公开(公告)号：KR101105833B1

公开(公告)日：2012-01-13

申请号：KR1020090088714

申请日：2009-09-18

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  주식회사 메디안디노스틱

Inventor： 고영준 ,  이향심 ,  정혜영 ,  허은정 ,  박종현 ,  이광녕 ,  김수미 ,  권창희 ,  주후돈 ,  장병식

IPC: G01N33/68 ,  C12N15/09 ,  G01N33/563

Abstract: 본 발명은 구제역바이러스 아시아 1형 항체를 검출하기 위한 진단방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 (1) 96웰 마이크로플레이트에 O형, A형, 아시아1형 및 C형의 구제역바이러스 혈청형 공통 항체 70-17을 반응시키는 단계; (2) 상기 플레이트에 부착되지 않은 단클론항체를 세척하여 제거하는 단계; (3) 진단항원으로서 구제역바이러스 아시아1형 유전자재조합 단백질항원을 반응시키는 단계; (4) 상기 플레이트에 부착되지 않은 단백질항원을 세척하여 제거하는 단계; (5) 검사혈청시료를 반응시키는 단계; (6) 상기 플레이트에 부착되지 않은 검사혈청시료를 세척하여 제거하는 단계; (7) 호스레디쉬 페록시다제 효소가 결합된 아시아1형 특이 단클론항체를 경합적으로 반응시키는 단계; (8) 상기 플레이트에 부착되지 않은 단클론항체를 세척하여 제거하는 단계; 및 (9) 효소반응에 의한 발색반응의 흡광도를 측정하여 검사혈청 중의 구제역바이러스 아시아1형 항체 수준을 측정하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 구제역바이러스 아시아1형 항체를 검출하기 위한 진단방법에 관한 것이다.
본 발명의 진단방법은 경합방식의 효소결합면역측정법으로서 소, 돼지, 염소 등 축종에 상관없이 동일한 방식으로 검사할 수 있으며 구제역바이러스 아시아 1형 감염여부를 판정하거나 백신접종시 백신항체역가를 신속하게 측정할 수 있기 때문에 표준검사법인 바이러스중화시험법을 대체할 수 있는 신규 진단법으로의 활용이 가능하며, 또한 기존 진단법과는 달리 생바이러스를 취급하지 않기 때문에 바이러 스 취급에 따른 불의의 사고로 바이러스가 유출되어 질병이 발생할 수 있는 우려를 사전에 차단할 수 있다.
구제역바이러스 아시아1형, 유전자재조합 단백질항원, 단클론항체, 효소결합면역측정법

公开(公告)号：KR1020070116377A

公开(公告)日：2007-12-10

申请号：KR1020060050345

申请日：2006-06-05

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  (주)바이오메트릭스 테크놀로지 ,  주식회사 메디안디노스틱

Inventor： 송재영 ,  김병한 ,  탁동섭 ,  최은진 ,  임성인 ,  한규하 ,  김태선 ,  송금수 ,  주후돈 ,  장병식 ,  이현정 ,  김준배

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/50 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6837 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q2521/107 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2537/143 ,  G01N33/5308

Abstract: A method for detecting swine fever virus or bovine viral diarrhea virus(BVDV) existing in blood or tissue of pig and cow is provided to detect the swine fever virus or BVDV with high specificity and also identify genotypes rapidly and accurately through one testing process. A method for testing swine fever genes using a gene chip comprises the steps of: (a) extracting RNA from swine serum or blood; (b) amplifying the extracted RNA through multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR); (c) hybridizing the amplified swine fever gene with the gene chip; and (d) identifying the specifically coupled swine fever gene through the hybridization and a genotype thereof. A gene chip comprises : at least one forward sequence selected from the group consisting of at least one sequence selected from the group consisting of SEQ ID : NOs. 1-13 and a probe having at least 10-mer sequence homology to the sequences of the SEQ ID : NOs. 1-13; and a reverse sequence of the forward sequence and the probe having at least 10-mer sequence homology to the sequences and is used for identifying the swine fever and BVDV to be positive and identifying the kind and location of the probe used in an oligonucleotide chip for testing genotypes. A method for testing swine fever virus or BVDV comprises a step of testing a swine fever virus gene or a BVDV gene using the gene chip.

