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公开(公告)号：WO2019050318A3
公开(公告)日：2019-03-14
申请号：PCT/KR2018/010466
申请日：2018-09-07
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12P21/00 , C12N9/24 , C07K14/415
Abstract: 본 발명은 목적 단백질의 전체적인 전하를 조절해 pI를 낮춘 목적단백질과 LARD3가 연결된 융합 단백질을 제조하여， 세균의 타입 1 분비 시스템 (Type 1 Secretion System, T1SS)의 ABC수송체를 이용해 목적 단백질을 효과적으로 세포 외 분비시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법을 사용해 별다른 정제과정을 거치지 않고서도 간단하고 효율적으로 단백질을 대량생산할 수 있다.
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公开(公告)号：WO2019050318A2
公开(公告)日：2019-03-14
申请号：PCT/KR2018/010466
申请日：2018-09-07
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12P21/00 , C12N9/24 , C07K14/415
Abstract: 본 발명은 목적 단백질의 전체적인 전하를 조절해 pI를 낮춘 목적단백질과 LARD3가 연결된 융합 단백질을 제조하여， 세균의 타입 1 분비 시스템 (Type 1 Secretion System, T1SS)의 ABC수송체를 이용해 목적 단백질을 효과적으로 세포 외 분비시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법을 사용해 별다른 정제과정을 거치지 않고서도 간단하고 효율적으로 단백질을 대량생산할 수 있다.
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公开(公告)号：KR101743278B1
公开(公告)日：2017-06-07
申请号：KR1020150085137
申请日：2015-06-16
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본발명은페놀계가결합된고분자및 타이로시나아제(tyrosinase)를분비하는균주혼합물을공기와노출시켜계면에서필름을형성시키는단계를포함하는, 균주가고정화된필름제조방법에관한것으로, 이렇게제작된생촉매필름은타이로시나아제를발현하는균주를고정하였을때, 타이로시나아제활성의증거로멜라닌(melanin)을생성하고, 타이로시나아제를발현하는균주와함께리파아제를발현하는균주를고정하였을때, 리파아제활성의증거로지질류(lipid)를분해하며, 타이로시나아제를발현하는균주와함께알칼라인포스파타제를발현하는균주를고정하였을때, 알칼라인포스파타제활성의증거로포스파테이트(phosphatate)를가수분해하여 p-NP를생성하였으며, 구형생촉매필름을제작하여이의활성도확인하였다. 이에, 상기방법은다른효소활성을가지는균주와도필름을제작할수 있고, 이필름제작방법을사용하여다양한생촉매필름을만들수 있을것으로예상되며, 이러한필름을이용하여폐수의정화및 색소의분해등 다양한분야에사용될수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及一种苯酚边界结合聚合物和领带或当脱水酶（酪氨酸酶）的菌株混合物的膜的制造方法分泌暴露和空气中，包括形成在界面处的膜的步骤中，应变被固定的一个，从而使 doensaeng催化剂膜是较好时hayeoteul期间粘结固定应变表达jereul，形变发生黑色素（黑色素）作为脱水酶活性的证据或领带时，和表达具有更好的应变jereul表达领带当脂肪酶 当hayeoteul固定的，并且分解脂质（脂质）作为脂肪酶活性的证据，当更好，当粘结hayeoteul确保表达具有菌株jereul表达，磷腈乳酸盐碱性磷酸酶活性的证据（phosphatate碱性磷酸酶应变 ）水解生成p-NP，制备球形生物催化剂膜并确认其活性。 因此，该方法，并且能够产生一个膜来具有不同的酶活性，用该膜制作方法有望使多种生物催化膜的应变，使用该薄膜品种如纯化的分解和废水的着色 它可以在现场使用。
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公开(公告)号：KR1020160078068A
公开(公告)日：2016-07-04
申请号：KR1020140188742
申请日：2014-12-24
Applicant: 한국과학기술원
Inventor： 안정훈
Abstract: 본발명은슈도모나스속균주에서목적단백질의세포외분비와정제를위한시스템에관한것으로, 보다상세하게, 슈도모나스플루오레슨스의 LARD 3 펩타이드를포함하는, 슈도모나스속균주에서목적단백질의세포외분비와정제를위한조성물및 슈도모나스속균주에, 슈도모나스플루오레슨스의 LARD 3 펩타이드의암호화폴리뉴클레오타이드와목적단백질의유전자를포함하는발현카세트를도입하고, 상기균주를배양하여목적단백질을세포외로분비시키고, 상기분비된단백질을소수성상호작용크로마토그래피를이용하여분리또는정제하는단계를포함하는, 슈도모나스속균주에서목적단백질을생산하는방법에관한것이다.
