Abstract:
본 발명은 분석하고자 하는 단백질(항원)에 특이적으로 결합할 수 있는 항체를 표면에 고정시켜 단백질 칩을 제조하는 단계와; 분석하고자 하는 단백질과 동일한 단백질에 표지시킨 표준 단백질을 준비하는 단계와; 상기 표준 단백질을 분석하고자 하는 단백질이 포함된 분석시료와 혼합하고, 항체가 고정된 단백질 칩의 표면에 적하하는 단계와; 상기 단백질 칩의 항체에 대하여 표준 단백질과 분석하고자 하는 단백질간의 경쟁적인 면역반응을 통해 나타나는 형광도를 형광 스캐너로 분석하는 단계;를 포함하는 단백질의 분석방법에 관한 것으로, 상기와 같은 분석방법은 분석하고자 하는 단백질이 함유된 분석시료의 표지 작업없이 미리 표지된 표준 단백질과의 경쟁적 반응을 통해 바로 분석이 가능하고 그 분석결과 또한 즉시 판독이 가능하므로 전체적인 분석시간을 줄일 수 있으며, 특히 다수의 혈액을 하나의 표준시료로 동시에 검사가 가능하므로 검사 비용의 절감 및 분석시간의 감소로 인하여 매우 높은 경제적인 효과를 가져올 수 있다. 단백질 칩, 항체, 항원, 혈액, 표지, 형광도
Abstract:
A dual function surface plasmon resonance biosensor is provided to simultaneously obtain and analyze SPR spectrum and STR image with one equipment, thereby being convenient and providing high efficiency. The dual function surface plasmon resonance biosensor comprises a light source(1), a polariscope(4) which p-polarizes light emitted from the light source, an optical lens system which irradiates the p-polarized light, a diaphragm(2), a convex lens(3), mirrors(5,6), a protein chip(8) which regularly aligns a plurality of protein spots vertically and horizontally located adjacent to the bottom side of a prism(9) to allow the irradiated light by the optical lens system to be entered, a filter(10), a CCD camera(11) which sequentially images light reflected from the protein chip to obtain images, an optical fiber(12) which receives and delivers the light reflected from the protein chip, a monochromator(13) connected to the optical fiber, a fixing tool(14) which fixes the CCD camera and a receiver of the optical fiber, and a moving stage which supports the fixing tool and is moved by a driving tool to allow the reflected light from the protein chip to be selectively entered into the fixed CCD camera or the receiver of the optical fiber. The biosensor further comprises an x-y linear stage(7) which is sequentially moved by the driving tool which uses GPIB communication to allow the light passed through the prism to be irradiated into a portion including spots of a specific range in the protein chip.
Abstract:
PURPOSE: A method for simultaneously measuring activity and interaction of protein is provided to simultaneously analyze enzyme activity and affinity of 16 proteins with TG2. CONSTITUTION: A method for simultaneously measuring activity and interaction of a protein comprises: a step of introducing alkoxysilane with an amino acid residue on the surface of a substrate; a step of attaching a punched tape on the surface of the substrate and preparing an array chip with a plurality of spots; a step of introducing the substrate of a target enzyme or an interacting protein to the end of the spot; a step of dropping a reaction solution to the substrate or the interacting protein for transamindation of the substrate or the interacting protein with 5-(biotinamido)pentylamine; a step of introducing streptavidin or avidin which is labeled with different fluorescent materials to biotin; and a step of analyzing the fluorescent materials and measuring the activity and interaction of the target enzyme.
Abstract:
본 발명은 인시투 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정에 관한 것으로서, 본 발명에서는 살아있는 세포나 조직 내에서 아미드교환반응(transamidation) 반응이 유도된 세포 추출물을 어레이(array) 형태의 기판에 고정시키고 감도가 높은 형광으로 표지된 검출자를 이용해 형광값을 측정하여 인시투 트랜스글루타미나아제(in situ transglutaminase; in situ TGase)의 활성도를 분석함으로써, 기존의 ELISA plate assey를 이용하거나 Western blot 방법과 달리 어레이 형태의 단백질 분석칩을 이용하기 때문에 다수의 세포와 조직을 동시에 분석할 수 있고, 그 분석시간을 현저하게 단축할 수 있을 뿐만 아니라, 활성도 분석 시 감도가 높은 형광을 사용하기 때문에 적은 시료로도 고감도로 측정할 수 있어 세포내에서 일어나는 기전을 규명할 수 있는 분석 방법에도 활용이 가능하며, 세포내 활성도 측정을 통한 세포의 조절 및 기능 연구에 이용할 수 있을 뿐만 아니라, 혈액 등과 같은 체액을 이용한 각종 질환 검사에도 활용이 가능하다.
Abstract:
A method for analyzing transglutaminase activity is provided to reduce the analysis time by simply measuring the transglutaminase activity by using an array-based assay chip, and decrease the amount of sample used, so that the method is used for identifying mechanisms occurred in cells. A method for analyzing transglutaminase activity comprises the steps of: introducing alkoxysilane with a function group in the end to the surface of a substrate; attaching a tape with pores at regular distances to the substrate surface to prepare an array chip with a plurality of spots; introducing a substrate protein of transglutaminase in ends of the spots; adding dropwise of a sample containing transglutaminase for activity analysis, and analysis solution containing (5-(biotinamido)pentylamine) DTT(dithiothreitol) and CaCl2 on the substrate protein to induce transamidation of (5-(biotinamido)pentylamine) with the substrate protein; and introducing a target material for analysis to biotin located in the end by the transamidation, and analyzing the target material. Further, the alkoxysilane is selected from aminoalkyltrialkoxysilane, mercaptoalkyltrialkoxysilane or epoxyalkyltrialkoxysilane.