Abstract:
본 발명은 새로운 유비퀴틴-프로테아제 (ubiquitin-specific protease, UBP) 및 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 쥐의 새로운 유비퀴틴-프로테아제로 분자량 45 킬로달톤 및 69 킬로달톤의 유비퀴틴 단백질 분해효소, UBP45 및 UBP69와 그들의 유전자, 그리고 그 유전자를 함유하는 발현 플라스미드에 관한 것이다. 그리고, 이 플라스미드를 이용한 단백질 분해효소의 발현, 정제 방법과 UBP45 및 UBP69 단백질의 효소활성 및 그 특성에 관한 것이다. 유비퀴틴, 유비퀴틴-프로테아제, UBP45, UBP69
Abstract:
본 발명은 폰틴의 수모화를 이용한 항암제 스크리닝 방법에 관한 것으로서,폰틴(pontin)의 225번째 리신에 수모(SUMO) 단백질이 연결된 수모화된 폰틴을 제공하고 상기 수모화된 폰틴을 이용하여 항암제를 스크리닝하는 방법을 제공한다. 보다 상세하게는 세포를 배양하는 단계; 상기 세포에 잠재적인 물질을 접촉시키는 단계; 상기 세포 내 폰틴의 수모화가 대조구(상기 세포에 상기 잠재적인 물질을 접촉시키지 않은 시험구) 대비 감소하는 것을 확인하는 단계; 및 상기 폰틴의 수모화를 감소시키는 상기 잠재성 물질을 항암제로 선택하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항암제 스크리닝 방법을 제공한다. 또한 본 발명은 폰틴과 수모화에 필요한 단백질들(수모 활성화 효소, 수모 결합 효소, 수모 연결 효소) 및 ATP가 포함된 용액을 준비하는 단계; 상기 용액에 잠재적인 물질을 처리하는 단계; 상기 용액 내 폰틴의 수모화가 대조구(상기 용액에 상기 잠재적인 물질을 접촉시키지 않은 시험구) 대비 감소하는 것을 확인하는 단계; 및 상기 폰틴의 수모화를 감소시키는 상기 잠재성 물질을 항암제로 선택하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항암제 스크리닝 방법을 제공한다. 폰틴, 수모화, 항암제
Abstract:
본 발명은 폰틴의 수모화를 이용한 항암제 스크리닝 방법에 관한 것으로서,폰틴(pontin)의 225번째 리신에 수모(SUMO) 단백질이 연결된 수모화된 폰틴을 제공하고 상기 수모화된 폰틴을 이용하여 항암제를 스크리닝하는 방법을 제공한다. 보다 상세하게는 세포를 배양하는 단계; 상기 세포에 잠재적인 물질을 접촉시키는 단계; 상기 세포 내 폰틴의 수모화가 대조구(상기 세포에 상기 잠재적인 물질을 접촉시키지 않은 시험구) 대비 감소하는 것을 확인하는 단계; 및 상기 폰틴의 수모화를 감소시키는 상기 잠재성 물질을 항암제로 선택하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항암제 스크리닝 방법을 제공한다. 또한 본 발명은 폰틴과 수모화에 필요한 단백질들(수모 활성화 효소, 수모 결합 효소, 수모 연결 효소) 및 ATP가 포함된 용액을 준비하는 단계; 상기 용액에 잠재적인 물질을 처리하는 단계; 상기 용액 내 폰틴의 수모화가 대조구(상기 용액에 상기 잠재적인 물질을 접촉시키지 않은 시험구) 대비 감소하는 것을 확인하는 단계; 및 상기 폰틴의 수모화를 감소시키는 상기 잠재성 물질을 항암제로 선택하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항암제 스크리닝 방법을 제공한다. 폰틴, 수모화, 항암제
Abstract:
PURPOSE: Ubiquitin-specific proteases from rat muscle and genes thereof are provided, which enzymes remove ubiquitin bound to p53 protein to stabilize p53 protein in a cell, and regulates differentiation process of muscle cells, so that they can be useful for development of anticancer drugs related to p53 protein. CONSTITUTION: The ubiquitin-specific proteases from rat muscle are UBP45 and UBP69, wherein the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by alpha-peptide bond; the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by epsilon-peptide bond; the ubiquitin-specific protease comprises the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:2; and the UBP45 and UBP69 have molecular weight of 45 kDa and 69 kDa, respectively. The ubiquitin-specific protease genes are ubp45 and ubp69, wherein the ubiquitin-specific protease genes are isolated from cDNA of rat cDNA; the ubiquitin-specific protease genes have the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:2. The expression vector pBS-Ubp45 contains the genes ubp45. A transformant is produced by transforming a host cell of bacteria JM109 strain with the expression vector pBS-Ubp45.
Abstract translation:目的:提供来自大鼠肌肉的泛素特异性蛋白酶及其基因,这些酶可以去除与p53蛋白结合的泛素,以稳定细胞中的p53蛋白,调节肌细胞的分化过程,从而可用于开发抗癌药物 与p53蛋白相关。 构成:来自大鼠肌肉的泛素特异性蛋白酶是UBP45和UBP69,其中泛素特异性蛋白酶通过α-肽键消化与泛素结合的蛋白质或肽; 通过ε-肽键,泛素特异性蛋白酶消化与泛素结合的蛋白质或肽; 泛素特异性蛋白酶包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的全部或部分; UBP45和UBP69的分子量分别为45kDa和69kDa。 泛素特异性蛋白酶基因是ubp45和ubp69,其中泛素特异性蛋白酶基因从大鼠cDNA的cDNA中分离; 泛素特异性蛋白酶基因具有SEQ ID NO:2的核苷酸序列的全部或部分。 表达载体pBS-Ubp45含有基因ubp45。 通过用表达载体pBS-Ubp45转化细菌JM109菌株的宿主细胞产生转化体。