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公开(公告)号：WO2020004936A1
公开(公告)日：2020-01-02
申请号：PCT/KR2019/007729
申请日：2019-06-26
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/70 , C12P17/10
Abstract: 본 발명은 합성조절 sRNA 기반의 동시다중(multiplex) 표적유전자 발현억제 시스템 및 그 제법에 관한 것으로, 보다 자세하게는 다양한 항생제 내성 유전자, 복제원점 및 합성조절 sRNA를 포함하는 벡터의 조합 및 제법, 상기 벡터의 조합으로 구성된 sRNA 라이브러리 및 이를 이용한 유용물질 생산 균주의 스크리닝 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 동시다중 표적유전자 발현억제 시스템은 기존의 유전자 결실방법과는 달리 타겟 유전자의 서열을 변형하지 않으면서 특정 유전자의 발현을 효과적으로 억제할 수 있는 합성조절 sRNA 기반 유전자 발현조절 시스템으로서, 다양한 벡터를 포함하여 원핵생물에서 활용 가능한 다른 플라스미드들과 호환성 있게 사용될 수 있고 동시다중 도입이 가능하도록 설계하여 빠르고 효율적인 재조합 미생물 제조에 유용하다. 또한, 본 발명에서는 유전체 수준 합성 조절 sRNA 라이브러리를 간단하고 빠르게 새로운 플랫폼으로 이전할 수 있는 기술을 제공하며, 이는 유용물질을 고성능으로 생산하는 재조합 미생물 선별에 유용하다. 따라서, 본 발명은 산업적, 의학적으로 유용한 다양한 대사 산물의 생산 효율을 획기적으로 증가시킬 수 있는 재조합 균주의 제작에 유용하다.
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公开(公告)号：WO2013105807A2
公开(公告)日：2013-07-18
申请号：PCT/KR2013/000235
申请日：2013-01-11
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N1/21
CPC classification number: C12N15/1138 , C12N15/111 , C12N15/63 , C12N15/67 , C12N15/70 , C12N2310/11 , C12N2310/13 , C12N2310/18 , C12N2310/3519 , C12N2310/531 , C12P7/22 , C12P13/001 , C12P13/225
Abstract: 본 발명은 신규 구조의 원핵세포 내에서 유전자 발현을 감소시키는 맞춤형 합성 sRNA, 그 제법 및 그 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 MicC, SgrS 및 MicF 중 어느 하나의 sRNA 유래의 Hfq 결합 부위(Hfq binding site) 및 표적 유전자 mRNA와 상보적 결합을 형성하는 영역을 포함하는 합성 sRNA, 그 제법 및 그 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 합성 sRNA는 표적 유전자의 mRNA와의 결합력을 조절함으로써 억제 정도를 조절할 수 있는 장점이 있으며, 유전자 발현을 조절하는 합성 sRNA를 통해 기존의 유전자 결실을 통한 과정 없이 효과적으로 제작, 목적 유전자 발현을 감소시킬 수 있어 재조합 미생물 제조에 유용하며, 다양한 균주에서 빠르게 적용할 수 있어 균주별 대사 능력 측정 및 최적 균주 선정에 매우 적합하다. 아울러, 합성 sRNA를 통한 미생물 대사 흐름 조작에 의해 수득된 본 발명에 따른 tyrosine 혹은 cadaverine을 고효율로 생산하는 재조합 미생물은 의약품 및 산업용제 미생물로 유용하다. 즉, 본 발명에 따른 sRNA를 이용하여 대사산물의 고효율 생산을 위한 발현 억제 타겟 유전자 선별을 용이하게 할 수 있다. 이에 다양한 대사 산물의 효율적 생산을 위한 재조합 균주의 제작 및 효율적 생산방법 확립에 사용할 수 있는바 매우 유용하다.