Abstract translation: 本发明提供一种检测猪，牛血液或组织中存在的猪瘟病毒或牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的方法，以高特异性检测猪瘟病毒或BVDV，并通过一次检测过程快速，准确地鉴定基因型。 使用基因芯片测试猪瘟基因的方法包括以下步骤：（a）从猪血清或血液中提取RNA; （b）通过多重逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增提取的RNA; （c）将扩增的猪瘟基因与基因芯片杂交; 和（d）通过杂交及其基因型鉴定特异性偶联的猪瘟基因。 基因芯片包含：至少一种选自SEQ ID NO： 1-13和与SEQ ID NO：的序列具有至少10-mer序列同源性的探针。 1-13; 以及与序列具有至少10-mer序列同源性的正向序列和探针的反向序列，并用于鉴定猪发热和BVDV为阳性，并鉴定用于寡核苷酸芯片中的探针的种类和位置 测试基因型。 一种用于测试猪瘟病毒或BVDV的方法包括使用该基因芯片测试猪瘟病毒基因或BVDV基因的步骤。

公开(公告)号：KR100977306B1

公开(公告)日：2010-08-23

申请号：KR1020080009261

申请日：2008-01-29

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  주식회사 메디안디노스틱

Inventor： 최강석 ,  전우진 ,  이은경 ,  윤은임 ,  권준헌 ,  주후돈 ,  장병식 ,  양미영

IPC: C12N15/64 ,  C12N15/09 ,  C12N15/32

Abstract: 본 발명은 닭전염성F낭병(IBD) 진단에 관한 것으로, 본 발명은 베큘로바이러스를 이용한 유전자재조합 기법으로 인공발현한 단백질 항원인 닭전염성F낭병의 진단 항원 및 이를 포함하는 진단시약에 관한 것이다.
좀 더 상세하게는, 닭에서 분리된 강독형 국내분리 닭전염성F낭병바이러스로부터 추출한 VP2 단백질 유전자를 포함하는 유전자재조합 발현벡터와 이를 이용하여 제조한 VP2 단백질 유전자를 포함하는 재조합 베큘로바이러스, 및 상기 베큘로 바이러스 발현벡터를 이용하여 작성한 재조합 베큘로 바이러스를 곤충세포에 감염시켜 발현된 재조합 VP2단백질에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기 재조합 VP2 단백질을 IBD의 진단에 적용하는 IBD 진단용 항원 및 IBD 진단시약에 관한 것이다.
따라서 본 발명에 의하여 종래에 닭을 감염시켜 생산하여 진단하던 것을 대체하여 실험실 배양법으로 인공발현 단백질 형태로 생산함으로써 감염성 병원체 취급에 따른 질병 전파 위험성 없이 진단액을 안전하고 신속하게 대량으로 생산이 가능하며, 종래의 바이러스항원보다 오히려 더 민감하게 특이항체를 검출할 수 있다.
닭전염성F낭병, 닭전염성F낭병 바이러스, 유전자재조합 VP2단백질, 한천겔침강반응법(AGID)

公开(公告)号：KR1020090083236A

公开(公告)日：2009-08-03

申请号：KR1020080009261

申请日：2008-01-29

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  주식회사 메디안디노스틱

Inventor： 최강석 ,  전우진 ,  이은경 ,  윤은임 ,  권준헌 ,  주후돈 ,  장병식 ,  양미영

IPC: C12N15/64 ,  C12N15/09 ,  C12N15/32

Abstract: An antigen for diagnosing infectious bursal disease (IBC) through gene recombination using vaculovirus is provided to detect specific antibody and safely and quickly produce vaccine. A recombinant expression vector comprises structure protein VP2 gene(sequence number1) of infectious bursal disease (IBD) virus. The virus is IBD virus strain (IBDV kr/D62/06). An IBD virus VP2 recombinant protein rIBDVP2[recombinant Infectious Bursal Disease VP2] is produced by infecting a recombinant baculo virus in an insect cell. An antigen for diagnosing IBD is a peptide in which IBD virus structure protein VP2 gene(sequence number 1) is expressed or its partial peptide. The diagnosis is performed through a test by agar gel immune diffusion.

