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公开(公告)号：KR100408429B1
公开(公告)日：2003-12-06
申请号：KR1020000003187
申请日：2000-01-24
Applicant: 한미사이언스 주식회사 , 한국생명공학연구원 , 한국과학기술원
Inventor： 진승원 , 이두수 , 송태헌 , 최인영 , 유욱준 , 고정호 , 구자신 , 신상태 , 이철상 , 방남수 , 구덕본 , 오건봉 , 박정선 , 윤우식 , 정국동 , 김선정 , 한용만 , 이경광
IPC: A01K67/027
CPC classification number: C12N15/8509 , A01K67/0278 , A01K2207/15 , A01K2217/00 , A01K2217/05 , A01K2227/102 , A01K2267/01 , C07K14/535
Abstract: A goat zygote (I) which comprises a nucleic acid construct containing a nucleotide sequence of a goat beta -casein promoter and a nucleic acid sequence encoding human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF). Independent claims are also included for the following: (1) a method for preparing (I), comprising microinjecting a nucleic acid construct containing a nucleotide sequence of a goat beta-casein promoter and a nucleotide sequence encoding hG-CSF into an intact goat zygote; (2) a method (M1) for preparing an intact goat zygote, comprising synchronizing a female goat, superovulating the female goat, mating the superovulated female goat with a male goat and recovering a zygote from the mated female goat, characterized in that the synchronizing step is conducted by administering norgestomet and estradiol to the female goat, inserting an implant containing norgestomet to the female goat and removing the implant, and the superovulating step is conducted by administering to the female goat, sequentially at predetermined time intervals, a combined dose of pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) and follicle stimulating hormone (FSH), divided doses of FSH, and a combined dose of FSH and human chorionic gonadotropin (hCG); (3) a transgenic goat producing milk containing hG-CSF, which is developed from (I); (4) a process for preparing the transgenic goat of (3) into a female goat and allowing the goat zygote to develop to term; (5) a method for producing hG-CSF, comprising producing milk from the transgenic goat of (3) and recovering the hG-CSF from the milk; and (6) a milk composition comprising hG-CSF, which is produced from the transgenic goat of (3); (7) hG-CSF produced by the method of (5). - ACTIVITY : None given. No biological data given. - MECHANISM OF ACTION : Human granulocyte-colony stimulating factor. No biological data given.
Abstract translation: 一种山羊合子（I），其包含含有山羊β-酪蛋白启动子的核苷酸序列和编码人粒细胞集落刺激因子（hG-CSF）的核酸序列的核酸构建体。 （1）制备（I）的方法，包括将含有山羊β-酪蛋白启动子的核苷酸序列和编码hG-CSF的核苷酸序列的核酸构建体微注射到完整的山羊合子体中 ; （2）用于制备完整山羊合子的方法（M1），包括使雌性山羊同步，超排雌性山羊，将超排母羊与雄山羊交配，并从配对的雌山羊中回收合子，其特征在于同步 通过给雌性山羊施用norgestomet和雌二醇，将含有norgestomet的植入物插入雌性山羊并除去植入物，进行超排卵步骤，通过以预定时间间隔对雌性山羊施用组合剂量的 妊娠母马血清促性腺激素（PMSG）和促卵泡激素（FSH），分次剂量的FSH和联合剂量的FSH和人绒毛膜促性腺激素（hCG）; （3）从（I）开发的含有hG-CSF的转基因山羊产奶; （4）将（3）的转基因山羊制备成雌性山羊并允许山羊合子发育至足月的过程; （5）生产hG-CSF的方法，包括从（3）的转基因山羊生产牛奶并从牛奶中回收hG-CSF; 和（6）包含由（3）的转基因山羊生产的hG-CSF的乳组合物; （7）由（5）的方法产生的hG-CSF。 - 活动：没有给出。 没有给出生物数据。 - 作用机制：人粒细胞集落刺激因子。 没有给出生物数据。
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公开(公告)号：KR1020010073966A
公开(公告)日：2001-08-03
申请号：KR1020000003187
申请日：2000-01-24
Applicant: 한미사이언스 주식회사 , 한국생명공학연구원 , 한국과학기술원
Inventor： 진승원 , 이두수 , 송태헌 , 최인영 , 유욱준 , 고정호 , 구자신 , 신상태 , 이철상 , 방남수 , 구덕본 , 오건봉 , 박정선 , 윤우식 , 정국동 , 김선정 , 한용만 , 이경광
IPC: A01K67/027
CPC classification number: C12N15/8509 , A01K67/0278 , A01K2207/15 , A01K2217/00 , A01K2217/05 , A01K2227/102 , A01K2267/01 , C07K14/535
Abstract: PURPOSE: A fertilized egg introduced by an expression cassette containing a human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF) under a Gapra hircus aegagrus β-casein promoter, Gapra hircus aegagrus generated from the fertilized egg and a process for producing the hG-CSF are provided. Therefore, the hG-CSF can be used for prevention and treatment of a disease such as bone marrow transfusion, malignant lymphoid tumor, acute leukemia, lung cancer, ovarian cancer, anemia or the like. CONSTITUTION: The fertilized egg(KCTC-0718BP) is prepared by microinjection of pGbc-hGCSF as an expression cassette containing a human granulocyte-colony stimulating factor (hG-CSF) under a Gapra hircus aegagrus β-casein promoter to the male pronucleus of a fertilized egg of Gapra hircus aegagrus. Also the Gapra hircus aegagrus is prepared by transplanting the fertilized egg to an oviduct of Gapra hircus aegagrus as a surrogate mother and generating.
