제란의 이식 방법은 복제란의 이식에 있어서의 종래 문제점들을 개선하여 이식 후 임신효율을 높임으로써 복제돼지의 생산 효율을 증대시킬 수 있으며, 아울러 복제란 뿐만 아니라 일반 돼지수정란의 이식에도 응용되어 돼지의 생산효율을 증대시킬 수 있다.
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公开(公告)号：KR100479704B1
公开(公告)日：2005-03-31
申请号：KR1020030070031
申请日：2003-10-08
IPC: A01K67/027
Abstract: Provided is a method of producing a transgenic pig expressing a green-fluorescent protein to be effectively used in a field of producing a transgenic protein for curing. The method of producing a transgenic pig expressing a green-fluorescent protein comprises the steps of (1) separating somatic cells from a pig fetus, (2) producing a expression vector pCX-EGFP/neo with a fluorescent protein gene and then introducing the somatic cells of the (1) step thereinto, (3) selecting clone somatic cells introduced with the expression vector pCX-EGFP/neo and then cultivating the clone somatic cells, (4) removing a nucleus of an ovum taken from a mother pig and fusing it with the somatic cells, (5) transplanting the fused cloning egg in a surrogate mother pig and giving birth to a baby pig.
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