B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법
    1.
    发明授权
    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법 失效
    乙型肝炎病毒表面抗原预处理人类抗原的制备

    公开(公告)号:KR100345463B1

    公开(公告)日:2003-01-08

    申请号:KR1019980049663

    申请日:1998-11-19

    CPC classification number: C07K16/082 C07K2317/24 C07K2317/56 C07K2317/92

    Abstract: 본 발명은 B형 간염바이러스 (hepatitis B virus, 이하 "HBV"로 약칭함)의 표면항원 프리-S1에 대한 인간화 항체 (humanized antibody)에 관한 것으로, 구체적으로 HBV의 표면항원 프리-S1에 대한 생쥐 단일클론항체 KR127의 가변영역과 가장 유사한 사람 항체유전자를 선별하고 이들을 대상으로 인간화 항체의 중쇄 (heavy chain) 유전자 및 경쇄 (light chain) 유전자, 이를 포함하는 발현 벡터, 상기 발현 벡터로 형질전환된 형질전환체, 그리고 상기 형질전환체를 배양하여 HBV의 표면항원 프리-S1에 대한 인간화 항체를 제조함으로써, 본원 발명의 인간화 항체는 생쥐 단일클론항체 KR127와 유사한 항원결합능을 유지하면서도 KR127보다 생쥐 유래의 아미노산 잔기가 많이 감소되어 인체에서 면역유발능의 감소가 기대되는 바, HBV 감염의 예방과 B형 만성간염의 치료에 효과적으로 이 용할 수 있다.

    인체 혈액 응고 9인 자유 전자의 발현을 위한 벡터 및 이를 포함하는 미생물
    2.
    发明公开
    인체 혈액 응고 9인 자유 전자의 발현을 위한 벡터 및 이를 포함하는 미생물 无效
    人凝血9中表达自由电子的载体和含有它的微生物

    公开(公告)号:KR1019960010859A

    公开(公告)日:1996-04-20

    申请号:KR1019940021946

    申请日:1994-09-01

    Abstract: 본 발명은 인체혈액응고 9인자 유전자의 발현을 위한 벡터 및 이를 포함하는 미생물에 관한 것이다. 즉, 인체 혈액응오 9인자를 코딩하는 cDNA의 중합효소 연쇄반응의 시발체(primer)로서 다음과 같은 올리고뉴클레오타이드를 사용하여 제조한 인체혈액응고 9인자 유전자, 이를 함유하는 벡터, 이 벡터에 의해 형질전환된 숙주세포로서, 예를 들어 Escherichia coli DH5α(KCTC : 8611P) 및 이를 배양하여 인체혈액응고 9인자를 제조하는 방법을 제공함으로써, 혈우병 환자 치료에 응용될 수 있도록 하는 것이다.
    OH1 5´-CATGATCATGGCAGAATCACC-3´
    OH3 5´-CCAACAACCCGAGTGAAGTC-3´
    OH2 5´-GACTTCACTCGGGTTGTTGG-3´ 및
    OH4 5´-GGGAATTCCATCTTTCATTAAGTGAGC-3´

    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법
    3.
    发明授权
    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법 失效
    乙형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법

    公开(公告)号:KR100345469B1

    公开(公告)日:2003-01-15

    申请号:KR1019980049664

    申请日:1998-11-19

    Abstract: PURPOSE: Humanized antibody on surface antigen pre-S1 of hepatitis B virus (HBV) is provided which is derived from mouse monoclonal antibody (KR 359) The humanized antibody maintains the affinity on the antigen but decreases the antigenecity of mouse antibody on the human body by changing amino acid residues specific for mouse into human specific one. CONSTITUTION: Humanized variable region of heavy chain is derived from variable region of heavy chain of human antibody DP67 substituted into mouse framework residues and complementarity-determining region (CDR)1, and 3 and part of 2. Complete humanized heavy chain is constructed by joining leader sequence for secretion, constant region of heavy chain from pRC/CMV-HC-HuS, and humanized variable region. Humanized variable region of light chain is derived from variable region of light chain of human antibody DPK9 substituted into mouse framework residues and complementarity-determining region (CDR)1, 2, and 3. Complete humanized light chain is constructed by joining leader sequence for secretion, constant region of heavy chain from pKC-hr-HuS, and humanized variable region. Each complete chain is cloned into expression vector, pRc/CMV, and transfected into COS7 cell for the production of antibody.

