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公开(公告)号：WO2014084672A1
公开(公告)日：2014-06-05
申请号：PCT/KR2013/011022
申请日：2013-11-29
Applicant: (주)바이오니아
CPC classification number: C12M29/04 , C07K1/02 , C07K1/047 , C07K1/22 , C07K1/36 , C12M23/08 , C12M23/12 , C12M23/38 , C12M29/00 , C12M33/04 , C12M41/12 , C12M47/12 , C12P21/00
Abstract: 본 발명은 전자동 무세포 단백질 제조장비 및 이를 이용한 단백질의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 상부가 개방된 구조로 투석막을 구비한 다수의 투석튜브로 이루어진 것을 특징으로 하는 반응용기를 포함하는 단백질발현반응부; 상기 반응용기를 가열 또는 냉각하는 반응온도조절부; 복수개의 피펫을 포함하며, 상기 피펫을 이용하여 용액을 흡입 또는 토출할 수 있는 피펫어레이; 상기의 피펫어레이를 상하, 전후 또는 좌우로 이동시켜 용액들을 이동시킬 수 있는 피펫어레이 이동부; 자기장인가장치를 구비한 단백질정제부; 및 단백질 제조에 사용되는 용액을 공급하는 멀티웰 플레이트 키트를 장착할 수 있는 멀티웰 플레이트 장착부;를 포함하는 것을 특징으로 하는 전자동 무세포 단백질 제조장비 및 이를 이용한 단백질의 제조방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 친화성 태그가 결합된 목표 단백질 이외에도 친화성 태그(Tag)가 제거된 순수 목표 단백질의 합성 기능을 가지고 있으며, 최종 정제된 단백질이 녹아 있는 용출용액을 원하는 단백질 보관용 완충용액으로 다단계 투석을 통해 빠르게 원하는 완충용액으로 자동으로 교환하는 기능도 가지고 있어 다수의 단백질들을 전자동으로 간편하게 대량 제조할 수 있는 전자동 단백질 제조장비 및 제조방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 단백질 제조에 필요한 용액이 저장되는 멀티웰 플레이트 키트 및 투석막을 구비한 투석튜브를 포함하는 전자동 무세포 단백질 제조용 반응 키트에 관한 것이다. 본 발명에 따른 전자동 무세포 단백질 제조장비는 전자동으로 목표단백질을 발현하여 정제할 뿐만 아니라, 단백질 보관용 완충용액에 투석할 수 있기 때문에최종 제조된 단백질을 바로 사용할 수 있는 장점이 있다. 또한, 본 발명에 따른 단백질 제조방법은 다단계로 저분자발현용액을 교환하여 무세포 단백질 발현에 필요한 에너지원 등을 지속적으로 공급해줄 수 있어, 종래의 배치 형태의 무세포 단백질 제작법을 사용하여 목표 단백질을 얻는 경우에 비해 최대 5배 양을 획득할 수 있으며, 자성입자를 이용한 목표 단백질 정제시 단백질 분해효소를 이용하여 불필요한 친화성 태그를 제거하여 순수한 목표 단백질을 제조할 수 있기 때문에, 산업, 의료 및 연구 목적의 단백질 생산에 있어서, 단백질 활성 및 구조에 부정적 영향을 미칠 수 있는 인공서열이 제거된 원형의 단백질을 생산할 수 있다는 점에서 매우 유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及一种用于自动制备无细胞蛋白的装置和使用其的蛋白质的制备方法，更具体地，涉及一种用于自动制备无细胞蛋白质的装置和使用该装置制造蛋白质的方法。 包括：蛋白质表达反应单元，其包括反应容器，所述反应容器包括通过开放的上部结构设置有透析膜的多个透析管; 用于加热或冷却蛋白质表达反应单元的反应温度控制单元; 移液管阵列，其包括多个移液管并且能够通过使用移液管吸引或排出溶液; 移液器阵列移动单元，能够通过上下移动移液管来移动解决方案，左右移动; 设置有磁场施加装置的蛋白质纯化单元; 以及能够提供用于制备蛋白质的溶液的多孔板试剂盒的多孔板提供单元。 另外，本发明涉及一种自动制备无细胞蛋白的装置及其制备方法，其具有除去亲和标签偶联的靶蛋白以外的除去亲和标签的纯靶蛋白质合成功能 ，以及通过所需的洗脱溶液通过多步透析，将所得纯化蛋白质溶解的浸出溶液与用于含有蛋白质的所需洗脱溶液快速自动交换的功能，使得多种蛋白质可以 简单自动地准备好。 此外，本发明涉及一种用于自动制备无细胞蛋白质的反应试剂盒，其包括：用于储存制备蛋白质所必需的溶液的多孔板试剂盒; 以及设置有透析膜的透析管。 根据本发明的用于自动制备无细胞蛋白质的装置可以自动表达和纯化目标蛋白质，并且透析缓冲液中的蛋白质以含有蛋白质，从而能立即使用所得到的纯化蛋白质。 此外，根据本发明的蛋白质的制备方法可以通过多层交换低分子量表达溶液来连续提供无细胞蛋白质表达所需的能量源，使得与 通过使用以排列形式制备无细胞蛋白的常规方法获得靶蛋白，并且由于通过使用磁性颗粒纯化靶蛋白时通过使用蛋白酶去除不需要的亲和标签来制备纯的靶蛋白，本发明是非常有用的 在用于工业，药物和研究目的的蛋白质生产中，其中可以产生环状蛋白质，其中除去对蛋白质的活性和结构产生负面影响的人造序列。
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公开(公告)号：WO2012134063A2
公开(公告)日：2012-10-04
