다양한 지지체에 적용 가능한, 크링글 도메인 변이체를 포함하는 단백질 칩의 제조방법
    11.
    发明公开
    다양한 지지체에 적용 가능한, 크링글 도메인 변이체를 포함하는 단백질 칩의 제조방법 有权
    适用于各种支持的蛋白质芯片,包括KRINGLE域突变体及其制备方法

    公开(公告)号:KR1020140035631A

    公开(公告)日:2014-03-24

    申请号:KR1020120102111

    申请日:2012-09-14

    CPC classification number: G01N33/6815 G01N33/5302 G01N33/5304

    Abstract: The present invention relates to a method for producing a protein chip capable of using, as supports, various materials such as paper, cloth, and the like, and including a kringle domain variant, and more specifically, to a method for producing a protein chip, comprising the steps of: coating a water repellent polymer on a support through initiated chemical vapor deposition (iCVD); coating a polymer having a vinyl group on the support coated with the water repellent polymer; and immobilizing a complex of a kringle domain variant having a binding capacity specific to a target molecule and an amino acid residue including a thiol group on the support. Further, the present invention provides a protein chip produced by the method and a method for diagnosing a disease by using the protein chip. According to the present invention, the materials which are cheap and easy to carry can be used as a support for the protein chip. The kringle domain variant which has excellent solubility, thermal stability, and productivity and is cheap can be used as an antibody. Further, the binding of the thiol group and the vinyl group is applied to the production of the protein chip, thereby improving the reactivity between the kringle domain variant and the target molecule, so that a protein chip having improved portability and reactivity at low costs as compared with the existing protein chip. [Reference numerals] (AA,CC) DR5 concentration (쨉M); (BB) Signal intensity

    Abstract translation: 本发明涉及能够使用诸如纸,布等各种材料作为支撑体的蛋白质芯片的制造方法,并且包括三环结构域变体,更具体地,涉及一种蛋白质芯片的制造方法 包括以下步骤:通过引发的化学气相沉积(iCVD)在支撑体上涂覆斥水聚合物; 在涂覆有防水聚合物的载体上涂布具有乙烯基的聚合物; 并将具有对靶分子特异性的结合能力的三环结构域变体和包含巯基的氨基酸残基的复合物固定在载体上。 此外,本发明提供了通过使用蛋白质芯片的方法和诊断疾病的方法制造的蛋白质芯片。 根据本发明,便宜且易于携带的材料可用作蛋白质芯片的载体。 具有优异的溶解性,热稳定性和生产率并且便宜的三环结构域变体可用作抗体。 此外,将硫醇基和乙烯基的结合应用于蛋白质芯片的制备,从而提高了三环结构域变体和靶分子之间的反应性,从而以低成本改善了携带性和反应性的蛋白质芯片, 与现有蛋白质芯片相比。 (参考数字)(AA,CC)DR5浓度(쨉M); (BB)信号强度

    에프알-008 폴리케타이드 합성에 관여하는 유전자
    12.
    发明公开
    에프알-008 폴리케타이드 합성에 관여하는 유전자 失效
    FR-008聚合物合成基因

    公开(公告)号:KR1020050038774A

    公开(公告)日:2005-04-29

    申请号:KR1020030074035

    申请日:2003-10-23

    CPC classification number: C12P19/62 C07H21/04 C07K14/36 C12N15/52 C12P17/08

    Abstract: 본 발명은 스트렙토마이세스 속 FR-008 유래 FR-008 폴리케타이드 생합성에 관여하는 전체 유전자의 염기서열에 관한 것이다. 이 염기서열에는 케토신세아제(KS), 아실트랜스퍼라제(AT), 아실캐리어 단백질(ACP), 케토리덕타제(KR), 디하이드라타제(DH) 및 에놀 리덕타제(ER) 도메인을 코딩하는 유전자와 ABC 트랜스포터, 시토크롬 p450 모노옥시게나제(cytochrome P-450 monooxygenase), 페레독신(ferredoxin), 티오에스터라제(thioesterase), 당 생합성 단백질, FAD-의존성 모노옥시게나제, 4-아미노-4-데옥시코리스메이트(ADC) 신세아제 및 ADC 라이아제(ADC lyase)효소와 같은 변형효소를 코딩하는 유전자를 모두 포함하고 있다.
    본 발명에 따른 상기 유전자 염기서열은 일부 변형을 통하여 기존의 FR-008 폴리케타이드의 생산성 증가를 기하거나, 신규한 FR-008 폴리케타이드의 변이체를 제조하는데 이용할 수 있다.

    코리네박테리아용 자동 유도성 합성 프로모터

    公开(公告)号:KR101750857B1

    公开(公告)日:2017-06-29

    申请号:KR1020150129586

    申请日:2015-09-14

    Abstract: 본발명은코리네박테리움속 균주에대하여, 자동유도성을가지는신규합성프로모터및 자동유도성합성프로모터의스크리닝방법에관한것으로, 더욱자세하게는코리네박테리움의세포성장단계중 지수증식기에서정상기로넘어가는과도기에자동발현을나타내는합성프로모터및 이의스크리닝방법에관한것이다. 본발명에따른신규자동유도성프로모터를사용하면, 야생의코리네박테리움내에서존재하는자동유도성프로모터들과비교하여, 현저히높은발현율과발현유도능을나타내어, 코리네박테리움을이용한재조합단백질의생산수율을향상시킬수 있다.

