중추 신경계 염증성 질환 환자에서 MOG-IGG를 검출하기 위한 세포 기반 분석 방법

    公开(公告)号:WO2021162325A1

    公开(公告)日:2021-08-19

    申请号:PCT/KR2021/001402

    申请日:2021-02-03

    Inventor: 김호진 최경호

    Abstract: 본 발명은 (a) MOG(myelin oligodendrocyte glycoprotein)를 코딩하는 핵산을 형광 단백질 발현 벡터에 클로닝하는 단계; (b) MOG가 클로닝된 상기 발현 벡터를 세포에 형질 감염(transfection)시키는 단계; (c) 상기 형질 감염된 세포를 선별 시약(selection drug)이 포함된 배지에서 배양하여 안정한 형질 감염 세포주를 선별하는 단계; (d) 상기 선별된 세포주와 MOG-IgG를 포함하는 것으로 예상되는 시료를 함께 인큐베이션하는 단계; (e) 인큐베이션이 완료된 시료에 형광-결합된 2차 항체를 첨가하여 MOG-IgG 및 2차 항체 결합체를 형성시키는 단계; 및 (f)상기 MOG-IgG 및 2차 항체 결합체로부터 형광을 검출 또는 분석하는 단계를 포함하는, MOG-IgG를 검출하기 위한 방법; MOG-IgG 관련 중추 신경계 염증성 질환의 예측 또는 진단을 위한 정보를 제공하는 방법; MOG-IgG 관련 중추 신경계 염증성 질환의 진단용 조성물; 및 MOG-IgG 관련 중추 신경계 염증성 질환의 진단 방법에 관한 것이다. 본 발명에서는 MOG-IgG에 특이적으로 결합하는 2차 항체로서 형광-결합된 IgG (H+L)을 사용하는 경우 CBA-IF 및 CBA-FACS 결과 사이에 강한 양의 상관 관계가 있고, 기존의 IgG1 (Oxford) CBA-IF와 비교하여서도 약 98 %의 높은 일치율을 나타냄을 확인하였으며, 특히 본 발명의 방법은 MOG를 발현하는 안정한 세포주(stable cell line)를 제작함으로써 반복적인 형질 감염(transfection)이 요구되지 않으며, 2차 항체 IgM과 교차반응(cross reaction)을 나타내지 않아 특이도가 높고 보다 명확한 형광 신호를 얻을 수 있는 장점이 있다.

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