    Abstract translation: 目的:提供乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原pre-S1上的人源化抗体,其衍生自小鼠单克隆抗体(KR 359)。人源化抗体保持对抗原的亲和力但降低小鼠抗体对人体的抗原性 通过将对小鼠特异性的氨基酸残基改变为人类特异性氨基酸残基。 构成:重链的人源化可变区来自人抗体DP67的重链可变区,取代成小鼠框架残基和互补决定区(CDR)1和3以及部分2.完整的人源化重链通过连接 分泌的前导序列,来自pRC / CMV-HC-HuS的重链恒定区和人源化可变区。 轻链的人源化可变区来源于人抗体DPK9的轻链可变区,被取代到小鼠框架残基和互补决定区(CDR)1,2和3中。完整的人源化轻链通过将用于分泌的前导序列 ,来自pKC-hr-HuS的重链恒定区和人源化可变区。 将每个完整链克隆到表达载体pRc / CMV中,并转染到COS7细胞中以产生抗体。

    B형 간염 바이러스의 표면항원 프리-S2에 대한 인간화 항체 및그의 제조방법
    4.
    发明授权
    B형 간염 바이러스의 표면항원 프리-S2에 대한 인간화 항체 및그의 제조방법 失效
    -2 HBV表面抗原pre S2特异性的人源化抗体及其制备方法

    公开(公告)号:KR100308758B1

    公开(公告)日:2001-09-24

    申请号:KR1019990004939

    申请日:1999-02-12

    Abstract: 본발명은 B형간염바이러스 (hepatitis B virus)의표면항원프리-S2에대한인간화항체 (humanized antibody)에관한것으로서, 구체적으로 HBV 표면항원프리-S2 에대한생쥐단일클론항체의가변영역과가장유사한사람유전자를이용하여 HBV 표면항원프리-S2 에대한기존인간화항체 (대한민국특허제102173호)의생쥐유래의아미노산잔기를감소시킴으로인체면역반응을현저히감소시킬수 있는 HBV 프리-S2 에대한인간화항체의중쇄 (heavy chain) 유전자및 경쇄 (light chain) 유전자, 이를포함하는발현벡터, 상기발현벡터로형질전환시킨형질전환체그리고상기형질전환체를배양하여 HBV 표면항원프리-S2 에대한인간화항체를제조하는방법으로구성되며, 상기과정으로얻은본 발명의인간화항체는기존의인간화항체와유사한항원결합능을유지하면서기존의인간화항체보다면역유발능을현저히감소시킴으로 HBV 감염의예방과 B형만성간염의치료에효과적으로이용될수 있다.

    B형 간염 바이러스의 표면항원 프리-S2에 대한 인간화 항체 및그의 제조방법
    7.
    发明公开
    B형 간염 바이러스의 표면항원 프리-S2에 대한 인간화 항체 및그의 제조방법 失效
    抗病毒抗原免疫-S2抗病毒乙型肝炎病毒的抗体及其制备方法