Abstract translation:
减少在新结构的sRNA，所述制造方法的原核细胞中基因表达的本发明定制合成并涉及它们的应用，更具体地MICC，的SGR和MicF的的sRNA的任一项 衍生Hfq结合位点和与靶基因mRNA形成互补键的区域，其制备方法及其用途。 根据本发明合成的sRNA具有的优点是可以通过调节靶基因的mRNA之间的结合力调节抑制的程度，所述过程有效地通过常规的基因缺失用合成的sRNA调节基因表达而产生，靶基因表达而不 这对于生产重组微生物很有用，可以快速应用于各种菌株，因此非常适合菌株代谢能力的测定和最佳菌株的选择。 此外，通过操作通过合成sRNA的微生物代谢流而获得的生产根据本发明的酪氨酸或尸胺的重组微生物可用作药物和工业微生物。 即，使用本发明的sRNA，可以容易地选择用于代谢产物的高通量生产的表达抑制性靶基因。 因此，构建重组菌株以高效生产各种代谢物并建立高效的生产方法非常有用。
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公开(公告)号：WO2015190627A1
公开(公告)日：2015-12-17
申请号：PCT/KR2014/005120
申请日：2014-06-11
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/67 , C12N15/113 , C12N2310/11 , C12N2310/111 , C12N2310/531
Abstract: 본 발명은 원핵세포 내에서 합성 조절 sRNA를 이용한 유전자 발현 미세조절 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 표적유전자 발현을 미세하게 조절하기 위하여 sRNA 발현양 또는 sRNA와 Hfq의 결합력을 조절하여 표적유전자의 발현을 미세 조절할 수 있는 합성 조절 sRNA에 관한 것이다. 본 발명에 따른 합성 조절 sRNA를 이용한 유전자 발현 미세조절 방법은 sRNA 발현양 조절 또는 sRNA와 Hfq의 결합력을 조절함으로써 표적 유전자의 발현 억제 정도를 미세조절 할 수 있으므로, 유전자 발현을 조절하는 합성 조절 sRNA를 통한 유전자 결실 과정 없이 다양한 균주에서 다양한 표적 유전자의 조합을 동시다발적으로 쉽고 빠르게 적용할 수 있어 균주별 대사 능력 측정 및 최적 균주 선정에 매우 적합하다. 또한, 유전자 발현 억제 표적유전자를 쉽고 빠르게 선정할 수 있고 이렇게 선정된 유전자를 원하는 정도만큼 발현시킬 수 있다는 장점이 있으므로, 다양한 대사산물의 효율적 생산을 위한 재조합 균주의 제작 및 효율적 생산방법 확립에 사용할 수 있는바 매우 유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及使用原核细胞中的合成调节性sRNA来精细调节基因表达的方法，更具体地说，涉及通过调节sRNA表达水平来精细调节靶基因表达的合成调节性sRNA的方法 或sRNA和Hfq之间的结合力，以便精细调节靶基因的表达。 根据本发明，使用合成调节性sRNA进行微调基因表达的方法可以通过调节sRNA表达水平或sRNA与Hfq之间的结合力和 因此可以同时，容易，快速地将各种靶基因组合应用于通过合成调节sRNA调节基因表达的基因缺失的各种菌株，因此非常适合于测量每种菌株的代谢性并选择最佳菌株。 此外，使用合成调节型sRNA进行微小调节基因表达的方法具有容易且快速地选择靶基因以抑制基因表达并将所选择的基因表达到期望的程度，因此可用于生产 重组菌株用于有效生产各种代谢物，并建立了有效生产的方法，因此非常有用。
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公开(公告)号：KR1020150142305A
公开(公告)日：2015-12-22
申请号：KR1020140070869
申请日：2014-06-11
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/11 , C12P7/16 , C12R1/145 , Y10S435/842
Abstract: 본발명은원핵생물인클로스트리디아() 내에서합성조절 sRNA를이용한유전자발현을억제하는방법에관한것으로, 보다상세하게는 MicC sRNA 유래의 Hfq 결합부위(Hfq binding site) 및표적유전자 mRNA와상보적결합을형성하는영역을포함하는합성 sRNA 카세트플라스미드에대장균유래 Hfq 유전자를추가로삽입한후, 클로스트리듐속 미생물에도입하여유전자의발현을억제하는방법에관한것이다. 