申请号：PCT/KR2012/001424
申请日：2012-02-24
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/6883
Abstract: 본 발명은 구강 세균감염성질환 원인균 검출용 프라이머 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 구체적으로 구강 세균감염성질환을 일으키는 원인균을 정성 및 정량적으로 검출할 수 있으며, 종-특이성이 뛰어난 구강 세균감염성질환 원인균 검출용 프라이머, 검출용 조성물, 키트 및 마이크로어레이에 관한 것이다. 본 발명에 따른 구강 세균감염성질환 원인균 검출용 프라이머는 민감도가 높고 종-특이성이 뛰어나며, 다양한 세균에 의한 구강 내 치주 조직의 감염 여부를 신속하고 간단하게 검출, 탐지할 수 있으며, 구강 세균감염성질환을 일으키는 원인균을 정성 및 정량적으로 검출할 수 있는 효과가 있다. 또한, 세균학적 예후평가를 규명하는 도구로 이용될 수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及一种用于检测口腔细菌感染性疾病的病原菌的引物及其用途，更具体地，涉及用于检测口腔细菌感染性疾病的致病菌的引物，能够定性和定量地检测引起口腔细菌的病原菌 感染性疾病，具有高物种特异性，用于检测的组合物，试剂盒和微阵列。 根据本发明的用于检测口腔细菌感染性疾病致病菌的引物具有高灵敏度和高物种特异性，可以快速简单地检测牙周组织是否被各种细菌感染，并且可以定性和定量地检测病原体 细菌引起口腔细菌感染性疾病。 此外，引物可用作预后的细菌学评估的工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1020120112001A
公开(公告)日：2012-10-11
申请号：KR1020120018161
申请日：2012-02-22
Applicant: 조선대학교산학협력단 , (주)바이오니아
CPC classification number: Y02A50/451 , C12Q1/689 , C12Q1/6837 , C12Q1/6851 , G01N2800/18
Abstract: PURPOSE: A primer for detecting bacteria causing infectious oral diseases is provided to ensure high sensitivity and to quickly and simply detect and sense infection of a periodontal tissue. CONSTITUTION: A primer for detecting bacteria causing infectious oral diseases specifically binds to a polynucleotide of rpoB(DNA-directed RNA polymerase subunit beta). The primer has a polynucleotide selected from bases of sequence numbers 1-88 or complementary bases thereof. The infectious oral diseases are periodontal diseases, marginal gingivitis, dental caries, dimension, canalis radicis dentis disease, or osteomyelitis. A composition for detecting the bacteria causing infectious oral diseases contains the primer.
Abstract translation: 目的：提供用于检测引起感染性口腔疾病的细菌的底漆，以确保高灵敏度，并快速，简单地检测和感测牙周组织的感染。 构成：用于检测引起感染性口腔疾病的细菌的引物特异性结合rpoB（DNA定向RNA聚合酶亚基β）的多核苷酸。 引物具有选自序列号1-88的碱基或其互补碱基的多核苷酸。 传染性口腔疾病是牙周病，边缘性牙龈炎，龋齿，尺寸，根管性牙本质疾病或骨髓炎。 用于检测引起感染性口腔疾病的细菌的组合物含有引物。
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公开(公告)号：KR100984483B1
公开(公告)日：2010-10-01
申请号：KR1020070026846
申请日：2007-03-19
Applicant: (주)바이오니아
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6846 , C12Q2537/155 , C12Q2527/101 , C12Q2521/107
Abstract: 본 발명은 (ⅰ) 주형 RNA, RNA 의존 DNA 폴리머라제, 반응용 완충용액, 역전사 반응용 프라이머, 임의로 안정화제 및 dNTPs를 포함하는 역전사 반응액을 이용하여 10~40℃에서 반응을 수행하는 단계; 및 (ⅱ) 상기 반응을 수행한 반응액을 이용하여 42~55℃에서 반응을 수행하는 단계를 포함하는 주기로 역전사 반응을 수행하는 것을 특징으로 하는, 순환적 역전사 방법을 제공함으로써, 종래의 단일 온도 조건에서 수행되는 역전사 방법과 비교하여 역전사 반응의 효율을 극대화하여 반응의 민감도 및 증폭율을 증가시킬 수 있게 한 것이다.