    公开(公告)号:KR1020000055980A

    公开(公告)日:2000-09-15

    申请号:KR1019990004939

    申请日:1999-02-12

    Abstract: PURPOSE: A humanized antibody to surface antigen free-S 2 of hepatitis B virus(HBV) is provided, which maintains similar antigen-binding abilities with existing humanized antibody, but diminishes immune-causing abilities than existing humanized antibody obviously, so which can be used to prevent HBV infection and to treat the chronic hepatitis B. CONSTITUTION: A process for the preparation of humanized antibody to HBV surface antigen free-S 2 comprises of: preparing humanized heavy-chained genes; preparing humanized light-chained genes; preparing representing vector(pCMV-HS2(II)HC) producing humanized heavy-chain; preparing representing vector(pKC-dhfr-HS2(II)) producing humanized light-chain; culturing COS7 cells, and washing with OPTI MEM I; mixing pCMV-HS2(II)HC, pKC-dhfr-HS2(II) and Lipofectamine, adding OPTI MEM I, and pouring the mixture over the COS7 cells, culturing, concentrating, and measuring the concentration of the humanized antibody in COS7 cell; investigating binding ability of humanized antibody to HBV surface antigen free-S2; and investigating binding affinity to antigen of humanized antibody.

    Abstract translation: 目的:提供乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原自由-S2的人源化抗体,其与现有的人源化抗体保持相似的抗原结合能力,但明显降低免疫原性,比现有的人源化抗体明显降低,因此可以 用于预防HBV感染并治疗慢性乙型肝炎。构成:用于制备HBV表面抗原游离-S2的人源化抗体的方法包括:制备人源化重链基因; 制备人源化轻链基因; 制备表达载体(pCMV-HS2(II)HC)产生人源化重链; 制备产生人源化轻链的载体(pKC-dhfr-HS2(II)); 培养COS7细胞,用OPTI MEM I洗涤; 混合pCMV-HS2(II)HC,pKC-dhfr-HS2(II)和Lipofectamine,加入OPTI MEM I,并将混合物倒在COS7细胞上,培养,浓缩和测量COS7细胞中人源化抗体的浓度; 研究人源化抗体对HBV表面抗原游离-S2的结合能力; 并研究人源化抗体对抗原的结合亲和力。

    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법
    8.
    发明公开
    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법 失效
    乙型肝炎病毒表面抗原预处理人类抗原的制备

    公开(公告)号:KR1020000033009A

    公开(公告)日:2000-06-15

    申请号:KR1019980049664

    申请日:1998-11-19

    CPC classification number: C12N15/70 A61K2039/505 C07K14/02 C12N15/62

    Abstract: PURPOSE: Humanized antibody on surface antigen pre-S1 of hepatitis B virus (HBV) is provided which is derived from mouse monoclonal antibody (KR 359) The humanized antibody maintains the affinity on the antigen but decreases the antigenecity of mouse antibody on the human body by changing amino acid residues specific for mouse into human specific one. CONSTITUTION: Humanized variable region of heavy chain is derived from variable region of heavy chain of human antibody DP67 substituted into mouse framework residues and complementarity-determining region (CDR)1, and 3 and part of 2. Complete humanized heavy chain is constructed by joining leader sequence for secretion, constant region of heavy chain from pRC/CMV-HC-HuS, and humanized variable region. Humanized variable region of light chain is derived from variable region of light chain of human antibody DPK9 substituted into mouse framework residues and complementarity-determining region (CDR)1, 2, and 3. Complete humanized light chain is constructed by joining leader sequence for secretion, constant region of heavy chain from pKC-hr-HuS, and humanized variable region. Each complete chain is cloned into expression vector, pRc/CMV, and transfected into COS7 cell for the production of antibody.

    Abstract translation: 目的:提供源自小鼠单克隆抗体(KR359)的乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原前S1上的人源化抗体人源化抗体对抗原保持亲和力,但降低小鼠抗体对人体的抗原性 通过将特异性小鼠的氨基酸残基改变为人特异性的。 构成:重链人源化可变区源自人抗体DP67的重链可变区,被取代成小鼠框架残基和互补决定区(CDR)1,3和部分2。完全人源化重链通过连接 pRC / CMV-HC-HuS重链序列,人源化可变区。 轻链的人源化可变区源自人抗体DPK9的轻链可变区,其被取代成小鼠框架残基和互补决定区(CDR)1,2和3.完全人源化轻链是通过连接前导序列分泌构建的 ,来自pKC-hr-HuS的重链恒定区和人源化可变区。 将每条完整链克隆到表达载体pRc / CMV中,并转染到COS7细胞中以产生抗体。