Abstract translation: 目的：由受精卵产生的含有Gapra hircus aegagrusβ-酪蛋白启动子的Gapra hircus aegagrus以及hG-CSF产生方法由含有人粒细胞集落刺激因子（hG-CSF）的表达盒引入的受精卵 被提供。 因此，hG-CSF可用于预防和治疗诸如骨髓输血，恶性淋巴瘤，急性白血病，肺癌，卵巢癌，贫血症等疾病。 构成：通过显微注射pGbc-hGCSF作为含有人粒细胞集落刺激因子（hG-CSF）的表达盒，在Gapra hircus aegagrusβ-酪蛋白启动子的雄性原核下，制备受精卵（KCTC-0718BP） Gapra hircus aegagrus受精卵。 通过将受精卵移植到Gapra hircus aegagrus的输卵管作为替代母亲并产生，也可以制备Gapra hircus aeagagrus。
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公开(公告)号：KR100473703B1
公开(公告)日：2005-03-10
申请号：KR1020020050023
申请日：2002-08-23
Applicant: 한미사이언스 주식회사 , 한국생명공학연구원 , 한국과학기술원
IPC: C07K1/14
Abstract: 본 발명은 형질전환 동물의 젖으로부터 재조합 펩타이드 또는 단백질을 정제하는 방법에 관한 것으로, a) 재조합 펩타이드 또는 단백질을 포함하는 젖을 분비하도록 형질전환된 동물의 젖을 1차 원심분리한 후, 분리된 상층액에 유지방 및 지질을 흡착할 수 있는 비드를 가하고 2차 원심분리하여 상층액인 조단백질 분획을 획득하는 단계, b) 조단백질 분획의 pH를 4.0 에서 6.0 범위로 조절하여 재조합 펩타이드 또는 단백질을 가용화된 상태로 유지하는 단계, 및 c) pH가 조절된 조단백질 분획으로 연속적인 컬럼 크로마토그라피를 실시하여 순수하게 정제된 재조합 펩타이드 또는 단백질을 얻는 단계를 포함하는 본 발명의 방법을 사용하면 간단하고 효율적으로 재조합 펩타이드 또는 단백질을 정제할 수 있다.
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR1019920008380B1
公开(公告)日：1992-09-26
申请号：KR1019900019141
申请日：1990-11-24
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/55
Abstract: (a) preparing lipase producing recombinant plasmid pJH92 with use of lipase coding DNA sequence-contg. gener fragment dirived from Pseudomonas fluorescens; (b) separating the DNA fragment contg. lipse gene from pJH92; (c) inserting the DNA fragment into tac promotor-contg. high expression plasmid pTTQ19 to obtain the plasmid pTTY2; (d) transforming the pTTY2 into E. coli and culturing; and (e) extracting and separating the lipase inculusion body from the E. coli culture, and refolding. E. coli BL21 contg. high expression plasmid pTTY2 is prepd. and heat resistant lipase can be produced with high yield by industrialmass prodn..
