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公开(公告)号：KR100905709B1
公开(公告)日：2009-07-01
申请号：KR1020070061572
申请日：2007-06-22
Applicant: (주)엠젠 , 경남과학기술대학교 산학협력단
IPC: A01K67/027
Abstract: 본 발명은 CSF(Colony stimulating factor, 세포집락 자극 인자), 바람직하게는 사람의 과립구 대식세포-콜로니 자극 인자(hGM-CSF)를 유선에서 생산하는 형질전환 복제 산양 및 그의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 1) 산양 의 태아 또는 암컷 산양으로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) 유선(mammary gland) 특이적 프로모터 및 CSF(Colony stimulating factor, 세포집락 자극 인자)유전자를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 상기 체세포에 도입시키는 단계; 3) 상기 발현 벡터가 도입된 클론 체세포를 선별한 후 배양하는 단계; 4) 어미 산양으로부터 채취한 난자의 핵을 제거하고 상기 클론 체세포와 융합시키는 단계; 및 5) 상기 융합된 복제란을 수란 산양(대리모)에 이식하여 산자를 출산하는 단계를 포함하는 CSF 단백질을 생산하는 형질전환 복제 산양 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조방법에 의하여 제조된 형질전환 복제 산양은 기존 방법의 후-번역수정(post-translational modification) 또는 대량 생산 등의 문제점을 극복할 수 있으며, CSF 단백질을 유선에서 생산함으로써 쉽게 획득할 수 있는 이점과 함께 이를 백혈병 치료 보조제 및 면역 강화제 등으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
hGM-CSF, 형질전환된 복제 산양-
公开(公告)号：KR100827324B1
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：KR1020060100639
申请日：2006-10-17
Applicant: 경남과학기술대학교 산학협력단 , (주)엠젠
Abstract: 본 발명은 hGM-CSF 유전자로 형질전환된 산양 체세포의 핵과 산양 유래의 탈핵된 난자가 융합된 산양의 복제 수정란 및 (1) 산양의 체세포를 hGM-CSF 유전자로 형질전환시켜 공핵 세포를 준비하는 단계; (2) 산양으로부터 난자를 회수하여 수핵 난자를 준비하는 단계; (3) 상기 수핵 난자를 탈핵하고 공핵 세포를 이식한 후 융합시켜 수정란을 제조하는 단계를 포함한 산양 복제 수정란의 제조방법에 관한 것이다.
hGM-CSF, 공핵 세포, 수핵 난자, 산양 복제 수정란-
公开(公告)号：KR100502480B1
公开(公告)日：2005-07-29
申请号：KR1020030034844
申请日：2003-05-30
IPC: C12N5/16
Abstract: 본 발명은 형광단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) 형광단백질 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 및 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계를 포함하는 형광단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 형광단백질이 발현되는 돼지 클론 체세포주는 세포 치료시 주입 세포의 분화 및 발달 단계를 관찰할 수 있으며, 또한 핵이식을 통한 형광단백질 발현 돼지의 생산 등 발생공학 분야의 연구에 유용하게 사용될 수 있다.
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公开(公告)号：KR1020050034187A
公开(公告)日：2005-04-14
申请号：KR1020030070029
申请日：2003-10-08
IPC: C12N5/07
CPC classification number: A61D19/04 , A01K67/0273 , A01K2227/108 , C12N2517/00
Abstract: 본 발명은 돼지 복제란을 대리모돈에게 이식하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 수정란 수송 키트에서 복제란을 배양하는 단계; 2) 펜토탈소디움과 아이소프란으로 대리모돈을 마취시키는 단계; 및 3) 배란직전 내지 배란 후 2일 이내의 난소를 가지는 대리모돈에게 단계 1의 복제란을 이식하는 단계를 포함하는 돼지 복제란을 대리모돈에게 이식하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 돼지 복제란의 이식 방법은 복제란의 이식에 있어서의 종래 문제점들을 개선하여 이식 후 임신효율을 높임으로써 복제돼지의 생산 효율을 증대시킬 수 있으며, 아울러 복제란 뿐만 아니라 일반 돼지수정란의 이식에도 응용되어 돼지의 생산효율을 증대시킬 수 있다.