본발명에따른합성조절 sRNA를이용한클로스트리듐속 미생물유전자의발현억제방법은유전자결실과정없이효과적으로표적유전자발현을억제할수 있으므로, 클로스트리듐속 미생물에서다양한표적유전자의조합을동시다발적으로억제하여대사흐름을조절함에따라다양한유기산생산은물론, 대체에너지원으로사용가능한고효율의에탄올및 부탄올생산균주제작에매우유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及使用合成调节性小RNA（sRNA）抑制作为原核生物的梭菌中的基因表达的方法，更具体地，涉及通过将大肠杆菌来源的Hfq基因另外插入到基因表达的方法来抑制基因表达的方法 合成盒质粒包括形成MicC sRNA衍生的Hfq结合位点与靶基因的mRNA之间的互补结合的区域，然后将其引入梭菌中的微生物中。 根据本发明，使用合成调节性sRNA抑制梭菌中的微生物的基因表达的方法可以有效地抑制靶基因表达而无需基因缺失过程，以同时抑制梭菌中微生物中各种靶基因的组合 以调节代谢流以产生各种有机酸，并构建可用作替代能源的用于生产高效乙醇和丁醇的菌株。
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公开(公告)号：KR101059896B1
公开(公告)日：2011-08-29
申请号：KR1020090096643
申请日：2009-10-12
Applicant: 한국과학기술원
IPC: G01N21/65 , G01N33/483 , C12Q1/68
CPC classification number: G01N21/658 , Y10T436/143333
Abstract: 본 발명은 분석대상이 포함하는 생화학 물질의 존재 또는 함량을 검출하기 위한 표면 증강 라만 산란을 이용한 생화학 물질 검출 방법에 관한 것으로, 상세하게 단결정체의 나노와이어 표면에 물리적으로 서로 분리된 다수개의 나노 입자가 결합하여 형성된 다수개의 핫 스팟에 의해 고감도, 고재현성, 고신뢰도, 고정밀도를 가지며, 멀티플렉스 검출이 가능한 생화학 물질 검출 방법에 관한 것이다.
표면 증강 라만 산란, 귀금속, 나노와이어, 나노입자, DNA, 멀티플렉스Abstract translation: 本发明是一种表面增强拉曼是，具体地凝聚了多个纳米颗粒，彼此物理分离的基于光散射的生化检测方法固定器的纳米线表面上，以检测生物材料的含有分析物的存在或量 被组合成具有高灵敏度，高再现性，高可靠性，形成由所述多个热点的高精确度，本发明涉及用于检测所述复用可检测的生物化学方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1020110039688A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：KR1020090096643
申请日：2009-10-12
Applicant: 한국과학기술원
IPC: G01N21/65 , G01N33/483 , C12Q1/68
CPC classification number: G01N21/658 , Y10T436/143333 , C12Q1/6876 , C12Q2523/313 , G01N33/483
Abstract: PURPOSE: A method for detecting a bio-chemical material using surface-enhanced raman scattering is provided to detect various materials with improved accuracy and sensitivity by forming receiving bodies in multiple noble metal nanowires. CONSTITUTION: A method for detecting a bio-chemical material using surface-enhanced raman scattering is as follows. A single crystalline noble metal nanowire with a first receiving body and noble metal nano particles with a second receiving body are contact with a target material. The target material is coupled to the first receiving body. The target material is coupled to the second receiving body. The noble metal nano particles are coupled to the noble metal nanowire around the target material. A polarized laser beam is irradiated to the noble metal nanowire coupled to the noble metal nano particles. A surface-enhanced Raman scattering spectrum is obtained.
