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公开(公告)号：CN100436596C
公开(公告)日：2008-11-26
申请号：CN200510052315.1
申请日：2005-02-05
Applicant: 厦门大学
Abstract: 肠出血性大肠杆菌O157核酸检测方法及其试剂盒，涉及一种采用等长双链荧光探针技术对肠出血性大肠杆菌O157进行检测的方法及其试剂盒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的肠出血性大肠杆菌O157核酸检测方法及其试剂盒。其步骤为将肠出血性大肠杆菌O157特有的保守序列作为待测靶基因；根据待测靶基因合成一对特异性引物；合成一对等长双链特异性探针；组成荧光PCR反应体系的检测溶液混合物；阳性对照模板：包含待测靶基因的被检测DNA；阴性对照模板：灭菌后的无离子水。
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公开(公告)号：CN1256148C
公开(公告)日：2006-05-17
申请号：CN03145034.2
申请日：2003-06-18
Applicant: 厦门大学
IPC: A61K39/39 , A61K36/315
Abstract: 涉及一种中药板蓝根浸出物，尤其是中药板蓝根浸出物作为主要有效成分用于免疫佐剂。中药板蓝根浸出物与几种DNA、多肽疫苗联用，其抗体的产生量高于使用福氏佐剂的对照组，T细胞增殖也明显地高于福氏佐剂组。板蓝根浸出物也被用于多肽疫苗的佐剂，与福氏佐剂相比，板蓝根浸出物更能刺激机体产生高滴度的抗体。以板蓝根浸出物为主的佐剂可以直接或间接地激活活性细胞，明显地提高肌体的免疫力；能增加抗原的表面积，延长抗原在局部组织的存留时间，达到加强免疫效果；并且具有生产成本低，无毒性的特点。
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公开(公告)号：CN100342911C
公开(公告)日：2007-10-17
申请号：CN200410002157.4
申请日：2004-01-13
Applicant: 厦门大学
IPC: A61K39/135 , A61K39/295 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 涉及一种家畜A、O型口蹄疫病毒双价DNA疫苗。将A、O型口蹄疫病毒毒株的VP1蛋白抗原决定簇部分的编码区串联，与能提高其免疫原性的DNA片段连接。将片段酶切后与真核表达载体连接，转化大肠杆菌感受态细胞；PCR鉴定得阳性克隆；经培养，收集菌体，裂解细菌，离心；上清经过滤，离心，洗涤；沉淀溶于缓冲液，加入LiCl，离心，弃上清，用乙醇洗涤，沉淀的DNA用含RNAase的Tris-EDTA溶解；加NaCl，离心后收集DNA沉淀，经TE溶解后抽提；水相加乙酸铵及乙醇，离心去上清，用乙醇洗涤。属A、O型双价疫苗，免疫后动物能同时产生抗A、O型口蹄疫病毒的抗体；无减毒、灭活疫苗可能引起的致病作用；高产、稳定、长效、储运方便；诱导机体产生全面免疫应答；能表达经修饰的天然抗原。
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公开(公告)号：CN101016570A
公开(公告)日：2007-08-15
申请号：CN200710008609.3
申请日：2007-02-13
Applicant: 厦门大学
Abstract: H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒，涉及一种病毒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的H5亚型禽流感病毒核酸检测方法和试剂盒。步骤：1)寻求H5亚型禽流感病毒特有的保守序列作为待测靶基因；2)设计合成一对特异性引物，引物长度为18－30bp；3)根据保守序列设计合成一对Y型双链特异性荧光探针；4)使用步骤2中的一对特异性引物和步骤3中的Y型双链特异性荧光探针及PCR成份组成20μL荧光PCR反应体系的检测溶液，将荧光PCR反应体系的检测溶液装入PCR反应管；5)设置阳性对照模板和阴性对照模板，进行实时荧光PCR反应，获得检测结果。
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公开(公告)号：CN1294276C
公开(公告)日：2007-01-10
申请号：CN03132937.3
申请日：2003-07-22
Applicant: 厦门大学
Abstract: 涉及一种检测核酸的等长双链特异性探针。包括两条碱基数目相等且反向互补配对的寡核苷酸链，两条链等长，末端有2～6个碱基完全不匹配，两条链上分别标记荧光剂和淬灭剂。其优点是设计简单，几乎与普通PCR引物设计相同，实验成功率高；制备简单，单条链上是单一荧光物质的修饰，为防止PCR过程中探针的延伸，必须在3’端进行磷酸化封闭；特异性高，因为只有当靶序列与荧光剂标记链互补的碱基数大于荧光剂、淬灭剂分别标记的双链的互补碱基数时，荧光剂标记链与靶序列结合才较稳定，提高核酸杂交分析的反应特异性。如果靶序列发生突变或PCR产生了非特异扩增产物，探针将恢复双链状态，不发荧光。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101016570B