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公开(公告)号：KR100479704B1
公开(公告)日：2005-03-31
申请号：KR1020030070031
申请日：2003-10-08
IPC: A01K67/027
Abstract: Provided is a method of producing a transgenic pig expressing a green-fluorescent protein to be effectively used in a field of producing a transgenic protein for curing. The method of producing a transgenic pig expressing a green-fluorescent protein comprises the steps of (1) separating somatic cells from a pig fetus, (2) producing a expression vector pCX-EGFP/neo with a fluorescent protein gene and then introducing the somatic cells of the (1) step thereinto, (3) selecting clone somatic cells introduced with the expression vector pCX-EGFP/neo and then cultivating the clone somatic cells, (4) removing a nucleus of an ovum taken from a mother pig and fusing it with the somatic cells, (5) transplanting the fused cloning egg in a surrogate mother pig and giving birth to a baby pig.
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1020040079189A
公开(公告)日：2004-09-14
申请号：KR1020030014132
申请日：2003-03-06
IPC: C12N5/16
CPC classification number: C12N15/8778 , A01K67/0273 , A01K2227/108 , A61D19/04 , C12N5/16 , C12N13/00 , C12N2517/00
Abstract: PURPOSE: A method for production of cloned animal embryos by nuclear transfer is provided to reduce the number of cloning processes. Therefore, itt can be useful for preservation of animals threatened with extinction, production of useful proteins, development of disease model, and supply of deficient organs. CONSTITUTION: The method for production of cloned animal embryos by nuclear transfer comprises the steps of: (i) inhaling a first polar body and 10 to 20% of cytoplasm without dying the nuclear of an egg cell by using a glass pipe having diameter of 20 to 40 micrometer to remove the nuclear from the egg cell; (ii) introducing a somatic cell into the first polar body and nuclear removed egg cell to prepare an egg-somatic cell complex within 1 minute during the inhalation process; and (iii) subjecting the egg-somatic cell complex to electric stimulation of 0.5 to 2 kv/cm and 6 to 150 microseconds 1 to 3 times to fuse and activate the egg-somatic cell complex, wherein the egg cell is collected from a mammal selected from pig, cow, sheet, mouse, rat, rabbit, dog and cat.
Abstract translation: 目的：提供通过核转移生产克隆动物胚胎的方法，以减少克隆过程的数量。 因此，它可以用于保护受灭绝威胁的动物，生产有用的蛋白质，发展疾病模型和供应不足的器官。 构成：通过核转移生产克隆动物胚胎的方法包括以下步骤：（i）通过使用直径为20的玻璃管，吸入第一极体和10-20％细胞质而不致死卵细胞核 至40微米，以从卵细胞中除去核; （ii）在吸入过程中在1分钟内将体细胞引入第一极体和核移除的卵细胞中以制备卵体细胞复合物; 和（iii）使卵体细胞复合物经受0.5至2kv / cm和6至150微秒的电刺激1至3次以融合并活化卵体细胞复合物，其中从哺乳动物收集卵细胞 选自猪，牛，片，鼠，大鼠，兔，狗和猫。
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7.发明公开
公开(公告)号：KR1020090056422A
公开(公告)日：2009-06-03
申请号：KR1020070123555
申请日：2007-11-30
Applicant: (주)엠젠
Abstract: A transformed porcine clonal somatic cell line which expresses an US6 protein is provided to suppress the MHC class I expression, minimize the immunerejection and use for the xeno-transplantation. A transformed porcine clonal somatic cell line(deposit number: KCLRF-BP-00158) comprises an US6(unique short 6) gene expression vector of cytomegalovirus(CMV), pcDNA3.1/myc-His(-B). A method for manufacturing the transformed porcine clonal somatic cell line comprises: a step of isolating the somatic cell from a pig fetus; a step of introducing the pcDNA3.1/myc-His(-B) of cytomegalovirus into the somatic cell; and a step of screening and culturing the somatic cell having the expression vector. The pig fetus is 20-50 days old.
