Procedimiento para la ciclación biocatalítica de terpenos y mutantes de ciclasa que pueden usarse en el mismo

    公开(公告)号:ES2743161T3

    公开(公告)日:2020-02-18

    申请号:ES11785004

    申请日:2011-11-17

    Applicant: BASF SE

    Abstract: Procedimiento para reacciones enzimáticas o biocatalíticas de compuestos de fórmula general IVa**Fórmula** en el que R1 tiene los siguientes significados: (1) cuando "a" es un doble enlace: R1 se selecciona entre: oxo (=O), o CH-(CH2)n-Z, en el que n es 0, 1 o 2 y Z es OH, CHO, C(O)-alquilo, tal como C(O)alquilo C1-C4, en particular C(O)-CH3 o C(O)-CH2CH3; COOH, C(CH2)-CH=CH2; C(OH)(CH3)-CH=CH2; C(CH3)=CH-CH=CH2; o un resto de fórmula C(CH3)=CH-CH2Y en el que Y es OH, CH2OH, COOH o CH2C(O)CH3; o (2) cuando "a" es un enlace sencillo: R1 se selecciona entre CH3; CHO; CH2CH2OH; CH=CH2; CH2C(O)OH; CH2CHO o C3H6CH(CH3)CHO; y en particular es el resto CH-(CH2)n-Z en el que n = 0 y Z = CHO, o es COOH; o es n = 1 y Z = OH; o n = 2 y Z = C(O)CH3; COOH, C(CH2)-CH=CH2; C(CH3)=CH-CH=CH2; o es un resto de fórmula C(CH3)=CH-CH2Y en la que Y es OH, CH2OH, COOH o CH2C(O)CH3; y "a" presenta dado el caso las configuraciones E o Z; o de fórmula IVb**Fórmula** en la que R1 tiene los significados indicados anteriormente; y en particular es CH2CHO; o de fórmula IVc**Fórmula** donde R1 tiene los significados indicados anteriormente y en particular es CH-CHO; y uno de los restos R7 y R8 es H y el otro es alquilo C1-C4, en donde en particular R7 es etilo y el doble enlace "a" y "d" presentan configuración Z; en donde se hace reaccionar un compuesto de fórmula IVa en forma estereoisoméricamente pura o una mezcla de estereoisómeros del mismo usando una enzima con actividad ciclasa o un mutante de enzima de la misma con actividad ciclasa o en presencia de un microorganismo que expresa esta enzima o este mutante de enzima; en donde la enzima comprende una secuencia de aminoácidos, seleccionada entre SEQ ID NO: 2 a 326 o una secuencia parcial de la misma y cataliza al menos la ciclación de un isómero de citronelal para dar al menos un isómero de isopulegol; y en donde el mutante de enzima se selecciona entre mutantes de una enzima de tipo salvaje, que comprende una secuencia de aminoácidos, seleccionada entre SEQ ID NO: 2 a 326 o una secuencia parcial de la misma; el mutante cataliza al menos la ciclación de un isómero de citronelal para dar al menos un isómero de isopulegol, y a) comprende una mutación en la posición F486 de SEQ ID NO: 2; o b) comprende una mutación en una secuencia seleccionada entre SEQ ID NO: 3 a 326, en donde la posición mutada corresponde a la posición F486 de SEQ ID NO: 2.

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