公开(公告)号：CN118879761A

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202410993726.3

申请日：2024-07-24

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 赵凯歌 ,  蔡子敬 ,  付涵 ,  孙路祥 ,  解淑涵 ,  包满珠 ,  陈龙清 ,  刘秀群

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12N15/52 ,  A01H5/00 ,  A01H5/12 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种利用子叶在蜡梅中进行VIGS基因沉默的方法，该方法包含：将含有TRV2‑CpCHLD载体的重组质粒转入农杆菌GV3101中，用含有卡那霉素和利福平的LB液体培养基分别对含有TRV2‑CpCHLD或TRV1的农杆菌进行过夜活化培养，之后离心收集菌体，弃上清液后重悬菌体；将TRV2‑CpCHLD重悬菌液与TRV1重悬菌液混合，于室温、避光下静置，最后注入蜡梅子叶、幼叶和成熟叶的背面刻伤处。本发明解决了现有技术未曾在蜡梅中实现VIGS高效基因沉默的问题，首次实现VIGS技术在蜡梅中的应用，用于注射侵染的最佳器官是蜡梅子叶，用于注射侵染的农杆菌菌液最佳OD600为1.2～1.5。