Abstract translation: 提供通过使用真核病毒通过基因重组来诊断传染性法氏囊病（IBC）的抗原，以检测特异性抗体并安全快速地生产疫苗。 重组表达载体包含感染性囊病（IBD）病毒的结构蛋白VP2基因（序列号1）。 病毒是IBD病毒株（IBDV kr / D62 / 06）。 通过在昆虫细胞中感染重组杆状病毒产生IBD病毒VP2重组蛋白rIBDVP2 [重组传染性法氏囊病VP2]。 用于诊断IBD的抗原是其中IBD病毒结构蛋白VP2基因（序列号1）表达的肽或其部分肽。 通过琼脂凝胶免疫扩散试验进行诊断。

公开(公告)号：KR100791538B1

公开(公告)日：2008-01-07

申请号：KR1020060050357

申请日：2006-06-05

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  주식회사 메디안디노스틱

Inventor： 송재영 ,  김병한 ,  탁동섭 ,  최은진 ,  임성인 ,  한규하 ,  주후돈 ,  장병식 ,  이현정 ,  박경민

IPC: C12N15/33 ,  C12N15/09 ,  C12N15/10

Abstract: 본 발명은 돼지콜레라 바이러스 E
rns
단백질 및 이에 특이적으로 반응하는 단클론항체를 이용한 돼지콜레라
항체 감별 진단방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 국내에서 분리된 다양한 유전형의 돼지콜레라 바이러스(swine fever virus) 중 3종의 E
rns
단백질을 코딩하는 유전자를 배큘로바이러스(Baculovirus)를 이용하여 발현한 재조합 돼지콜레라 바이러스 E
rns
단백질, 및 상기 E
rns
단백질에 특이적으로 반응하는 단클론항체(monoclonal antibody)를 이용하여 돼지콜레라 E
rns
에 대한 항체를 검사하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 단클론항체를 이용하는 경우에 E
rns
에 대한 항체를 검출할 수 있어 야외에서 감염된 돼지콜레라 바이러스 항체를 용이하게 감별 진단할 수 있으며, 또한 본 발명의 진단 방법은, 3종의 재조합 단백질을 동시에 이용하는 경우에 돼지콜레라 바이러스의 모든 유전형에 대해 유전형에 관계없이 일정한 민감도를 나타내므로, 돼지콜레라 바이러스에 대한 항체를 용이하게 검출할 수 있다.
돼지 콜레라 바이러스, 이알엔에스, 단클론항체, 감별 ELISA

公开(公告)号：KR1020070116382A

公开(公告)日：2007-12-10

申请号：KR1020060050357

申请日：2006-06-05

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  주식회사 메디안디노스틱

Inventor： 송재영 ,  김병한 ,  탁동섭 ,  최은진 ,  임성인 ,  한규하 ,  주후돈 ,  장병식 ,  이현정 ,  박경민

IPC: C12N15/33 ,  C12N15/09 ,  C12N15/10

Abstract: A method for screening and detecting a swine fever virus antibody is provided to easily screen and diagnose infected swine fever virus antibody by using a monoclonal antibody specifically reacting with a recombinant swine fever virus Erns protein and secure constant sensitivity regardless of all genotypes of the swine fever virus when using all three kinds of recombinant protein. A recombinant swine fever virus Erns is prepared by expressing a gene encoding three Erns proteins among swine fever viruses having various genotypes using baculovirus. A method for preparing a monoclonal antibody specifically reacting to the Erns comprises the steps of: (a) constructing a swine fever virus LOM strain-derived Erns recombinant gene using a baculovirus expression system; and (b) producing the monoclonal antibody using the recombinant Erns protein. A method for screening and detecting a swine fever virus antibody comprises the steps of: (a) mixing three kinds of Erns recombinant proteins at proper concentration to prepare an antigen cocktail; (b) after diluting the antigen cocktail into a coating buffer solution, pouring it in a plate to be absorbed into the plate; (c) washing the recombinant antigen not-absorbed into the plate to remove it; (d) adding a sample to be tested to the plat to allow the reaction; (e) washing the sample to be tested not specifically bound to the recombinant Erns antigen protein absorbed into the plate to remove it; (f) adding a monoclonal antibody not being bound to the enzyme but being specifically reacted to the Erns protein to allow the reaction; (g) washing the monoclonal antibody not being bound to the recombinant Erns antigen protein absorbed into the plate to remove it; and (h) adding a substrate reacting with the enzyme to determine the swine fever virus infection.