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN200710008609.3
申请日：2007-02-13
Applicant: 厦门大学
Abstract: H5亚型禽流感病毒核酸检测方法及其试剂盒，涉及一种病毒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的H5亚型禽流感病毒核酸检测方法和试剂盒。步骤：1)寻求H5亚型禽流感病毒特有的保守序列作为待测靶基因；2)设计合成一对特异性引物，引物长度为18-30bp；3)根据保守序列设计合成一对Y型双链特异性荧光探针；4)使用步骤2中的一对特异性引物和步骤3中的Y型双链特异性荧光探针及PCR成份组成20μL荧光PCR反应体系的检测溶液，将荧光PCR反应体系的检测溶液装入PCR反应管；5)设置阳性对照模板和阴性对照模板，进行实时荧光PCR反应，获得检测结果。
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公开(公告)号：CN1680602A
公开(公告)日：2005-10-12
申请号：CN200510052315.1
申请日：2005-02-05
Applicant: 厦门大学
Abstract: 肠出血性大肠杆菌O157核酸检测方法及其试剂盒，涉及一种采用等长双链荧光探针技术对肠出血性大肠杆菌O157进行检测的方法及其试剂盒。提供一种操作简便、实验可靠性高、可进行实时检测、灵敏度高、特异性好、周期短的肠出血性大肠杆菌O157核酸检测方法及其试剂盒。其步骤为将肠出血性大肠杆菌O157特有的保守序列作为待测靶基因；根据待测靶基因合成一对特异性引物；合成一对等长双链特异性探针；组成荧光PCR反应体系的检测溶液混合物；阳性对照模板：包含待测靶基因的被检测DNA；阴性对照模板：灭菌后的无离子水。
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公开(公告)号：CN1570137A
公开(公告)日：2005-01-26
申请号：CN03132937.3
申请日：2003-07-22
Applicant: 厦门大学
Abstract: 涉及一种检测核酸的等长双链特异性探针。包括两条碱基数目相等且反向互补配对的寡核苷酸链，两条链等长，末端有2～6个碱基完全不匹配，两条链上分别标记荧光剂和淬灭剂。其优点是设计简单，几乎与普通PCR引物设计相同，实验成功率高；制备简单，单条链上是单一荧光物质的修饰，为防止PCR过程中探针的延伸，必须在3’端进行磷酸化封闭；特异性高，因为只有当靶序列与荧光剂标记链互补的碱基数大于荧光剂、淬灭剂分别标记的双链的互补碱基数时，荧光剂标记链与靶序列结合才较稳定，提高核酸杂交分析的反应特异性。如果靶序列发生突变或PCR产生了非特异扩增产物，探针将恢复双链状态，不发荧光。
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公开(公告)号：CN1557486A
公开(公告)日：2004-12-29
申请号：CN200410002157.4
申请日：2004-01-13
Applicant: 厦门大学
IPC: A61K39/135 , A61K39/295 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 涉及一种家畜A、O型口蹄疫病毒双价DNA疫苗。将A、O型口蹄疫病毒毒株的VP1蛋白抗原决定簇部分的编码区串联，与能提高其免疫原性的DNA片段连接。将片段酶切后与真核表达载体连接，转化大肠杆菌感受态细胞；PCR鉴定得阳性克隆；经培养，收集菌体，裂解细菌，离心；上清经过滤，离心，洗涤；沉淀溶于缓冲液，加入LiCl，离心，弃上清，用乙醇洗涤，沉淀的DNA用含RNAase的Tris－EDTA溶解；加NaCl，离心后收集DNA沉淀，经TE溶解后抽提；水相加乙酸铵及乙醇，离心去上清，用乙醇洗。属A、O型双价疫苗，免疫后动物能同时产生抗A、O型口蹄疫病毒的抗体；无减毒、灭活疫苗可能引起的致病作用；高产、稳定、长效、储运方便；诱导机体产生全面免疫应答；能表达经修饰的天然抗原。
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公开(公告)号：CN1470287A
公开(公告)日：2004-01-28
申请号：CN03145034.2
申请日：2003-06-18
Applicant: 厦门大学
IPC: A61K39/39
Abstract: 涉及一种中药板蓝根浸出物，尤其是中药板蓝根浸出物作为主要有效成分用于免疫佐剂。中药板蓝根浸出物与几种DNA、多肽疫苗联用，其抗体的产生量高于使用福氏佐剂的对照组，T细胞增殖也明显地高于福氏佐剂组。板蓝根浸出物也被用于多肽疫苗的佐剂，与福氏佐剂相比，板蓝根浸出物更能刺激机体产生高滴度的抗体。以板蓝根浸出物为主的佐剂可以直接或间接地激活活性细胞，明显地提高肌体的免疫力；能增加抗原的表面积，延长抗原在局部组织的存留时间，达到加强免疫效果；并且具有生产成本低，无毒性的特点。
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