Abstract:
본 발명은 meso -2,3-부탄다이올 제조방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 다음의 단계를 포함하는 meso -2,3-부탄다이올의 제조방법이다: (a) 크렙시엘라( Klebsiella ) 종의 아세토인 환원효소(acetoin reductase) 뉴클레오타이드 서열을 대장균( Escherichia coli )에서의 발현에 적합한 코돈 최적화(codon optimization)하여 서열목록 제1서열의 뉴클레오타이드 서열을 수득하는 단계; (b) 상기 아세토인 환원효소의 코돈 최적화된 뉴클레오타이드 서열을 발현 벡터에 삽입하여 재조합 벡터를 제조하는 단계; (c) 상기 재조합 벡터를 대장균에 형질전환하여 재조합 대장균을 제조하는 단계; 및 (d) 상기 재조합 대장균으로부터 meso -2,3-부탄다이올을 제조하는 단계. 본 발명은 크렙시엘라( Klebsiella ) 종의 아세토인 환원효소(acetoin reductase)를 암호화하는 유전자서열의 코돈 최적화(Codon Optimization)를 통해 해당 효소의 활성이 대장균에서 높게 발현 될 수 있도록 코돈을 개량한 것으로 이를 통하여 재조합 대장균에 의한 meso -2,3-부탄다이올의 생산을 가능하게 하였으며, 기존의 효소 활성에 비해 3-7배의 증가된 활성을 나타낸다.
Abstract:
The present invention relates to a method for preparing meso-2,3-butanediol using an industrial carbon source. The present invention provides a method for preparing meso-2,3-butanediol using transformed Escherichia coli, wherein the method comprises: (a) preparing a recombinant vector by inserting a nucleotide sequence coding acetolactate decarboxylase of Klebsiella sp. and a nucleotide sequence coding alcohol dehydrogenase thereof; (b) introducing the recombinant vector into Escherichia coli to prepare transformed Escherichia coli; (c) culturing the transformed Escherichia coli in a culture medium to prepare meso-2,3-butanediol; and (d) obtaining the meso-2,3-butanediol. According to the present invention, the transformed Escherichia coli is cultured in a culture medium containing an industrial carbon source, thereby producing meso-2,3-butanediol more economically.
Abstract:
본 발명은 (a) wabG 유전자가 불활성화(inactivation) 되어 있고; (b) budR 유전자가 과발현된 2,3-부탄다이올 생산용 크렙시엘라( Klebsiella ) 재조합 균주에 관한 것으로, 본 발명의 2,3-부탄다이올 생산용 크렙시엘라( Klebsiella ) 종 재조합 균주은 비병원성으로 안전하게 2,3-부탄다이올을 생성할 수 있으며, 증가된 2,3-부탄다이올 생성능을 갖는 재조합 균주를 제공한다.
Abstract:
본 발명은 (a) 미생물의 바이오매스를 냉장 메탄올(cold methanol)에 현탁한 다음 동결시키는 단계; (b) 상기 동결된 바이오매스를 해동시키는 단계; (c) 상기 단계 (a) 및 (b)를 반복하여 상기 바이오매스로부터 누출된 대사물의 현탁액을 얻는 단계; 및 (d) 상기 대사물의 현탁액에 대하여 매스 스펙트로미트리(mass spectrometry) 분석을 실시하여 상기 미생물의 세포 내 대사물을 동정하는 단계를 포함하는 미생물의 세포 내 대사 프로파일(intracellular metabolic profile)을 얻는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법에 따르면, 본 발명은 고생산 및 고수율의 대사 프로파일을 제공할 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: An extraction and analysis method of microorganisms for acquiring an intracellular metabolic profile is provided to obtain a metabolic profile of high productivity and high yield and to construct an optimal method for preparing intracellular metabolites. CONSTITUTION: A method for acquiring an intracellular metabolic profile in microorganisms comprises the steps of: suspending microorganism biomass in cold methanol and freezing the biomass; thawing the biomass and repeating the steps; collecting a suspension of the metabolites released from the biomass; and performing mass spectrometry of the suspension and identifying the intracellular metabolites.
Abstract:
PURPOSE: A Klebsiella pneumoniae strain for overexpression of 2,3-butandiol is provided to enhance 2,3-butandiol production. CONSTITUTION: A Klebsiella pneumoniae strain for overexpression of 2,3-butandiol is prepared by transformation or cotransformation with an expression vector containing a nucleotide sequence. The expression vector contains: a nucleotide encoding acetolactate decarboxylase; a nucleotide sequence encoding acetolactate synthase; and a nucleotide sequence encoding acetoin reductase.
Abstract:
본 발명은 산업용 탄소원을 이용한 mes o-2,3-부탄다이올 제조방법에 관한 것으로, (a) 크렙시엘라 종의 아세토락테이트 디카르복실라아제(acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열 및 알코올 디히드로제나아제(alcohol dehydrogenase)를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열을 발현 벡터에 삽입하여 재조합 벡터를 제조하는 단계; (b) 상기 재조합 벡터를 대장균에 도입하여 형질전환 대장균을 제조하는 단계; (c) 상기 형질전환 대장균을 배양 배지에서 배양하여 mes o-2,3-부탄다이올을 제조하는 단계; 및 (d) 상기 mes o-2,3-부탄다이올을 수득하는 단계를 포함하는 형질전환 대장균( Escherichia coli )을 이용한 mes o-2,3-부탄다이올 제조방법을 제공한다. 본 발명에 따르면, 본 발명의 형질전환 대장균은 산업용 탄소원을 포함하는 배양배지에 배양하여 보다 경제적인 meso -2,3-부탄다이올의 생산이 가능하다.
Abstract:
The present invention relates to a method for producing 2,3-butandiol. More particularly, the present invention provides a method for producing 2,3-butanediol by using transgenic Klebsiella pneumonia, wherein the method comprises the steps of: (a) inactivating a nucleotide sequence coding wabG of Klebsiella; (b) preparing a recombinant vector by inserting a nucleotide sequence coding acetolactate decarboxylase and a nucleotide sequence coding acetolactate synthase into an expression vector; (c) preparing transgenic Klebsiella by introducing the recombinant vector into the Klebsiella; (d) preparing 2,3-butandiol by culturing the transgenic Klebsiella in a culture medium; and (e) obtaining the 2,3-butandiol. According to the present invention, 2,3-butandiol can be economically produced by using industrial carbon sources, which are economical as compared with the prior art.