    에오신 와이를 이용한 시토크롬 P450의 활성방법
    16.
    发明授权
    에오신 와이를 이용한 시토크롬 P450의 활성방법 有权
    P450使用曙红Y的活化方法或细胞色素P450

    公开(公告)号:KR101570698B1

    公开(公告)日:2015-11-23

    申请号:KR1020130148274

    申请日:2013-12-02

    Abstract: 본발명은에오신와이(Eosin Y)를이용한시토크롬 P450의활성방법에관한것이다. 본발명에따른시토크롬 P450의활성방법은세포질내 에오신와이(Eosin Y)의감광작용으로인하여, 시토크롬 P450의헴도메인(Heme domain)에직접전자를전달함으로써, 반응의간편성및 시토크롬 P450효소의산업적이용의경제성을도모할수 있는시토크롬 P450의활성방법을제공할수 있다.

    박테리아에서의 외래단백질의 생산성을 증가시키는 방법
    17.
    发明授权
    박테리아에서의 외래단백질의 생산성을 증가시키는 방법 失效
    提高细菌中外源蛋白生产力的方法

    公开(公告)号:KR100499647B1

    公开(公告)日:2005-07-05

    申请号:KR1020020058015

    申请日:2002-09-25

    Inventor: 이상엽 정기준

    Abstract: 본 발명은 대장균 유래의
    ftsA 유전자와
    ftsZ 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드 및 외래단백질을 암호화하는 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드를 박테리아에서 동시발현시킴으로써, 재조합 박테리아에서의 외래단백질의 생산성을 증가시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, 대장균 유래의
    ftsA 및
    ftsZ 유전자를 재조합 박테리아 내에서 외래단백질 유전자와 함께 동시발현시킴으로써, 종래기술의 주요한 문제점 중의 하나인 섬유질화 현상을 억제하고, 박테리아 세포의 분열속도를 증가시킬 수 있으며, 따라서, 재조합 박테리아의 세포성장 및 외래단백질의 생산성을 효과적으로 증가시킬 수 있다. 특히, 고농도 배양을 수행할 경우, 빠른 성장속도로 인하여 배양 시간을 단축시키면서도 외래단백질을 효율적으로 대량생산할 수 있으므로, 유용한 외래단백질의 생산 및 이와 관련된 생물산업 전반에 걸쳐 유용하게 이용될 수 있을 것이다.

    고초균유래엔도자일라나제의신호서열유전자를포함한재조합플라스미드및그를이용한외래단백질의제조방법
    18.
    发明公开
    고초균유래엔도자일라나제의신호서열유전자를포함한재조합플라스미드및그를이용한외래단백질의제조방법 失效
    含有BACILLUS SUBTILIS的内切酶的分泌信号序列的重组质粒和使用其的外源蛋白的表达

    公开(公告)号:KR1020000034279A

    公开(公告)日:2000-06-15

    申请号:KR1019980051563

    申请日:1998-11-28

    CPC classification number: C12N15/70 C07K14/32

    Abstract: PURPOSE: Recombinant plasmids having secretion signal sequence of endoxylanase from Bacillus are provided which express and secret foreign protein in transformed E. coli therewith. CONSTITUTION: A secretion signal sequence of endoxylanase fragment from plasmid, pKJX4, containing endoxylase gene from Bacillus is amplified by PCR. Recombinant plasmid, pJS101, is constructed by cloning PCR fragments into plasmid, pTrc99A, having strong trc promoter. Plasmid pJS101 contains signal sequence of endoxylanase and endoxylanase joined with PstI site. 3' end of endoxylanase has restriction sites of BamHI, XbaI, SalI, PstI and HindIII for the cloning of foreign protein. Plasmid pJS101DeltaP is constructed by removing PstI site of 3' end of endoxylanase gene for the easy introduction of foreign protein. T7 promoter containing vector, pJS301, is constructed by joining of NdeI and BamHI digested fragment from pJS101DeltaP and pET21c. Induction experiment with IPTG shows that the yield of secreted protein is at least 6% of total protein. Alkaline phosphatase is over expressed and constitutes 6.9% of total protein.

    Abstract translation: 目的:提供具有来自芽孢杆菌的内切木聚糖酶的分泌信号序列的重组质粒,其在转化的大肠杆菌中表达和分泌外源蛋白。 构成:通过PCR扩增来自质粒pKJX4的含有来自芽孢杆菌的内切酶基因的内切木聚糖酶片段的分泌信号序列。 通过将PCR片段克隆到具有强trc启动子的质粒pTrc99A中构建重组质粒pJS101。 质粒pJS101含有与PstI位点连接的内切木聚糖酶和内切木聚糖酶的信号序列。 3'末端的木聚糖酶具有BamHI,XbaI,SalI,PstI和HindIII的限制性位点,用于克隆外来蛋白。 通过除去3'末端的内切木聚糖酶基因的PstI位点构建质粒pJS101DeltaP,便于引入外源蛋白。 通过从pJS101DeltaP和pET21c连接NdeI和BamHI消化的片段构建含有T7启动子的载体pJS301。 IPTG的诱导实验表明,分泌蛋白的产量至少占总蛋白的6%。 碱性磷酸酶过表达,占总蛋白的6.9%。

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