Abstract translation: 提供了一种筛选和检测猪瘟病毒抗体的方法，通过使用与重组猪瘟病毒Erns蛋白特异性反应的单克隆抗体轻松筛选和诊断感染的猪瘟病毒抗体，无论猪瘟的所有基因型如何 使用全部三种重组蛋白的病毒。 通过使用杆状病毒在具有各种基因型的猪瘟病毒中表达编码三种Erns蛋白质的基因来制备重组猪瘟病毒Erns。 制备与Erns特异性反应的单克隆抗体的方法包括以下步骤：（a）使用杆状病毒表达系统构建猪瘟病毒LOM菌株衍生的Erns重组基因; 和（b）使用重组Erns蛋白产生单克隆抗体。 筛选和检测猪瘟病毒抗体的方法包括以下步骤：（a）以适当浓度混合三种Erns重组蛋白以制备抗原混合物; （b）将抗原混合物稀释到涂布缓冲溶液中后，将其倒入板中吸收到板中; （c）将未吸收的重组抗原洗涤到板中以除去它; （d）将待测试样品加入平板以允许反应; （e）洗涤待测试的样品，未特异性地结合到吸收到板中的重组Erns抗原蛋白质以除去它; （f）加入未结合酶的单克隆抗体，但与Erns蛋白特异性反应以进行反应; （g）洗涤未结合到吸附到板中的重组Erns抗原蛋白的单克隆抗体以除去它; 和（h）加入与酶反应的底物以确定猪瘟病毒感染。

公开(公告)号：KR101249759B1

公开(公告)日：2013-04-11

申请号：KR1020100046648

申请日：2010-05-18

Applicant: 주식회사 메디안디노스틱 ,  대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 김준배 ,  유은정 ,  주후돈 ,  김우창 ,  신연경 ,  송재영 ,  윤순식 ,  윤소라 ,  최은진 ,  김성희 ,  한규하 ,  박최규 ,  이오수

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/70

Abstract: 본 발명은 인플루엔자 A형 바이러스를 검출하기 위한 인플루엔자 A형 바이러스 공통 PCR 프라이머 및 돼지 유래 인플루엔자(신종플루, A/Korea/01/2009(H1N1)) 바이러스 검출 특이 PCR 프라이머에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 인플루엔자 A형 바이러스 및 신종플루(A/Korea/01/ 2009(H1N1)) 바이러스를 동시에 신속하고 정확하게 검출할 수 있는 정밀 검사방법을 제공한다. 이와 같이, 본 발명에 따른 PCR 프라이머 및 검출 방법은 돼지에서 인플루엔자 A형 바이러스 검출 및 신종플루(A/Korea/01/2009(H1N1)) 바이러스를 조기 진단할 수 있어 백신 및 치료제 처방을 명확하게 할 수 있다.

公开(公告)号：KR100817264B1

公开(公告)日：2008-03-27

申请号：KR1020050103057

申请日：2005-10-31

Applicant: 주식회사 메디안디노스틱 ,  강원도 ,  대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 주후돈 ,  장병식 ,  박경민 ,  이현정 ,  이정자 ,  홍경수 ,  정기수 ,  서종억 ,  김지태 ,  이상록 ,  홍원우 ,  엄재구 ,  박종현 ,  계수정 ,  김용주 ,  이광녕