역전사 반응, 안정화제, 트레할로스, 고온, 저온, 중온, 순환적 역전사, 역전사 중합효소연쇄반응-
公开(公告)号：KR1020080085398A
公开(公告)日：2008-09-24
申请号：KR1020070026846
申请日：2007-03-19
Applicant: (주)바이오니아
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6846 , C12Q1/686 , C12Q2521/107 , C12Q2527/101 , C12Q2537/155
Abstract: A cyclic reverse transcription method is provided to maximize efficiency of reverse transcription reaction, and increase sensitivity and amplification rate of reaction by performing the reverse transcription reaction under various temperature conditions. A cyclic reverse transcription method comprises the steps of: (i) performing the reverse transcription reaction by using a reaction solution containing template RNA, RNA-dependent DNA polymerase, reaction buffer solution, primer for reverse transcription such as 5-15mer random primer or 14-23 mer dT primer and dNTPs(phosphate-linked nucleotide triphosphates) at 10-40 deg. C; (ii) performing reaction of the reacted solution at 50-55 deg. C when the reverse transcription reaction solution contains a stabilizer such as trehalose or at 42-50 deg. C when the reverse transcription reaction solution contains no stabilizer. Further, the RNA-dependent DNA polymerase is moloney murine leukemia virus reverse transcriptase.
Abstract translation: 提供循环逆转录方法以使逆转录反应的效率最大化，并且通过在各种温度条件下进行逆转录反应来增加反应的灵敏度和扩增速率。 循环逆转录方法包括以下步骤：（i）通过使用含有模板RNA，RNA依赖性DNA聚合酶，反应缓冲溶液，逆转录引物如5-15mer随机引物或14 -23 mer dT引物和dNTP（磷酸酯连接的核苷酸三磷酸）在10-40度。 C; （ii）在50-55℃进行反应的溶液的反应。 当反转录反应溶液含有稳定剂如海藻糖或在42-50度时。 当反转录反应溶液不含稳定剂时。 此外，RNA依赖性DNA聚合酶是moloney鼠白血病病毒逆转录酶。
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公开(公告)号：KR1020140107989A
公开(公告)日：2014-09-05
申请号：KR1020130022324
申请日：2013-02-28
Applicant: (주)바이오니아
Abstract: The present invention relates to a method for synthesizing an affinity tag-free cell free target protein comprising: (a) a step for mixing a template coding a target protein having an enzyme cleavage site with cell lysates; (b) a step for expressing the protein by adding a low molecular weight expression solution to the mixture; (c) a step for attaching a magnetic particle binding to an affinity tag located at the end of the expressed protein; (d) a step for separating the affinity tag and magnetic particle from the expressed target protein by treating a protease recognizing the enzyme cleavage site; and (d) a step for collecting the target protein. The method for synthesizing a protein according to the present invention applies a method for extracting a target protein to a cell free protein expression technique using the magnetic particle conjugated to the affinity tag and the protease recognizing specific sequences so as to perform expression and extraction of the tag-free target proteins at the same time, thereby being useful in terms of production of an original form of a protein without artificial sequences having a negative effect on activation and structure of the protein in producing proteins for the purpose of industries, medicine, and researches.
Abstract translation: 本发明涉及一种合成无亲和标记物的无细胞靶蛋白的方法，包括：（a）将编码具有酶切位点的靶蛋白质的模板与细胞裂解物混合的步骤; （b）通过向混合物中加入低分子量表达溶液来表达蛋白质的步骤; （c）附着与位于表达蛋白质末端的亲和标签结合的磁性粒子的步骤; （d）通过处理识别酶切割位点的蛋白质来分离亲和标签和磁性颗粒与表达的靶蛋白质的步骤; 和（d）收集靶蛋白的步骤。 根据本发明的合成蛋白质的方法将使用与亲和标签结合的磁性颗粒和蛋白酶识别特异性序列的无细胞蛋白质表达技术提取目标蛋白质的方法进行表达和提取 无标签的靶蛋白，因此在生产原始形式的蛋白质方面是有用的，没有人造序列，对于产生蛋白质的活性和结构具有负面影响，用于工业，医药和 研究。
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公开(公告)号：KR101385733B1
公开(公告)日：2014-04-29
申请号：KR1020120018161
申请日：2012-02-22
Applicant: 조선대학교산학협력단 , (주)바이오니아
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 본 발명은 구강 세균감염성질환 원인균 검출용 프라이머 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 구체적으로 구강 세균감염성질환을 일으키는 원인균을 정성 및 정량적으로 검출할 수 있으며, 종-특이성이 뛰어난 구강 세균감염성질환 원인균 검출용 프라이머, 검출용 조성물, 키트 및 마이크로어레이에 관한 것이다. 본 발명에 따른 구강 세균감염성질환 원인균 검출용 프라이머는 민감도가 높고 종-특이성이 뛰어나며, 다양한 세균에 의한 구강 내 치주 조직의 감염 여부를 신속하고 간단하게 검출, 탐지할 수 있으며, 구강 세균감염성질환을 일으키는 원인균을 정성 및 정량적으로 검출할 수 있는 효과가 있다. 또한, 세균학적 예후평가를 규명하는 도구로 이용될 수 있다.
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