Abstract translation: 本发明涉及在属于假单胞菌属的菌株中的靶蛋白的纯化和细胞外分泌系统。 更具体地说，本发明涉及含有衍生自假单胞菌荧光的LARD 3肽的属于假单胞菌属的菌株中的靶蛋白的纯化和细胞外分泌的组合物。 本发明还涉及从属于假单胞菌属的菌株制备靶蛋白的方法，其包括以下步骤：向属于假单胞菌属的菌株中导入包含编码靶蛋白的基因的表达盒和编码 衍生自假单胞菌荧光的LARD 3肽; 培养菌株，然后在细胞外分泌靶蛋白; 并使用疏水相互作用色谱（HIC）分离或纯化分泌蛋白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1020150145192A
公开(公告)日：2015-12-29
申请号：KR1020150085137
申请日：2015-06-16
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본발명은페놀계가결합된고분자및 타이로시나아제(tyrosinase)를분비하는균주혼합물을공기와노출시켜계면에서필름을형성시키는단계를포함하는, 균주가고정화된필름제조방법에관한것으로, 이렇게제작된생촉매필름은타이로시나아제를발현하는균주를고정하였을때, 타이로시나아제활성의증거로멜라닌(melanin)을생성하고, 타이로시나아제를발현하는균주와함께리파아제를발현하는균주를고정하였을때, 리파아제활성의증거로지질류(lipid)를분해하며, 타이로시나아제를발현하는균주와함께알칼라인포스파타제를발현하는균주를고정하였을때, 알칼라인포스파타제활성의증거로포스파테이트(phosphatate)를가수분해하여 p-NP를생성하였으며, 구형생촉매필름을제작하여이의활성도확인하였다. 이에, 상기방법은다른효소활성을가지는균주와도필름을제작할수 있고, 이필름제작방법을사용하여다양한생촉매필름을만들수 있을것으로예상되며, 이러한필름을이용하여폐수의정화및 색소의분해등 다양한분야에사용될수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及一种制备应变固定膜的方法，其包括将分离有苯酚结合的聚合物和酪氨酸酶的菌株混合物暴露于空气以在界面上形成膜的步骤。 如此制备的生物催化膜在固定酪氨酸酶表达菌株时产生黑色素作为酪氨酸酶活性的证据，当酪氨酸酶表达菌株和脂肪酶被固定化时，脂质分解为脂肪酶活性的证据，并水解磷酸盐以产生p-NP作为证据 当表达酪氨酸酶的菌株和表达碱性磷酸酶的菌株被固定时，碱性磷酸酶活性。 制备球形生物催化膜，并验证其活性。 因此，该方法也可以制备具有其它酶活性的菌株的膜。 可以使用制备该膜的方法制备各种生物催化膜。 如此制备的膜可用于各种领域，如废水净化和颜料分解。
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公开(公告)号：KR101677090B1
公开(公告)日：2016-11-17
申请号：KR1020140188742
申请日：2014-12-24
Applicant: 한국과학기술원
Inventor： 안정훈
Abstract: 본발명은슈도모나스속균주에서목적단백질의세포외분비와정제를위한시스템에관한것으로, 보다상세하게, 슈도모나스플루오레슨스의 LARD 3 펩타이드를포함하는, 슈도모나스속균주에서목적단백질의세포외분비와정제를위한조성물및 슈도모나스속균주에, 슈도모나스플루오레슨스의 LARD 3 펩타이드의암호화폴리뉴클레오타이드와목적단백질의유전자를포함하는발현카세트를도입하고, 상기균주를배양하여목적단백질을세포외로분비시키고, 상기분비된단백질을소수성상호작용크로마토그래피를이용하여분리또는정제하는단계를포함하는, 슈도모나스속균주에서목적단백질을생산하는방법에관한것이다.
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公开(公告)号：KR1020140041159A
公开(公告)日：2014-04-04
申请号：KR1020120108180
申请日：2012-09-27
Applicant: 한국과학기술원
Inventor： 안정훈
Abstract: The present invention relates to a deletion mutant of Pseudomonas fluorescens and a method for producing a protein using the same, and more specifically, to a deletion mutant of a lipase and/or a protease gene of Pseudomonas fluorescens, which is useful for producing a foreign protein, by using the mutant to increase production and secretion of the foreign protein.
Abstract translation: 本发明涉及荧光假单胞菌的缺失突变体和使用其的蛋白质的制备方法，更具体地，涉及荧光假单胞菌的脂肪酶和/或蛋白酶基因的缺失突变体，其可用于产生外源 蛋白质，通过使用突变体来增加外源蛋白质的产生和分泌。
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公开(公告)号：KR100312456B1
公开(公告)日：2001-11-03
申请号：KR1019990008512
申请日：1999-03-13
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C07K14/21
Abstract: 본발명은미생물에서외래단백질을발현시켜세포밖 배양배지로효율적으로분비시킬수 있도록하는단백질을코딩하는슈도모나스플루오레슨스에서유래한분비촉진유전자, 그를포함하는재조합발현벡터와, 전기발현벡터에의하여형질전환된형질전환체, 및전기발현벡터로형질전환된미생물을배양하고외래단백질의발현을유도하여, 발현된외래단백질이세포밖 배양액으로분비되도록유도하는단계를포함하는외래단백질의생산방법에관한것이다. 본발명에따라일반분비경로에비하여훨씬간단하고효과적으로외래단백질을세포밖으로분비하게할 수있는분비촉진유전자에의한분비시스템이새롭게개발되었으며, 특히슈도모나스플루오레슨스에서외래단백질을세포밖으로분비시키는기능을담당하는분비촉진유전자를규명함으로써, 이분비시스템을이용하여외래단백질을효율적으로발현시키고, 이를산업적으로다양하게이용하는목적에유용하게사용할수 있다.
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