Abstract:
본발명은지방조직유래중간엽줄기세포를신경줄기세포, 신경세포및 가바성신경세포로분화시키는방법에관한것으로, 구체적으로지방조직유래중간엽줄기세포를세포배양배지에저분자억제제인 SB431543, Noggin, 및 LDN193189를첨가하여 6 내지 8일간배양하고(단계 1: 전-처리단계), 그런다음, B27, N2, 및 ascorbic acid를첨가한배지에 5일간배양하고(단계 2: 신경유도단계), bFGF 및 EGF를첨가한배지에서 5 내지 7일간더 배양하여(단계 3: 증식단계), 신경줄기세포로분화시키고, 상기단계 3의세포배양액에 purmorphamine 및 BDNF(Brain-derived neurotrophic factor)를첨가한배지를이용하여추가적으로신경세포로분화시켰으며, 또한, 상기단계 2의세포배양액에 purmorphamine 및 BDNF와 dbcAMP 및 BDNF을첨가한배지를이용하여상기신경세포를가바성신경세포로분화시키는방법을확립하여, 본발명은인간신경세포또는 GABA분비개재뉴런의발달과연관된분자기작을확인하는데유용하게사용될수 있으며, 본발명의분화방법을이용한시험관상에서특정질병의성질을가진성체중간엽줄기세포로부터유도된신경세포또는유도된 GABA분비개재신경세포는신경학적질병규명과약물스크리닝에유용하게사용될수 있다.
Abstract:
본발명은지방세포유래중간엽줄기세포를신경줄기세포, 신경세포및 가바성신경세포로분화시키는방법에관한것으로, 구체적으로지방세포유래중간엽줄기세포를세포배양배지에저분자억제제인 SB431543, Noggin, 및 LDN193189를첨가하여 6 내지 8일간배양하고(단계 1: 전-처리단계), 그런다음, B27, N2, 및 ascorbic acid를첨가한배지에 5일간배양하고(단계 2: 신경유도단계), bFGF 및 EGF를첨가한배지에서 5 내지 7일간더 배양하여(단계 3: 증식단계), 신경줄기세포로분화시키고, 상기단계 3의세포배양액에 purmorphamine 및 BDNF(Brain-derived neurotrophic factor)를첨가한배지를이용하여추가적으로신경세포로분화시켰으며, 또한, 상기단계 2의세포배양액에 purmorphamine 및 BDNF와 dbcAMP 및 BDNF을첨가한배지를이용하여상기신경세포를가바성신경세포로분화시키는방법을확립하여, 본발명은인간신경세포또는 GABA분비개재뉴런의발달과연관된분자기작을확인하는데유용하게사용될수 있으며, 본발명의분화방법을이용한시험관상에서특정질병의성질을가진성체중간엽줄기세포로부터유도된신경세포또는유도된 GABA분비개재신경세포는신경학적질병규명과약물스크리닝에유용하게사용될수 있다.