公开(公告)号：CN111925534A

公开(公告)日：2020-11-13

申请号：CN202010770277.8

申请日：2020-08-03

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 王欢 ,  贾宇坤

IPC: C08J3/00 ,  C08J3/075 ,  C08L33/26 ,  C08L5/12

Abstract: 本申请公开了提供一种快速均匀凝固的聚丙烯酰胺凝胶制备方法，包括步骤一、选取相同大小的两块玻璃、以及琼脂糖溶液；步骤二、将步骤一中的两块玻璃平行竖直放置；步骤三、将琼脂糖溶液从两块玻璃形成的空腔底部注入，直至完全密封两块玻璃的底部；步骤四、将聚丙烯酰胺凝胶原料注入两块玻璃形成的空腔内。本发明通过用超声波从聚丙烯酰胺凝胶第一侧的底端向聚丙烯酰胺凝胶第二侧的顶端发射，能够快速的实现聚丙烯酰胺凝胶均匀分布；通过采用琼胶加热至60～70℃，然后在高于60℃的温度条件下过滤，之后回收上清液或滤液，从上清液或滤液中分离纯化得到所需琼脂糖溶液的方法快速实现聚丙烯酰胺凝胶的凝固。

公开(公告)号：CN117843760A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202410037826.9

申请日：2016-11-11

Applicant: 徐州科源生物技术有限公司 ,  浙江农林大学

Inventor： 杨仙玉 ,  宋源普 ,  刘怡君 ,  贾宇坤 ,  蒋桂瑾

IPC: C07K14/475 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种EDF重组蛋白的表达方法，属于获得肽的基因工程方法技术领域。对中华大蟾蜍EDF‑1的ORF进行密码子优化和化学合成，并连接到原核表达载体，获得重组质粒；将其转化至大肠杆菌感受态细胞中，涂布于含卡那霉素的LB琼脂培养基上倒置培养；次日，取一单菌落接种于LB培养液恒温振荡培养；将培养的菌液接种于新鲜LB培养液，恒温震荡培养，向其中加入IPTG，培养并进行重组蛋白的诱导表达。将发明应用于EDF‑1的表达和纯化、抗血清制备等，具有表达量大、纯度高等优点。

公开(公告)号：CN106568825A

公开(公告)日：2017-04-19

申请号：CN201610996941.4

申请日：2016-11-11

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 杨仙玉 ,  宋源普 ,  李玉兰 ,  蒋桂瑾 ,  贾宇坤 ,  刘怡君

IPC: G01N27/447

CPC classification number: G01N27/44747

Abstract: 本发明涉及一种防止溶液泄漏的聚丙烯酰胺凝胶制备方法，属于物理或化学装置技术领域。先将两块玻璃的底部以琼脂糖凝胶密封，将其置于两个等高台上，并确保玻璃与等高台连接的两端水平，且玻璃下端与操作台面有间距，两玻璃底部以上的间隙形成制胶区，向该制胶区中加入制胶原料即可开始制胶。将发明应用于聚丙烯酰胺凝胶制备，具有简单、方便、快速、减少溶液浪费、可确保胶块数量等优点。

公开(公告)号：CN106568825B

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201610996941.4

申请日：2016-11-11

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 蒋桂瑾 ,  宋源普 ,  李玉兰 ,  杨仙玉 ,  贾宇坤 ,  刘怡君

IPC: G01N27/447

Abstract: 本发明涉及一种防止溶液泄漏的聚丙烯酰胺凝胶制备方法，属于物理或化学装置技术领域。先将两块玻璃的底部以琼脂糖凝胶密封，将其置于两个等高台上，并确保玻璃与等高台连接的两端水平，且玻璃下端与操作台面有间距，两玻璃底部以上的间隙形成制胶区，向该制胶区中加入制胶原料即可开始制胶。将发明应用于聚丙烯酰胺凝胶制备，具有简单、方便、快速、减少溶液浪费、可确保胶块数量等优点。

公开(公告)号：CN108728433A

公开(公告)日：2018-11-02

申请号：CN201810612779.0

申请日：2018-06-14

Applicant: 浙江农林大学 ,  杭州野生动物世界有限公司

Inventor： 杨仙玉 ,  贾宇坤 ,  张先福 ,  马敬华 ,  施伟斌 ,  刘建勋

IPC: C12N15/10

Abstract: 本申请涉及一种动物线粒体DNA的纯化方法，属于包含酶或微生物的测定或检测方法技术领域。将待检测动物组织中加入裂解液，研磨成浆后常温离心，取上清液加入到DNA结合柱进行纯化，所述DNA结合柱表面偶联有带正电荷的二乙胺乙醇亲水性树脂，裂解处理后的浆液中的DNA结合到DNA结合柱上并完成纯化，纯化完毕的DNA结合柱加入灭菌水中，静置并常温离心，即可得到待检测动物的线粒体DNA；所述裂解液中蛋白酶K和RNase A的浓度分别为20μg/mL、10μg/mL，裂解温度为37℃，裂解时间为5min-3h。将本申请应用于肉源的鉴定，具有操作简便、获取率高、成本低廉等优点。

公开(公告)号：CN106520811A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201610994089.7

申请日：2016-11-11

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 杨仙玉 ,  宋源普 ,  刘怡君 ,  贾宇坤 ,  蒋桂瑾

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/475

CPC classification number: C07K14/475

Abstract: 本发明涉及一种EDF重组蛋白的表达方法，属于获得肽的基因工程方法技术领域。对中华大蟾蜍EDF-1的ORF进行密码子优化和化学合成，并连接到原核表达载体，获得重组质粒；将其转化至大肠杆菌感受态细胞中，涂布于含卡那霉素的LB琼脂培养基上倒置培养；次日，取一单菌落接种于LB培养液恒温振荡培养；将培养的菌液接种于新鲜LB培养液，恒温震荡培养，向其中加入IPTG，培养并进行重组蛋白的诱导表达。将发明应用于EDF-1的表达和纯化、抗血清制备等，具有表达量大、纯度高等优点。