Abstract translation: （a）使用编码DNA序列的脂肪酶制备产生脂肪酶的重组质粒pJH92。 来自荧光假单胞菌的生物片段; （b）分离DNA片段 来自pJH92的lipse基因; （c）将DNA片段插入引物启动子。 高表达质粒pTTQ19获得质粒pTTY2; （d）将pTTY2转化为大肠杆菌并进行培养; 和（e）从大肠杆菌培养物中提取和分离脂肪酶灌注体并重新折叠。 大肠杆菌BL21 高表达质粒pTTY2是制备的。 耐热脂肪酶可以通过工业产品以高产率生产。
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公开(公告)号：KR1020040018625A
公开(公告)日：2004-03-04
申请号：KR1020020050023
申请日：2002-08-23
Applicant: 한미사이언스 주식회사 , 한국생명공학연구원 , 한국과학기술원
IPC: C07K1/14
Abstract: PURPOSE: A process for purifying a recombinant peptide or protein from the milk of a transformed animal is provided, thereby easily removing an excess of milk fat and lipid. CONSTITUTION: A process for purifying a recombinant peptide or protein from the milk of a transformed animal comprises the steps of: (a) centrifuging the milk from a transformed animal that produces recombinant peptide or protein-containing milk, adding milk fat and lipid absorbing beads into the supernatant, and centrifuging the supernatant to obtain a crude protein fraction from the supernatant; (b) regulating the hydrogen concentration of the crude protein fraction to pH 4.0 to 6.0 to keep recombinant peptide or protein soluble; and subjecting the pH regulated crude protein fraction to continuous column chromatography, wherein the bead is Sephadex LH 20; the column chromatography step is carried out by subjecting the crude protein fraction to hydrophobic column chromatography, anion exchange chromatography and gel filtration chromatography, sequentially; the hydrophobic column is phenyl sepharose column; anion exchange column is DEAE sepharose; gel filtration column is Superdex; and the recombinant protein is hG-CSF.
Abstract translation: 目的：提供从转化动物的乳中纯化重组肽或蛋白质的方法，从而容易地除去过量的乳脂和脂质。 构成：从转化动物的乳中纯化重组肽或蛋白质的方法包括以下步骤：（a）从产生重组肽或含蛋白质的乳的转化动物中离心乳，加入乳脂和脂质吸收珠 上清液离心，从上清液中得到粗蛋白质级分; （b）将粗蛋白质级分的氢浓度调节至pH 4.0至6.0，以保持重组肽或蛋白质的可溶性; 并将pH调节的粗蛋白级分进行连续柱色谱，其中珠粒是Sephadex LH 20; 通过使粗蛋白级分依次进行疏水柱色谱法，阴离子交换色谱法和凝胶过滤色谱法进行柱色谱步骤; 疏水柱为苯基琼脂糖柱; 阴离子交换柱为DEAE琼脂糖凝胶; 凝胶过滤柱为Superdex; 重组蛋白为hG-CSF。
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公开(公告)号：KR1019980073991A
公开(公告)日：1998-11-05
申请号：KR1019970009601
申请日：1997-03-20
Applicant: 한미사이언스 주식회사 , 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 한국산 재래종 산양의 베타카제인 유전자의 프로모터 부위를 이용하여 유선조직 특이적인 발현시스템을 구축하여, 이를 통해 생리활성물질을 생산하는 방법에 관한 것이다. 좀더 자세하게는 유선조직에서만 특이적으로 발현되는 베타카제인 유전자의 발현조절부위를 분리하여, 이를 생리활성물질 유전자 및 전사종결조절부위와 재조합함으로써 인체내에서 생리적 활성을 보이는 물질을 유선조직 관련 세포주 및 동물의 유선조직에서 발현시키는 방법 및 새로운 재조합 백터 pGbc, p Gbc-L 및 pGbc-S(1997. 3. 13 KCTC 8790P, 8791P, 8792P)에 관한 것이다. 한국산 재래종 산양의 베타카제인 유전자의 프로모터를 이용하여 만든 pGbc_S, pGbc_L 및 pGbc를 이용하여 사람의 과식구콜로니 자극인자(human Granulocyte Colony Stimulating Factor) 및 사람의 과식구 대식세포 콜로니 자극인자(human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor)를 생쥐 유선조직으로부터 유래한 HC11 cell 및 형질전환생쥐의 유즙으로부터 발현시켰다. 이러한 유선조직 특이적 발현시스템의 발명으로 기존의 생산방법의 문제점인 생리활성물질의 활성유지, 높은 생산단가, scale-up, 안정성의 문제들을 해결하였다.
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公开(公告)号：KR100135392B1
公开(公告)日：1998-04-23
申请号：KR1019940009140
申请日：1994-04-28
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 호염기성 단백질 분해효소 및 지방질 분해효소를 생산하는 신규한 슈도모나스 에스피.(Pseudomonas sp.) 균주, 이로부터 생산되는 호염기성 단백질 분해 효소 및 상기 균주를 이용하여 호염기성 단백질 분해효소를 제조하는 방법을 제공한다.
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