Abstract translation: 目的：提供使用表面增强拉曼散射检测生物化学材料的方法，通过在多个贵金属纳米线中形成接收体来检测具有改进的精度和灵敏度的各种材料。 构成：使用表面增强拉曼散射检测生物化学材料的方法如下。 具有第一接收体的单晶贵金属纳米线和具有第二接收体的贵金属纳米颗粒与靶材料接触。 目标材料耦合到第一接收体。 目标材料联接到第二接收体。 贵金属纳米颗粒与目标材料周围的贵金属纳米线结合。 将偏光激光束照射到与贵金属纳米颗粒耦合的贵金属纳米线。 获得表面增强拉曼散射光谱。
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公开(公告)号：KR101690780B1
公开(公告)日：2016-12-29
申请号：KR1020140070869
申请日：2014-06-11
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본발명은원핵생물인클로스트리디아() 내에서합성조절 sRNA를이용한유전자발현을억제하는방법에관한것으로, 보다상세하게는 MicC sRNA 유래의 Hfq 결합부위(Hfq binding site) 및표적유전자 mRNA와상보적결합을형성하는영역을포함하는합성 sRNA 카세트플라스미드에대장균유래 Hfq 유전자를추가로삽입한후, 클로스트리듐속 미생물에도입하여유전자의발현을억제하는방법에관한것이다. 본발명에따른합성조절 sRNA를이용한클로스트리듐속 미생물유전자의발현억제방법은유전자결실과정없이효과적으로표적유전자발현을억제할수 있으므로, 클로스트리듐속 미생물에서다양한표적유전자의조합을동시다발적으로억제하여대사흐름을조절함에따라다양한유기산생산은물론, 대체에너지원으로사용가능한고효율의에탄올및 부탄올생산균주제작에매우유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及使用合成调节性小RNA（sRNA）抑制作为原核生物的梭菌中的基因表达的方法，更具体地，涉及通过将大肠杆菌来源的Hfq基因另外插入到基因表达的方法来抑制基因表达的方法 合成盒质粒包括形成MicC sRNA衍生的Hfq结合位点与靶基因的mRNA之间的互补结合的区域，然后将其引入梭菌中的微生物中。 根据本发明，使用合成调节性sRNA抑制梭菌中的微生物的基因表达的方法可以有效地抑制靶基因表达而无需基因缺失过程，以同时抑制梭菌中微生物中各种靶基因的组合 以调节代谢流以产生各种有机酸，并构建可用作替代能源的用于生产高效乙醇和丁醇的菌株。
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公开(公告)号：KR101575587B1
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：KR1020130003438
申请日：2013-01-11
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N1/21
CPC classification number: C12N15/1138 , C12N15/111 , C12N15/63 , C12N15/67 , C12N15/70 , C12N2310/11 , C12N2310/13 , C12N2310/18 , C12N2310/3519 , C12N2310/531 , C12P7/22 , C12P13/001 , C12P13/225
Abstract: 본발명은신규구조의원핵세포내에서유전자발현을감소시키는맞춤형합성 sRNA, 그제법및 그용도에관한것으로, 보다상세하게는 MicC, SgrS 및 MicF 중어느하나의 sRNA 유래의 Hfq 결합부위(Hfq binding site) 및표적유전자 mRNA와상보적결합을형성하는영역을포함하는합성 sRNA, 그제법및 그용도에관한것이다. 본발명에따른합성 sRNA는표적유전자의 mRNA와의결합력을조절함으로써억제정도를조절할수 있는장점이있으며, 유전자발현을조절하는합성 sRNA를통해기존의유전자결실을통한과정없이효과적으로제작, 목적유전자발현을감소시킬수 있어재조합미생물제조에유용하며, 다양한균주에서빠르게적용할수 있어균주별대사능력측정및 최적균주선정에매우적합하다. 아울러, 합성 sRNA를통한미생물대사흐름조작에의해수득된본 발명에따른 tyrosine 혹은 cadaverine을고효율로생산하는재조합미생물은의약품및 산업용제미생물로유용하다. 즉, 본발명에따른 sRNA를이용하여대사산물의고효율생산을위한발현억제타겟유전자선별을용이하게할 수있다. 이에다양한대사산물의효율적생산을위한재조합균주의제작및 효율적생산방법확립에사용할수 있는바매우유용하다.
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公开(公告)号：KR101093203B1
公开(公告)日：2011-12-12
申请号：KR1020090099702
申请日：2009-10-20
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본발명에따른구리증착형나노입자배열바이오칩은기존의금 또는은 나노입자배열바이오칩을이용한 LSPR 기반광학바이오칩의장점을가질뿐만아니라, 상기구리증착형나노입자배열바이오칩에광원, 검출기, 분광광도계및 컴퓨터를포함하는 LSPR 광학특성분석시스템을결합함으로써, 다양한바이오물질의상호작용을고감도로검출할수 있는비표지광학바이오센서로의응용이가능하다.
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