Abstract:
본발명은시차주사형광측정법(differential scanning fluorimetry)을이용한단백질정량방법, 이를이용한재조합단백질생산공정의품질관리(quality control; QC) 방법및 특정단백질을과발현하는세포의스크리닝방법에관한것이다. 본발명에따른 DSF를이용한단백질의정량방법은표적단백질의표지나항체등을필요로하지않고적은양의시료로도단백질을정량할수 있으며, 특히별도의정제과정없이세포용해물로부터직접생산된단백질의정량이가능하고상용화된 RT-PCR 기기및 플레이트를이용할수 있어동시에 96개내지는 384개시료까지도분석할수 있다. 따라서, 세포배양기로부터채취한세포용해물로부터세포가단백질을정상적으로발현하고있는지빠르고간편하게확인할수 있으므로, 재조합단백질의생산과정에서품질관리를위한수단으로유용하게사용될수 있다. 또한, 단백질의대량생산을위한특정단백질을과발현하는세포주선별을스크리닝하는방법에도적용할수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A novel amylosucrase derived from Methylobacillus flagellatus is provided to compose sugar to glucose and fructose and to form alpha-1,4 bond. CONSTITUTION: An amylosucrase has an amino acid of sequence number 2. The amino acid sequence is encoded by a nucleic acid of sequence number 1. The amylosucrase is derived from Methylobacillus flagellatus. The sucrase is activated at pH 8.0.
Abstract:
A method for manufacturing a single albutin derivative using an amylosucrase isolated from Dienococcus georthermalis is provided to obtain the single albutin derivative having excellent melanogenesis inhibition effect. A method for manufacturing a single albutin derivative using an amylosucrase which is isolated from Dienococcus georthermalis comprises a step of mixing 10 U/ml of recombinant amylosucrase, 50g/L of albutin, 40g/L of sugar and Tris-Cl buffer; a step of reacting mixture solution at 30°C for 12 hours and boiling for five minutes to produce the single albutin derivative; and a step of isolating and purifying the single albutin derivatives.
Abstract:
본 발명은 시차 주사 형광측정법(differential scanning fluorimetry)을 이용한 단백질 정량방법, 이를 이용한 재조합 단백질 생산 공정의 품질관리(quality control; QC) 방법 및 특정 단백질을 과발현하는 세포의 스크리닝 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 DSF를 이용한 단백질의 정량방법은 표적 단백질의 표지나 항체 등을 필요로 하지 않고 적은 양의 시료로도 단백질을 정량할 수 있으며, 특히 별도의 정제과정 없이 세포 용해물로부터 직접 생산된 단백질의 정량이 가능하고 상용화된 RT-PCR 기기 및 플레이트를 이용할 수 있어 동시에 96개 내지는 384개 시료까지도 분석할 수 있다. 따라서, 세포배양기로부터 채취한 세포 용해물로부터 세포가 단백질을 정상적으로 발현하고 있는지 빠르고 간편하게 확인할 수 있으므로, 재조합 단백질의 생산 과정에서 품질관리를 위한 수단으로 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 단백질의 대량 생산을 위한 특정 단백질을 과발현하는 세포주 선별을 스크리닝하는 방법에도 적용할 수 있다.
Abstract:
본 발명은 아밀로수크라아제(amylosucrase), 말토올리고실트레할로오스 합성효소(maltooligosyltrehalose synthase); 및 말토올리고실트레할로오스 트레할로하이드롤라아제(maltooligosyltrehalose Trehalohydrolase)를 이용하거나, 아밀로수크라아제 및 말토올리고실트레할로오스 합성효소와 말토올리고실트레할로오스 트레할로하이드롤라아제가 융합되어 제조된 트레할로오스 합성효소를 이용한 설탕으로부터 트레할로오스(trehalose)를 제조하는 방법에 관한 것으로, 효소적 합성법에서 사용되는 종래의 기질인 전분 및 전분 가수분해물에 비해 상대적으로 저렴한 설탕을 기질로 사용하기 때문에 트레할로오스를 상대적으로 경제성 있게 제조할 수 있다. 말토올리고실트레할로오스 합성효소, 말토올리고실트레할로오스 트레할로하이드롤라아제, 설탕, 아밀로수크라아제, 트레할로오스, 트레할로오스 합성효소
Abstract:
PURPOSE: A method for preparing alpha-albutin using amylosucrase derived from Deinococcus geothermalis is provided to obtain alpha-albutin with low toxicity. CONSTITUTION: An alpha-albutin is prepared by adding Deinococcus geothermalis-derived amylosucarase into a reaction solution containing sugar and hydroquinone through enzyme reaction. The preparation also contains a step of adding antioxidant to prevent oxidation of hydroquinone. The anitoxidant is vitamin C. The amylosucrase has a tag which is conjugated to N-terminal or C-terminal.
Abstract:
PURPOSE: A method for preparing a catechin derivative is provided to economically and efficiently prepare the catechin derivative by enzymetic synthesis. CONSTITUTION: A method for preparing a catechin derivative comprises an enzyme reaction by adding amylosucrase to a reaction solution containing sucrose and catechin. The amylosucraase is derived from Deinococcus geothermalis. The molar ratio of the sucrose and catechin is 1:1-10:1. The concentration of the amylase is 50-500 U/ml. The catechin derivative is denoted by chemical formula 1.