Abstract translation: 提供表达US6蛋白的转化猪克隆体细胞系以抑制MHC I类表达，使免疫注射最小化并用于异种移植。 转化的猪克隆体细胞系（保藏号：KCLRF-BP-00158）包含巨细胞病毒（CMV），pcDNA3.1 / myc-His（-B）的US6（独特的短6）基因表达载体。 一种用于制造转化的猪克隆体细胞系的方法包括：从胎猪分离体细胞的步骤; 将巨细胞病毒的pcDNA3.1 / myc-His（-B）导入体细胞的步骤; 以及筛选和培养具有表达载体的体细胞的步骤。 猪胎儿是20-50天。
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公开(公告)号：KR100789845B1
公开(公告)日：2007-12-28
申请号：KR1020050028951
申请日：2005-04-07
Abstract: 본 발명은 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주 및 상기 세포주의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) US2 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 및 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계를 포함하는 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 US2 단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주는 주요 조직적합성 복합체 제 1형 항원(major histocompatibility complex: MHC Class I)의 발현이 저해되어 세포성 면역거부반응이 최소화됨으로써, 핵이식을 통한 US2 단백질 발현 돼지의 생산에 이용하여 이종장기이식 연구 및 이의 산업적 이용성에 유용하게 사용할 수 있다.
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公开(公告)号：KR1020060106590A
公开(公告)日：2006-10-12
申请号：KR1020050084409
申请日：2005-09-10
Applicant: (주)엠젠
Abstract: 본 발명은 HLA-G 유전자를 발현하는 형질전환 복제 돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) HLA-G 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계; 4) 모돈으로부터 채취한 난자의 핵을 제거하고 상기 체세포와 융합시키는 단계; 및 5) 상기 융합된 복제란을 대리모돈에 이식하고 자돈을 출산하는 단계를 포함하는 HLA-G 유전자를 발현하는 형질 전환 복제돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 HLA-G 유전자를 발현하는 형질 전환 복제돼지는 기존 방법의 후-번역 수정(post-translational modification) 또는 대량 생산등의 문제점을 극복할 수 있으며, 자연살해 세포(natural killer cell, NK cell)의 활성을 저해시켜 대상세포의 용해를 막아 이식 거부 반응을 억제함으로, 핵이식을 통한 HLA-G 유전자를 발현하는 돼지 생산 등 세포이용 치료 분야 및 이종 장기 이식 분야의 연구에 유용하게 사용할 수 있다.
HLA-G-
10.发明公开세포성 면역 억제를 위한 ＵＳ2 단백질을 발현하는 돼지클론 체세포주의 제조 방법 有权生产用于抑制US2蛋白抑制细胞免疫的PORCINE CLONAL SOMATIC CELL LINE的方法
公开(公告)号：KR1020060106319A
公开(公告)日：2006-10-12
申请号：KR1020050028951
申请日：2005-04-07
Abstract: 본 발명은 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주 및 상기 세포주의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) US2 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 및 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계를 포함하는 US2 단백질을 발현하는 형질전환 돼지 클론 체세포주의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 US2 단백질을 발현하는 돼지 클론 체세포주는 주요 조직적합성 복합체 제 1형 항원(major histocompatibility complex: MHC Class I)의 발현이 저해되어 세포성 면역거부반응이 최소화됨으로써, 핵이식을 통한 US2 단백질 발현 돼지의 생산에 이용하여 이종장기이식 연구 및 이의 산업적 이용성에 유용하게 사용할 수 있다.
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