公开(公告)号：WO2015053439A1

公开(公告)日：2015-04-16

申请号：PCT/KR2014/001214

申请日：2014-02-14

Applicant: 한국과학기술연구원

Inventor： 김윤경 ,  김동진 ,  박기덕 ,  탁혜진 ,  그레일레지스 ,  민선준 ,  배애님 ,  김영수

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/12 ,  C12N15/63

CPC classification number: C07K14/4711 ,  C07K2319/60 ,  C07K2319/70 ,  G01N33/6809

Abstract: 본 발명은 살아있는 세포 내에서 타우 단백질 사이의 상호작용을 모니터링하기 위한 단백질 쌍, 이를 암호화하는 염기서열 쌍, 이를 포함하는 벡터 쌍, 상기 벡터 쌍에 의해서 형질전환된 세포주, 및 상기 세포주를 이용하여 살아있는 세포들에서 타우-타우 상호작용을 모니터링하는 방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는, 세포내 타우 단백질의 상호작용을 모니터링하기 위한 이분자 형광 상보성 아미노산 서열 쌍으로서, 전장 인간 타우 아미노산 서열의 C-말단에 비너스 아미노산 서열의 N-말단 서열이 결합된 제1 형광 상보성 아미노산 서열; 및 전장 인간 타우 아미노산 서열의 C-말단에 비너스 아미노산 서열의 C-말단 서열이 결합된 제2 형광 상보성 아미노산 서열로 이루어지는 이분자 형광 상보성 아미노산 서열 쌍, 이를 암호화하는 염기서열 쌍, 이를 포함하는 벡터 쌍, 상기 벡터 쌍에 의해서 형질전환된 세포주 및 상기 세포주를 이용하여 살아있는 세포들에서 타우-타우 상호작용을 모니터링하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 살아있는 세포들에서 타우-타우 상호작용을 직접적으로 가시화할 수 있게 함으로써 타우 올리고머화 과정을 모니터링하고 정량할 수 있으며, 따라서 타우가 관여하는 질병의 발생을 연구하고 그 올리고머화 과정을 방지하고 되돌리기 위한 방법을 개발하는데 있어서 유용한 수단으로 활용될 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及一种用于监测活细胞中tau蛋白之间的相互作用的蛋白质对，编码它们的碱基序列对，包含其的载体对，由载体对转化的细胞系以及用于监测tau-tau的方法 更具体地说，涉及用于监测细胞内tau蛋白相互作用的双分子荧光互补氨基酸序列对，编码它们的碱基序列，包含该蛋白质的载体对，包含其的载体对，由 载体对，以及使用细胞系监测活细胞中tau-tau相互作用的方法，其中双分子荧光互补氨基酸序列对由以下组成：第一荧光互补氨基酸序列，其中N末端序列 金星氨基酸序列与全长人tau氨基酸序列的C-末端结合; 和第二荧光互补氨基酸序列，其中金星氨基酸序列的C-末端序列与全长人tau氨基酸序列的C-末端结合。 本发明可以通过直接观察活细胞中的tau-tau相互作用来监测和定量tau寡聚化过程，因此可以用作研究tau相关疾病的发生的有用手段，并开发一种预防和逆转的方法 低聚过程。