公开(公告)号：WO2020111885A1

公开(公告)日：2020-06-04

申请号：PCT/KR2019/016771

申请日：2019-11-29

Applicant: 전북대학교산학협력단 ,  주식회사 코미팜

Inventor： 허진 ,  박정희 ,  김원일 ,  김소영 ,  서병주 ,  정창기 ,  문자영 ,  김원경 ,  라오찌리 ,  문성철 ,  정호경 ,  박수연

IPC: A61K38/16 ,  A61K39/108 ,  A61K39/39 ,  A61P31/04 ,  C07K14/245 ,  A23K20/142 ,  A23K50/30 ,  A61K39/00

Abstract: 본 발명은 돼지의 부종병 원인 중 하나인 Stx2e 독소 중에서 Stx2eA-C-말단 단편-Stx2eB 오량체 재조합 단백질을 과발현 시키기 위해 Stx2eA-C-말단 단편 유전자 및 Stx2eB 유전자를 각각 pTWIN1 및 pET30a에 각각 클로닝 한 후 이들 벡터를 E. coli BL21(DE3)pLysS를 형질 전환시켰다. Stx2eB 유전자로부터 발현된 단량체 Stx2eB가 5개가 모이면 펜타곤 구조를 이루면서 Stx2eB 오량체를 형성하게 되고, 상기 오량체 Stx2eB 및 Stx2eA-C-말단 단편이 결합하여 안정적인 Stx2eA-C-말단 단편-Stx2eB-오량체 재조합 단백질이 제조된다. 이렇게 제조된 재조합 단백질 및 Alum adjuvant을 혼합하여 항원으로써 부종병 예방백신으로 자돈이 5일령, 4주령일 때 각각 근육으로 다양한 농도로 접종하였다. 접종 후 Stx2eA-C-말단 단편-Stx2eB-오량체 재조합 단백질이 50ug 및 100ug 을 접종한 그룹의 자돈에서는 대조군에 비해 현저한 항체 역가가 관찰되었으며, 비록 25ug을 접종한 그룹의 자돈에서는 대조군과 비슷한 비율의 임상증상으로 인한 폐사가 관찰되었지만, 50ug을 접종한 그룹에서는 대조군에 비해 약 42%가 감소한 폐사률이 관찰되었다, 더욱이 100ug을 접종한 그룹에서는 부종병의 임상 증상 및 폐사가 관찰되지 않았다. 또한 Stx2eB만을 alum adjuvant와 혼합하여 접종한 그룹에서는 접종한 그룹의 80%가 폐사하였다. 따라서 본 발명의 재조합 Stx2eA-C-말단 단편과 Stx2eB 단백질은 톡소이드 백신의 일종으로 독성성분은 없으면서 독소가 세포와 부착하는 부위는 유지되고 있는 톡소이드로 항 Stx2eB 항체는 Stx2e 독소가 유효한 세포에 부착하지 못하도록 하여 돼지 부종병을 예방할 수 있는 톡소이드 백신 개발에 유용할 것으로 기대된다.

公开(公告)号：KR101725242B1

公开(公告)日：2017-04-10

申请号：KR1020150132168

申请日：2015-09-18

Applicant: 전북대학교산학협력단

Inventor： 허진 ,  박정희 ,  김소영

IPC: C12N15/70 ,  C12N9/36 ,  C07K14/47 ,  C12N1/20 ,  A61K39/02

Abstract: 본발명은고스트브루셀라아보투스균주및 이를유효성분으로포함하는브루셀라병예방용백신조성물에관한것이다. 보다상세하게는, T4 파지라이소자임(Lysozyme) 유전자; 효소에의한절단서열; 및 PMAP-36 유전자를포함하는재조합벡터, 상기재조합벡터에의해형질전환된형질전환체인대장균 Bl21(DE3), 상기균주로부터발현정제된 T4 파지라이소자임-PMAP-36, 상기정제된 T4 파지라이소자임-PMAP-36로브루셀라아보투스국내분리주가용균되어제작된고스트브루셀라아보투스균주, 상기균주를유효성분으로포함하는브루셀라병예방또는치료용백신조성물, 및브루셀라병예방또는치료방법을제공한다. 본발명에따르면, 본고스트브루셀라아보투스균주는생균백신과유사한면역원성및 예방효과를나타내면서병원성복귀및 생태계오염의우려가없으며, 항생제내성유전자가수평또는수직전달될우려없이고스트화되기때문에생산비를감소시킬수 있으며, 브루셀라병에대한우수한예방효과를가지고있다.

公开(公告)号：KR101966346B1

公开(公告)日：2019-04-05

申请号：KR1020170006280

申请日：2017-01-13

Applicant: 전북대학교산학협력단

Inventor： 김원일 ,  허진 ,  박정희 ,  서병주 ,  김소영

IPC: C07K14/245 ,  C12N15/70 ,  A61K39/108

公开(公告)号：KR1020170034022A

公开(公告)日：2017-03-28

申请号：KR1020150132168

申请日：2015-09-18

Applicant: 전북대학교산학협력단

Inventor： 허진 ,  박정희 ,  김소영

IPC: C12N15/70 ,  C12N9/36 ,  C07K14/47 ,  C12N1/20 ,  A61K39/02

Abstract: 본발명은고스트브루셀라아보투스균주및 이를유효성분으로포함하는브루셀라병예방용백신조성물에관한것이다. 보다상세하게는, T4 파지라이소자임(Lysozyme) 유전자; 효소에의한절단서열; 및 PMAP-36 유전자를포함하는재조합벡터, 상기재조합벡터에의해형질전환된형질전환체인대장균 Bl21(DE3), 상기균주로부터발현정제된 T4 파지라이소자임-PMAP-36, 상기정제된 T4 파지라이소자임-PMAP-36로브루셀라아보투스국내분리주가용균되어제작된고스트브루셀라아보투스균주, 상기균주를유효성분으로포함하는브루셀라병예방또는치료용백신조성물, 및브루셀라병예방또는치료방법을제공한다. 본발명에따르면, 본고스트브루셀라아보투스균주는생균백신과유사한면역원성및 예방효과를나타내면서병원성복귀및 생태계오염의우려가없으며, 항생제내성유전자가수평또는수직전달될우려없이고스트화되기때문에생산비를감소시킬수 있으며, 브루셀라병에대한우수한예방효과를가지고있다.

Abstract translation: 本发明涉及包含其作为活性成分的鬼布鲁氏菌菌株AVO齿和布鲁氏菌病疫苗组合物。 更具体地说，T4噬菌体溶菌酶基因; 酶切割序列; 和重组载体，通过重组载体链大肠杆菌BL21（DE3）转化的转化体，从菌株表达含有的PMAP-36基因溶菌酶-PMAP-36，纯化的噬菌体T4溶菌酶中的T4噬菌体纯化-PMAP -36，一种用于预防或治疗布鲁菌病的疫苗组合物，其包含上述菌株作为活性成分，以及预防或治疗布鲁氏菌病的方法。 根据本发明，由于生产成本的鬼布鲁氏AVO齿应变指示类似于活疫苗的免疫原性和保护作用不运行的致病返回和生态污染，抗生素抗性基因，而不通过水平或垂直屏幕的风险中的重影的风险 对布鲁氏菌病有很好的预防作用。