公开(公告)号：KR100807184B1

公开(公告)日：2008-02-27

申请号：KR1020060129755

申请日：2006-12-19

Applicant: 재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 정진하 ,  방옥선 ,  강성환

IPC: C12N9/50 ,  C12N15/09

Abstract: A Ufm1-specific protease 1(UfSP1) is provided to be able to show the protein decomposing activity on Ufm1 acting on an important mechanism in a cell, thereby being widely utilized for investigating the important mechanism in the cell where the Ufm1 involves. A Ufm1-specific protease 1(UfSP1) includes an amino acid sequence of SEQ ID : NO. 1. An expression plasmid includes a gene having a sequence of SEQ ID : NO. 2 AND encoding the UfSP1 and is pMAL-c2X-UfSP1. A method for preparing the UfSP1 comprises the steps of: (a) culturing a transformant prepared by transforming E. coli BL21 using the expression plasmid; and (b) obtaining the UfSP1 from the cultured fungus bodies.

Abstract translation: 提供Ufm1特异性蛋白酶1（UfSP1）能够显示Ufm1上的蛋白质分解活性，作用于细胞中的重要机制，从而广泛用于研究Ufm1所涉及的细胞中的重要机制。 Ufm1特异性蛋白酶1（UfSP1）包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列。 表达质粒包含具有SEQ ID NO：1的序列的基因。 2编码UfSP1并且是pMAL-c2X-UfSP1。 制备UfSP1的方法包括以下步骤：（a）培养使用表达质粒转化大肠杆菌BL21制备的转化体; 和（b）从培养的真菌体获得UfSP1。

公开(公告)号：KR100736743B1

公开(公告)日：2007-07-09

申请号：KR1020050088971

申请日：2005-09-23

Applicant: 재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 정진하 ,  방옥선 ,  강성환

IPC: C12Q1/37

Abstract: 본 발명은 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법에 관한 것이다.
본 발명은 (1) 특정 기질단백질의 특이적 분해효소에 의해 절단되는 부위를 포함하는 폴리펩티드의 카르복시 말단에는 에코틴을 융합시키고 아미노 말단에는 GST,GFP,MBP로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 융합시켜서 융합 단백질을 얻는 단계; (2) 상기 융합 단백질을 기질로 상기 특정 기질단백질 분해효소와 기질-효소 반응을 수행하는 단계; 및 (3) 상기 기질-효소 반응의 반응물을 가열한 후 원심분리하여 상층액을 분리하고, 상기 상층액의 트립신 활성 억제도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 제공한다.
본 발명의 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 사용할 경우 트립신 활성의 억제 정도를 통해 형광 측정기상에서 빠르게 그리고 간단하고 효율적으로 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성을 측정할 수 있다.
유비퀴틴, 유비퀴틴 유사 단백질, 단백질 분해효소, 에코틴, 트립신

公开(公告)号：KR1020070034362A

公开(公告)日：2007-03-28

申请号：KR1020050088971

申请日：2005-09-23

Applicant: 재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 정진하 ,  방옥선 ,  강성환

IPC: C12Q1/37

CPC classification number: C12Q1/37 ,  C07K14/47 ,  C07K14/81 ,  C07K2319/00 ,  C12N15/63

Abstract: 본 발명은 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법에 관한 것이다.
본 발명은 (1) 특정 기질단백질의 특이적 분해효소에 의해 절단되는 부위를 포함하는 폴리펩티드의 카르복시 말단에는 에코틴을 융합시키고 아미노 말단에는 GST,GFP,MBP로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 융합시켜서 융합 단백질을 얻는 단계; (2) 상기 융합 단백질을 기질로 상기 특정 기질단백질 분해효소와 기질-효소 반응을 수행하는 단계; 및 (3) 상기 기질-효소 반응의 반응물을 가열한 후 원심분리하여 상층액을 분리하고, 상기 상층액의 트립신 활성 억제도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 제공한다.
본 발명의 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 사용할 경우 트립신 활성의 억제 정도를 통해 형광 측정기상에서 빠르게 그리고 간단하고 효율적으로 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성을 측정할 수 있다.
유비퀴틴, 유비퀴틴 유사 단백질, 단백질 분해효소, 에코틴, 트립신

Abstract translation: 本发明涉及测定特定底物蛋白质的特定降解酶活性的方法。

公开(公告)号：KR100807182B1

公开(公告)日：2008-02-27

申请号：KR1020060129759

申请日：2006-12-19

Applicant: 재단법인서울대학교산학협력재단

Inventor： 정진하 ,  방옥선 ,  강성환

IPC: C12N9/88 ,  C12N9/00

Abstract: A novel protease is provided to show the specific protease activity on Ufm1, which acts on an important mechanism in a cell, thereby being widely utilized for investigating the important mechanism in the cell where the Ufm1 involves. A Ufm1-specific protease 2(UfSP2) includes an amino acid sequence of SEQ ID : NO. 1. A method for preparing the UfSP2 comprises the steps of: (a) culturing a transformant which is prepared by transforming E. coli BL21 using an expression plasmid of pMAL-c2X-UfSP2; and (b) obtaining the UfSP2 from the cultured fungus bodies.

Abstract translation: 提供了一种新型蛋白酶，以显示Ufm1的特异性蛋白酶活性，其作用于细胞中的重要机制，从而广泛用于研究Ufm1所涉及的细胞中的重要机制。 Ufm1特异性蛋白酶2（UfSP2）包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列。 1.一种制备UfSP2的方法，包括以下步骤：（a）培养通过使用pMAL-c2X-UfSP2的表达质粒转化大肠杆菌BL21而制备的转化体; 和（b）从培养的真菌体获得UfSP2。