公开(公告)号：CN101225400A

公开(公告)日：2008-07-23

申请号：CN200710165228.6

申请日：2007-11-01

Applicant: 张伟

Inventor： 程东婉 ,  张伟 ,  田海梅 ,  王小兵 ,  李茉 ,  李艳芬

IPC: C12N15/67 ,  C12N15/81 ,  C12N15/12 ,  C07K14/475

Abstract: 本发明涉及了一种提高重组人巨噬细胞抑制因子在毕赤酵母中表达量的方法。本发明其特征在于应用分子生物学方法改造了人巨噬细胞抑制因子基因序列，使其更适合在毕赤酵母中表达，构建了含有巨噬细胞抑制因子的外泌型表达载体，采用PEG1000法转化GS115毕赤酵母菌，用G418抗性浓度递增法筛选多拷贝克隆，得到高表达毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K－MIC－1。巨噬细胞抑制因子毕赤酵母工程菌经甲醇诱导表达，表达产物直接分泌到胞外，离心所得的上清液中即含有重组蛋白表达产物－巨噬细胞抑制因子。它具有提纯工艺简单、成本低、易于大规模表达的优点，为以后的功能研究及抗体制备提供抗原等奠定了基础。