公开(公告)号：WO2020111885A1

公开(公告)日：2020-06-04

申请号：PCT/KR2019/016771

申请日：2019-11-29

Applicant: 전북대학교산학협력단 ,  주식회사 코미팜

Inventor： 허진 ,  박정희 ,  김원일 ,  김소영 ,  서병주 ,  정창기 ,  문자영 ,  김원경 ,  라오찌리 ,  문성철 ,  정호경 ,  박수연

IPC: A61K38/16 ,  A61K39/108 ,  A61K39/39 ,  A61P31/04 ,  C07K14/245 ,  A23K20/142 ,  A23K50/30 ,  A61K39/00

Abstract: 본 발명은 돼지의 부종병 원인 중 하나인 Stx2e 독소 중에서 Stx2eA-C-말단 단편-Stx2eB 오량체 재조합 단백질을 과발현 시키기 위해 Stx2eA-C-말단 단편 유전자 및 Stx2eB 유전자를 각각 pTWIN1 및 pET30a에 각각 클로닝 한 후 이들 벡터를 E. coli BL21(DE3)pLysS를 형질 전환시켰다. Stx2eB 유전자로부터 발현된 단량체 Stx2eB가 5개가 모이면 펜타곤 구조를 이루면서 Stx2eB 오량체를 형성하게 되고, 상기 오량체 Stx2eB 및 Stx2eA-C-말단 단편이 결합하여 안정적인 Stx2eA-C-말단 단편-Stx2eB-오량체 재조합 단백질이 제조된다. 이렇게 제조된 재조합 단백질 및 Alum adjuvant을 혼합하여 항원으로써 부종병 예방백신으로 자돈이 5일령, 4주령일 때 각각 근육으로 다양한 농도로 접종하였다. 접종 후 Stx2eA-C-말단 단편-Stx2eB-오량체 재조합 단백질이 50ug 및 100ug 을 접종한 그룹의 자돈에서는 대조군에 비해 현저한 항체 역가가 관찰되었으며, 비록 25ug을 접종한 그룹의 자돈에서는 대조군과 비슷한 비율의 임상증상으로 인한 폐사가 관찰되었지만, 50ug을 접종한 그룹에서는 대조군에 비해 약 42%가 감소한 폐사률이 관찰되었다, 더욱이 100ug을 접종한 그룹에서는 부종병의 임상 증상 및 폐사가 관찰되지 않았다. 또한 Stx2eB만을 alum adjuvant와 혼합하여 접종한 그룹에서는 접종한 그룹의 80%가 폐사하였다. 따라서 본 발명의 재조합 Stx2eA-C-말단 단편과 Stx2eB 단백질은 톡소이드 백신의 일종으로 독성성분은 없으면서 독소가 세포와 부착하는 부위는 유지되고 있는 톡소이드로 항 Stx2eB 항체는 Stx2e 독소가 유효한 세포에 부착하지 못하도록 하여 돼지 부종병을 예방할 수 있는 톡소이드 백신 개발에 유용할 것으로 기대된다.

公开(公告)号：KR101966346B1

公开(公告)日：2019-04-05

申请号：KR1020170006280

申请日：2017-01-13

Applicant: 전북대학교산학협력단

Inventor： 김원일 ,  허진 ,  박정희 ,  서병주 ,  김소영

IPC: C07K14/245 ,  C12N15/70 ,  A61K39/108