公开(公告)号：CN113005136A

公开(公告)日：2021-06-22

申请号：CN202110301234.X

申请日：2021-03-22

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 何姣 ,  黄麟 ,  潘玉婷 ,  张云昭 ,  王俊伟 ,  李建伟

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C40B50/06 ,  G01N21/64 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明属于植物病理学领域，提供一种绿色荧光蛋白标记月季镰刀菌的制备方法及应用，以月季镰刀菌菌株YJ1为转化体，利用PEG介导原生质体的遗传转化方法将绿色荧光蛋白基因标记月季镰刀菌菌株YJ1，获得标记绿色荧光蛋白的月季镰刀菌菌株YJ1‑GFP，可用于月季镰刀菌菌株突变体库的构建，筛选、寄主抗性定量鉴定、寄主对月季镰刀菌菌株侵染的响应机制及月季镰刀菌菌株侵染和致病机理研究。本发明提供的提供一种绿色荧光蛋白标记月季镰刀菌的制备方法，快速方便，步骤简化，耗时短，能直接在平板上挑取绿色荧光蛋白标记的月季镰刀菌菌株YJ1‑GFP。

公开(公告)号：CN113897456B

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202111417224.9

申请日：2021-11-25

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 黄麟 ,  何姣 ,  王俊伟 ,  李建伟

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了四种杉木炭疽病病原菌的实时荧光PCR检测引物探针组合、检测试剂盒及其应用，属于植物保护和质检领域。本发明针对高度保守的APMAT基因的转录间隔区域设计了杉木炭疽病四种病原菌荧光的实时荧光PCR检测引物探针组合，包括胶孢炭疽菌、果生炭疽菌、暹罗炭疽菌以及温州炭疽菌，采用该引物探针组合及含引物探针组合的检测试剂盒能准确、快速、方便的判别炭疽病样本，判断病木中是否含有杉木上述四种炭疽病病原菌，灵敏度达1ng模板DNA。本发明提供的杉木炭疽病病原菌引物探针组合、含有该引物探针组合的检测试剂盒为杉木炭疽病病原菌的检测提供了快速、灵敏、特异的方法。

公开(公告)号：CN113897456A

公开(公告)日：2022-01-07

申请号：CN202111417224.9

申请日：2021-11-25

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 黄麟 ,  何姣 ,  王俊伟 ,  李建伟

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了四种杉木炭疽病病原菌的实时荧光PCR检测引物探针组合、检测试剂盒及其应用，属于植物保护和质检领域。本发明针对高度保守的APMAT基因的转录间隔区域设计了杉木炭疽病四种病原菌荧光的实时荧光PCR检测引物探针组合，包括胶孢炭疽菌、果生炭疽菌、暹罗炭疽菌以及温州炭疽菌，采用该引物探针组合及含引物探针组合的检测试剂盒能准确、快速、方便的判别炭疽病样本，判断病木中是否含有杉木上述四种炭疽病病原菌，灵敏度达1ng模板DNA。本发明提供的杉木炭疽病病原菌引物探针组合、含有该引物探针组合的检测试剂盒为杉木炭疽病病原菌的检测提供了快速、灵敏、特异的方法。

公开(公告)号：CN108866047A

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201810926768.X

申请日：2018-08-14

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 叶建仁 ,  陈飞飞 ,  刘婉慧 ,  王俊伟 ,  唐旭 ,  黄金思

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种基于反复冻融方式的基因组DNA提取方法，向提取细胞培养物(细菌，真菌，线虫等)加入提取缓冲液，混匀后反复冻融两次，加入RNase 37℃孵育10min，再加入5M NaCl和10％SDS充分混匀后，再次冻融，加入苯酚‑氯仿‑异戊醇(25∶24∶1)的混合溶液，抽提；加入氯仿‑异戊醇(24∶1)混合溶液，抽提；加入冷乙醇和醋酸钠，离心，沉淀经乙醇洗涤后室温干燥；加ddH2O或TE缓冲液溶解DNA。本方法基于反复冻融方式进行，适用广泛，效率高、提取的DNA质量高，具有很好的通用性。

公开(公告)号：CN212753557U

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN202021855448.9

申请日：2020-08-31

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 黄麟 ,  何姣 ,  吴彦稷 ,  王俊伟

IPC: A01G18/50

Abstract: 本实用新型公开了一种用于阔叶树叶片的野外活体接种装置，包括仅底端开口的透明容器和吸附在透明容器顶端内壁的吸水棉以及菌块，透明容器管口处的外表面连接有上环，透明容器通过上环位于阔叶树叶片上，并隔着阔叶树叶片吸附有与上环互吸的下环，菌块内置在透明容器的管口处，并与阔叶树叶片接触。通过将菌块内置在透明容器的管口处，菌块与阔叶树叶片接触，再用下环放置在叶片的背面与上环相吸附，使菌块在透明容器内处于一个相对密封的环境，从而使菌块可以避免杂菌污染等其他外界因素的干扰，同时吸水棉也提供了菌块所需要的水分，本实用新型提供的野外活体接种装置，小巧轻便，构造简单，制作成本低，适用于接种野外绝大部分阔叶树叶片。

公开(公告)号：CN211210653U

公开(公告)日：2020-08-11

申请号：CN201922046375.2

申请日：2019-11-25

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 黄麟 ,  卞金月 ,  王俊伟

IPC: A01G7/06

Abstract: 本实用新型公开一种植物内生菌施用装置，包括滴灌组件、通气组件、物生物隔离件和通气盖，滴灌组件包括储液管和穿刺管，通气组件包括与储液管可拆卸设置的端盖、与端盖连通，并垂直设置的通气管，通气管区分为第一通气管和第二通气管，第二通气管的内径小于第一通气管的内径，微生物隔离件设置在第二通气管内，阻断外界的微生物进入到储液管内，通气盖可拆卸的设置在第二通气管的端部，通过穿刺管插入至植物上开设的孔洞，将储液管内的内生菌滴入至植物内，在整个滴灌过程中，内生菌不与外界环境接触，而且通过物生物隔离件隔离外界微生物或者水雾进入到储液管内，保证内生菌的施用环境，提高了内生菌对植物的作用效果。