公开(公告)号：CN118581149A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410848343.7

申请日：2024-06-27

Applicant: 南通大学

Inventor： 陈艳红 ,  黄倩慧 ,  华炫 ,  张琦 ,  王诗琦 ,  杨政坤 ,  刘国元 ,  魏辉 ,  张健

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供一种病毒载体和根瘤农杆菌介导的柳树基因沉默方法，包括以下步骤：S1、根据旱柳八氢番茄红素脱氢酶SmPDS基因序列构建重组质粒pTRV2‑SmPDS，并转入农杆菌，得到转入重组质粒的阳性农杆菌；S2、利用转入重组质粒的阳性农杆菌制备VIGS转化菌液，并将柳树叶片和根浸泡于VIGS转化菌液中，抽真空后将根部泡在菌液中暗处理过夜；S3、第二天将柳树植株移栽到土壤基质，置于(25℃±1)℃，16h光照/8h黑暗条件下的光照培养箱中培养。本发明以柳树水培株系的叶片和根作为受体材料进行侵染，利用农杆菌将病毒载体转化到柳树细胞内，实现目的基因的表达沉默。