유전자 도입 벼 세포 배양액으로부터 재조합 인간 키모트립시노겐 B2의 정제방법
    2.
    发明公开
    유전자 도입 벼 세포 배양액으로부터 재조합 인간 키모트립시노겐 B2의 정제방법 有权
    重组人血清素B2在转基因细胞悬浮培养中的纯化方法

    公开(公告)号:KR1020130087709A

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:KR1020120008771

    申请日:2012-01-30

    Abstract: PURPOSE: A method for purifying recombinant human chymotrypsinogen B2 from a transgenic rice cell culture liquid is provided to easily purify a large amount of the culture liquid with a high purity of 90% and reproducibility. CONSTITUTION: A method for purifying recombinant human Chymotrypsinogen B2 which is expressed in a transgenic rice cell culture liquid comprises the steps of: adjusting the Ph concentration of the culture liquid using strong acid to pH 2.5-3.5; incubating the culture liquid at 4 °C for 12-24 hours and centrifuging the culture liquid; removing salts and impurities from the culture liquid using an ultrafilter membrane and concentrating; and adsorbing chymotrypsinogen B2 from the concentrated culture liquid using a strong cation exchanger.

    Abstract translation: 目的:提供一种从转基因水稻细胞培养液中纯化重组人糜蛋白酶原B2的方法,以高纯度90%和重复性容易地纯化大量的培养液。 构成:用于纯化在转基因水稻细胞培养液中表达的重组人糜蛋白酶原B2的方法包括以下步骤:使用强酸将培养液的Ph浓度调节至pH 2.5-3.5; 将培养液在4℃下孵育12-24小时,离心培养液; 使用超滤膜从培养液中除去盐和杂质并浓缩; 并使用强阳离子交换剂从浓缩培养液中吸附糜蛋白酶原B2。

    형질전환 벼 세포 현탁 배양으로 생산된 재조합 트립신의 효율적인 정제 방법
    4.
    发明公开
    형질전환 벼 세포 현탁 배양으로 생산된 재조합 트립신의 효율적인 정제 방법 有权
    在转基因细胞悬浮培养物中生产的重组TRYPSIN的有效纯化方法

    公开(公告)号:KR1020140078285A

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:KR1020120147492

    申请日:2012-12-17

    Abstract: The present invention relates to a method for an effective purification of a recombinant trypsin produced by transgenic rice cell suspension culture. According to the present invention, a recombinant trypsin is simply and effectively purified with the low cost by effectively removing an amylase in a culture liquid by adjusting pH and a temperature of the culture liquid comprising the recombinant trypsin produced while adjusting of a rice amylase 3D promoter expression system, and by carrying out the trypsin affinity chromatography.

    Abstract translation: 本发明涉及一种有效纯化转基因水稻细胞悬浮培养产生的重组胰蛋白酶的方法。 根据本发明,通过在调节水稻淀粉酶3D启动子的同时调节pH和包含重组胰蛋白酶的培养液的温度,通过有效地去除培养液中的淀粉酶,以低成本简单且有效地纯化重组胰蛋白酶 表达系统,并进行胰蛋白酶亲和层析。

    유전자 도입 벼 세포 배양액으로부터 재조합 인간 키모트립시노겐 B2의 정제방법
    5.
    发明授权
    유전자 도입 벼 세포 배양액으로부터 재조합 인간 키모트립시노겐 B2의 정제방법 有权
    在转基因水稻细胞悬浮培养中纯化重组人糜蛋白酶原B2的方法

    公开(公告)号:KR101363225B1

    公开(公告)日:2014-02-17

    申请号:KR1020120008771

    申请日:2012-01-30

    Abstract: 본 발명은 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 인간 키모트립시노겐(Chymotrypsinogen) B2를 정제하는 방법으로서, (a) 벼 세포 배양 현탁액 내에서 가장 많이 존재하는 단백질인 a-아밀라아제(amylase)를 제거하기 위하여 세포 배양액을 강산으로써 pH 3으로 떨어뜨린 다음 12시간 동안 4℃로 냉장한 후에 원심 분리하는 단계; (b) 상기 원심분리단계에서 pH 조절된 배양액을 분자량 10,000Da 이상의 크기를 배제하는 한외여과에 의한 농축단계; 및 (c) 상기 농축단계에서 얻어진 농축액으로부터 강산성 양이온교환제(strongly acidic cation exchanger)인 Sulphopropyl-Sepharose에 흡착된 인간 유래 키모트립신노겐 B2를 단일 피크로 용출시키는 단계를 포함하고 있다.
    본 발명에 의한 유전자 도입 벼 세포 배양 현탁액에서 발현된 재조합 인간 키모트립시노겐 B2를 정제하는 방법은 단지 3단계만으로 이루어지므로 단순화된 경제적인 정제 공정으로서, 대량 배양액으로부터 정제가 용이하며, 평균 90% 순도로 재현성 있게 정제할 수 있는 우수한 효과가 있다.

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