    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법
    9.
    发明公开
    B형간염바이러스의표면항원프리-S1에대한인간화항체및이의제조방법 失效
    乙型肝炎病毒表面抗原预处理人类抗原的制备

    公开(公告)号:KR1020000033008A

    公开(公告)日:2000-06-15

    申请号:KR1019980049663

    申请日:1998-11-19

    CPC classification number: C07K16/082 C07K2317/24 C07K2317/56 C07K2317/92

    Abstract: PURPOSE: Humanized antibody on surface antigen pre-S1 of hepatitis B virus (HBV) is provided which is derived from mouse monoclonal antibody (KR 127), The humanized antibody maintains the affinity on the antigen but decreases the antigenecity of mouse antibody on the human body by changing amino acid residues specific for mouse into human specific one. CONSTITUTION: Humanized variable region of heavy chain is derived from variable region of heavy chain of human antibody DP7 substituted into mouse framework residues and complementarity-determining region (CDR)1 and 3, and part of 2. Complete humanized heavy chain is constructed by joining leader sequence for secretion, constant region of heavy chain from pRC/CMV-HC-HuS, and humanized variable region. Humanized variable region of light chain is derived from variable region of light chain of human antibody DPK12 substituted into mouse framework residues and complementarity-determining region (CDR)1, 2, and 3. Complete humanized light chain is constructed by joining leader sequence for secretion, constant region of heavy chain from pKC-hr-HuS, and humanized variable region. Each complete chain is cloned into expression vector, pRc/CMV, and transfected into COS7 cell for the production of antibody.

    Abstract translation: 目的:提供源自小鼠单克隆抗体(KR 127)的乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原前S1上的人源化抗体,人源化抗体对抗原保持亲和力,但降低小鼠抗体对人的抗原性 通过将特异性的小鼠的氨基酸残基改变成人特异性的身体。 构成:重链人源化可变区源自人抗体DP7的重链可变区,取代于小鼠框架残基和互补决定区(CDR)1和3中,部分为2.完全人源化重链通过连接 pRC / CMV-HC-HuS重链序列,人源化可变区。 轻链的人源化可变区源自人抗体DPK12的轻链可变区,被取代成小鼠框架残基和互补决定区(CDR)1,2和3.完全人源化轻链是通过连接前导序列分泌构建的 ,来自pKC-hr-HuS的重链恒定区和人源化可变区。 将每条完整链克隆到表达载体pRc / CMV中,并转染到COS7细胞中以产生抗体。

    인체 감마- 글루타밀카르복실라제 유전자를 함유하는 벡터 및 이를 포함하는 미생물
    10.
    发明公开
    인체 감마- 글루타밀카르복실라제 유전자를 함유하는 벡터 및 이를 포함하는 미생물 无效
    含有人γ-谷氨酰羧化酶基因的载体和含有其的微生物

    公开(公告)号:KR1019970006502A

    公开(公告)日:1997-02-21

    申请号:KR1019950021266

    申请日:1995-07-20

    Abstract: 본 발명은 인체 감마-글루타밀카르복실라제 유전자를 함유하는 벡터 및 이로 형질전환된 미생물에 관한 것으로, 본 발명에 따라 특정 염기서열을 갖는 올리고뉴클레오티드를 시발체로 사용하여 제조한 900bp의 DNA 절편을 함유한 벡터를 제한효소 EcoRI으로 절단하고 여기에, 상기 절편을 프로브로 이용하여 플라크 하이브리드화를 통해 제조한 2.3kbp의 인체 감마-카르복실라제 유전자를 함유하는 벡터로부터 제한효소 EcoRI절단에 의해 얻은 1.5kbp의 DNA 절편을 연결하여 2.4kbp의 완전한 감마-카르복실라제를 코드하는 DNA 전체를 함유하는 벡터를 제작함으로써 감마-카르복실라제 유전자를 클로닝할 수 있다.

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