IPC: C12Q1/00 ,  G01N33/53

Abstract: 본 발명은 구제역 바이러스 비구조단백질 3AB을 코딩하는 유전자를 대장균을 이용하여 발현한 재조합단백질과 구제역 바이러스의 비구조 단백질 3B의 특정 항원 결정부위(epitope)에 특이적인 반응성을 가지는 단일클론 항체를 생산하는 방법과 이를 통하여 생산된 단클론항체를 이용하여 구제역 바이러스 비구조단백질에 대한 항체를 검출하는 방법에 관한 것으로, 구제역 바이러스의 단백질 중 동일성이 가장 높은 부위인 비구조단백질에 대한 항체 검출 방법으로 특히 항원결정부위 타겟팅(epitope targeting)을 통하여 구제역 바이러스의 모든 혈청형에 대해 검출이 가능하여 혈청형별 항체 검사를 수행하는 하는 번거로움을 해소할 수 있는 장점을 제공한다.
본 발명에 의한 진단방법은 구제역 바이러스 비구조단백질의 일부인 3AB 펩타이드 또는 재조합단백질과 3B의 에피토프에 특이적으로 반응하는 단일클론 항체 조합을 이용하여 동물의 구제역바이러스의 비구조 단백질에 대한 항체 존재여부를 정량적으로 검출하여 구제역 바이러스 감염을 진단할 수 있는 방법이다. 또한 이 기술은 구제역바이러스에 감염되는 대부분의 유제류에 대해서 각 축종별 이차항체를 따로 사용하는 번거로움 없이 항체 검출이 가능하며 이 기술을 이용하여 차단효소면역검사법 (Blocking ELISA), 경쟁효소면역검사법(Competitive ELISA) 등 다양한 검사기술에 사용하여 구제역 바이러스에 대한 감염항체를 검사할 수 있다.
구제역, 구제역 바이러스, 비구조단백질, 3AB, 단일클론 항체, 차단 효소면역검사법

公开(公告)号：KR101423303B1

公开(公告)日：2014-07-29

申请号：KR1020110123936

申请日：2011-11-25

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 안동준 ,  정우석 ,  정혜영 ,  주후돈 ,  김준배 ,  유은정 ,  김은미

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: Y02A50/451

Abstract: 본 발명은 송아지설사에 주로 문제시 되고 있는 소설사병 바이러스 원인체인 노로바이러스, 로타바이러스 및 코로나바이러스의 유전자 진단을 위한 프로브, 유전자칩, 유전자 증폭용 프라이머 및 이를 이용한 병원체 진단방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르면 여러 단계를 거쳐야 하는 종래의 검사 방법과 달리 한번의 검사로 신속하게 신생우 설사병을 유발하는 주요 바이러스 원인체 및 유전형을 검사 할 수 있다.

公开(公告)号：KR1020130058105A

公开(公告)日：2013-06-04

申请号：KR1020110123936

申请日：2011-11-25

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 안동준 ,  정우석 ,  정혜영 ,  주후돈 ,  김준배 ,  유은정 ,  김은미

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: Y02A50/451 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/6837 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/124

Abstract: PURPOSE: A probe and a gene chip for diagnosing norovirus, rotavirus, and coronavirus, a primer for amplifying a gene, and a method for diagnosing pathogen using the same are provided to detect pathogen causing NCD(Neonatal Calf Diarrhea) and genotype. CONSTITUTION: A primer for detecting rotavirus, norovirus, and coronavirus which are a pathogen causing NCD contains a primer containing one or more sequences among sequence numbers 1-12. A method for amplifying a gene comprises simultaneously detecting rotavirus A, B, and C using a primer containing sequences of sequence numbers 1-6. The method comprises a step of detecting norovirus genotype group I, II, and III using a primer containing sequences of sequence numbers 7-10. The method comprises a step of detecting coronavirus using one or more primers among sequence numbers of sequence numbers 11 and 12. A probe contains one or more sequences among sequence numbers 13-91 to detect rotavirus, norovirus, and coronavirus.

Abstract translation: 目的：提供用于诊断诺如病毒，轮状病毒和冠状病毒的探针和基因芯片，用于扩增基因的引物和使用其的病原体诊断方法，以检测引起NCD（新生小牛腹泻）和基因型的病原体。 构成：用于检测导致NCD的病原体的轮状病毒，诺如病毒和冠状病毒的引物含有含有序列号1-12中的一个或多个序列的引物。 用于扩增基因的方法包括使用含有序列号1-6的序列的引物同时检测轮状病毒A，B和C. 该方法包括使用含有序列号7-10的序列的引物检测诺如病毒基因型I，II和III的步骤。 该方法包括使用序列号11和12的序列号中的一种或多种引物检测冠状病毒的步骤。探针含有序列号13-91中的一个或多个序列，以检测轮状病毒，诺如病毒和冠状病毒。