一种提高遗传编辑率的愈伤组织特异CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用

    公开(公告)号:CN117448369A

    公开(公告)日:2024-01-26

    申请号:CN202311390311.9

    申请日:2023-10-25

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种提高遗传编辑率的愈伤组织特异CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用,包括sgRNA转录单元和Cas9转录单元,所述sgRNA转录单元由顺次连接的启动子、靶向目标基因的gRNA基因和终止子组成,所述Cas9转录单元由顺次连接的植物愈伤组织特异表达启动子和Cas9基因组成,所述植物愈伤组织特异表达启动子包括ZmCTA1启动子或ZmPLTP启动子,所述ZmCTA1启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述ZmPLTP启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。与现有技术相比,本发明愈伤组织特异CRISPR/Cas9基因编辑系统能在植物愈伤组织中高效表达并能遗传编辑。

    用于检测玉米3906H基因的特异性引物组及其应用

    公开(公告)号:CN110283924A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910306500.0

    申请日:2019-04-17

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米3906H基因的特异性引物组及其应用。扩增该3906H基因左侧DNA片段的一对特异性引物3906HS1的碱基序列为:正向引物从5′端至3′端为:AACAAGTGACGCTCGGAGATAC;反向引物从5′端至3′端为:GCCTGTTTGGTAAGCACTGGTG;扩增该3906H基因右侧DNA片段的一对特异性引物3906HS12的碱基序列为:正向引物从5′端至3′端为:TCGGAATCTCACACCAAACA;反向引物从5′端至3′端为:TTGCATCCAACTGTTTCCAA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定,检测杂交育种子代各单株中3906H基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高,操作简单,为利用3906H基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

    用于检测玉米Proline1基因的引物组及其应用

    公开(公告)号:CN104862398A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510251306.9

    申请日:2015-05-18

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/13 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米Proline1基因的引物组及其应用。该引物组的第一对碱基序列为:正向引物从5′端至3′端为:CGGTGTCACACACTCCGCATAC;反向引物从5′端至3′端为:GAAGGATAGGGCGTTCTTCGAT;该引物组的第二对碱基序列为:正向引物从5′端至3′端为:GGCCGAGGAGGGATACATCA;反向引物从5′端至3′端为:CAGCCCTCAGGGAAGCGATA。利用这两个分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定,检测杂交育种子代各单株中Proline1基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高,操作简单,为利用Proline1基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

    用于检测玉米不透明表型突变体5512G的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN103276059B

    公开(公告)日:2014-12-03

    申请号:CN201310153683.X

    申请日:2013-04-28

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及玉米中一个新高赖氨酸基因的分子标记及其应用,该分子标记是InDel分子标记——4.9和5.7,均可通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测,见SEQIDNO:1所示的碱基序列。利用这个与5512G基因完全连锁的分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定,检测杂交育种子代各单株中5512G基因的存在与否以及杂合或纯合状态。同时,利用这个分子标记能区分突变体与22种国内主要育种亲本,能够在任何育种背景群体中准确检测到5512G基因的存在。这种检测方法的准确性高,操作简单,为利用5512G基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

    玉米胚乳特异表达启动子50kDzein启动子的克隆及其应用

    公开(公告)号:CN104140966A

    公开(公告)日:2014-11-12

    申请号:CN201410147127.6

    申请日:2014-08-27

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: Y02A40/162

    Abstract: 本发明涉及一种玉米胚乳特异表达启动子50kD zein启动子及其克隆方法。本发明首次分离到一个可在玉米胚乳中特异性表达的启动子——50kD zein基因启动子。该启动子具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,或该序列经取代、缺失和/或添加一个或几个核苷酸且同等功能的由其衍生的核苷酸序列。本发明从克隆玉米胚乳特异表达启动子50kD zein启动子入手,通过对50kD zein启动子的功能分析,从实验水平上验证了该启动子适用于启动目标基因在玉米胚乳中特异性表达,而在其他组织中低表达或不表达。为植物基因工程表达载体构建提供了合适的调控元件,为实验室其他课题的研究进行提供了新的材料。

    用于检测玉米不透明表型突变体5512G的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN103276059A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310153683.X

    申请日:2013-04-28

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及玉米中一个新高赖氨酸基因的分子标记及其应用,该分子标记是InDel分子标记——4.9和5.7,均可通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测,见SEQ ID NO:1所示的碱基序列。利用这个与5512G基因完全连锁的分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定,检测杂交育种子代各单株中5512G基因的存在与否以及杂合或纯合状态。同时,利用这个分子标记能区分突变体与22种国内主要育种亲本,能够在任何育种背景群体中准确检测到5512G基因的存在。这种检测方法的准确性高,操作简单,为利用5512G基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

    一种利用近临界水催化氧化生物质制备乙酸的方法

    公开(公告)号:CN101870643B

    公开(公告)日:2013-03-06

    申请号:CN201010215814.9

    申请日:2010-06-29

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: Y02P20/544

    Abstract: 本发明涉及一种利用超(近)临界水催化氧化生物质制备乙酸的方法,属生物质废弃物资源化利用技术领域。本发明以废弃生物质为原料,在超(近)临界水反应器中,以水为溶剂,以金属离子Ni2+、K+、Na+及12-磷钼杂多酸、12-磷钨杂多酸为催化剂,以过氧化氢为氧化剂在超(近)临界水的温度260~350℃,压力5~17MPa条件下进行氧化水解反应,经过滤、萃取,减压蒸馏最终得到乙酸产物。本发明方法对环境和产物无污染,纯度较高,产率可高达28.53%左右。

    谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法

    公开(公告)号:CN102250925B

    公开(公告)日:2012-10-31

    申请号:CN201110148438.0

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法。本发明的基因来源于盐藻,为SEQIDNO1所示的碱基序列,该基因具有合成谷氨酰胺合成酶的功能,并且证明了该基因能够显著提高模式生物大肠杆菌合成谷氨酰胺的能力。这也预示了所公开的全长基因及氨基酸序列,其在提高生物体的氮利用效率、增加生物体氮元素含量的植物基因工程方面具有应用价值。

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