公开(公告)号：CN118376783A

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202410496958.8

申请日：2024-04-24

Applicant: 扬州大学 ,  江苏省农业科学院 ,  浙江中星畜牧科技有限公司

Inventor： 杨奕 ,  张志鹏 ,  杨章平 ,  王慧利 ,  商绍彬 ,  肖卫明 ,  卢徐斌

IPC: G01N33/569 ,  A01K67/02 ,  G01N33/58 ,  G01N15/14

Abstract: 本发明公开了一种筛选高细胞免疫应答能力奶牛的方法及应用，包括，采集奶牛初始血样；测定初始血样的细胞免疫指数；采集初始血样后当天(第0天)对奶牛进行肌肉注射模式抗原混合物2ml；第14天再次对奶牛进行肌肉注射模式抗原混合物2ml；第21天采集奶牛最终血样；测定最终血样的细胞免疫指数；计算注射模式抗原后细胞免疫指数增量；筛选奶牛经实验证明，本发明可以准确地在奶牛群中筛选出高细胞免疫应答能力的奶牛，管理人员可明确得知高细胞免疫应答能力奶牛并作为后备母牛进行留种，高细胞免疫应答能力的性状遗传力可达0.49‑0.51％，所筛选的“高免牛”体细胞数降低10万/mL以上、乳腺炎发病率下降59.08％、消化系统疾病发病率下降100％、犊牛腹泻下降88.08％。

公开(公告)号：CN115992116B

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202210886241.5

申请日：2022-07-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨章平 ,  张志鹏 ,  杨奕 ,  陈代杰 ,  陈志 ,  徐天乐

IPC: C12N9/36 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071 ,  A61K38/47 ,  A61P31/04 ,  A61P37/08 ,  A61P15/14 ,  A61P29/00 ,  A23C9/12 ,  A23K20/189 ,  A23K50/40 ,  A23L3/3571

Abstract: 本发明属于生物工程领域，公开了一种利用原代奶牛乳腺上皮细胞生物反应器合成的多功能奶牛溶菌酶：包括奶牛溶菌酶、β‑乳球蛋白肽和EGFP绿色荧光标签融合蛋白，相比于传统毕赤氏酵母作为生物反应器，以原代奶牛乳腺上皮细胞作为生物反应器制备的溶菌酶的活性显著提高；所述的奶牛溶菌酶可极显著降低细菌对细胞的损伤，细胞凋亡率下降92.5％，可有效治疗细菌诱导的小鼠乳腺炎；奶牛溶菌酶可作为饲料添加剂，在胃的酸性环境中具有高构象稳定性，可消化分解微生物，分解后的组分被肠道吸收为自身的营养成分；所述奶牛溶菌酶含有特定的β‑乳球蛋白肽，可诱导对乳蛋白的口服免疫耐受，能够减轻牛乳蛋白过敏症的急性症状。

公开(公告)号：CN116514954A

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202310472686.3

申请日：2023-04-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 商绍彬 ,  贺双江 ,  郝小利 ,  杨奕

IPC: C07K14/715 ,  C12N15/70 ,  C12N15/85 ,  C12N5/20 ,  C07K16/28 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种鸡白细胞介素‑9受体的单克隆抗体制备与应用，通过本发明，构建pET‑28a‑chIL‑9Rα和pcDNA3.1‑chIL‑9Rα质粒，并分别在ROSETTA菌和DF‑1细胞中表达chIL‑9Rα重组蛋白。将原核chIL‑9Rα重组蛋白免疫BALB/c小鼠三次，取脾脏与SP2/0细胞融合并筛选出阳性杂交瘤细胞，对不同杂交瘤细胞株分泌的抗体进行chIL‑9Rα真核重组蛋白鉴定，并用间接免疫荧光和Western blot技术检测不同抗体与chIL‑9Rα天然蛋白的反应性。本发明成功表达了鸡chIL‑9Rα蛋白，并制备了抗chIL‑9R单克隆抗体，能高效特异性识别chIL‑9Rα天然蛋白。本发明填补了chIL‑9Rα检测工具的空白，并为chIL‑9在鸡免疫抑制性疾病中的作用研究奠定了基础。本发明中的抗chIL‑9Rα单克隆抗体易于大量生产，便于后期在家禽免疫学基础研究中的应用。

公开(公告)号：CN104313185A

公开(公告)日：2015-01-28

申请号：CN201410597176.X

申请日：2014-10-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王成明 ,  杨奕 ,  陆光武 ,  杨章平 ,  毛永江 ,  郭伟娜 ,  危蓝菁 ,  张继垒 ,  李静

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2600/112 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2561/101

Abstract: 本发明公开了一种检测牛白血病的荧光定量PCR的试剂盒，包括FRET-PCR引物、探针和标准阳性模板，所述FRET-PCR引物为上游引物和下游引物；所述探针为6-FAM探针和LCRed640探针；所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列；所述下游引物具有SEQ ID No.2的核苷酸序列；所述6-FAM探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列；所述LCRed640探针具有SEQ ID No.4的核苷酸序列；所述标准阳性模板具有SEQ ID No.5的核苷酸序列。本发明提供了一种操作快速、方法简便、检测灵敏度高的牛白血病的实时定量PCR的检测试剂盒。

公开(公告)号：CN103642930A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310711918.2

申请日：2013-12-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王成明 ,  危蓝菁 ,  张继垒 ,  杨奕 ,  张真稳 ,  郁多男 ,  陶建平 ,  杨章平 ,  郝永清 ,  徐达 ,  陆光武 ,  庄林林

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2565/125 ,  C12Q2545/114

Abstract: 本发明涉及一种用于哺乳动物核酸样品质量控制的引物、探针及分子检测方法。所述的引物和探针如SEQ ID NO.1-4所示。所述分子检测方法是用上述引物和探针对核酸样品进行PCR扩增，根据PCR过程中荧光强度的变化，以及PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳的条带，对核酸样品进行定量或/和分型。使用本发明可以方便、有效地监控在样品采集、运输、保存、提取等任何环节出现的潜在问题，为提高PCR的可信度、降低其假阴性报告率等提供技术支持。

公开(公告)号：CN118717791A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410688099.2

申请日：2024-05-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 申丽 ,  赵雪 ,  李华玲 ,  朱一凡 ,  刘轩 ,  崔琦 ,  杨奕 ,  万春麟 ,  赵玉萌 ,  秦诗雅

IPC: A61K31/715 ,  A61P25/16 ,  A61P39/06 ,  A61P25/28 ,  A61K36/28

Abstract: 本发明涉及一种牛蒡多糖在治疗和/或缓解帕金森病中的应用。所述牛蒡多糖的重均分子量Mw为4256Da，数均分子量Mn为3437Da；主要含有的单糖组分为果糖：葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖：鼠李糖，其摩尔比为0.675：0.265：0.023：0.016：0.009。本发明所述牛蒡多糖(ALP)可以降低NL5901线虫体壁α‑Syn的聚集，提升其运动能力；同时，牛蒡多糖减少6‑OHDA诱导BZ555线虫中多巴胺能神经元的损伤，改善其行为认知能力；还发现，牛蒡多糖能降低BZ555和NL5901线虫体内氧化应激水平，并具有延长N2和NL5901线虫寿命、延缓衰老的作用。

公开(公告)号：CN118604348A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410496952.0

申请日：2024-04-24

Applicant: 扬州大学 ,  浙江中星畜牧科技有限公司 ,  江苏省农业科学院

Inventor： 杨章平 ,  张志鹏 ,  杨奕 ,  朱立科 ,  商绍彬 ,  卢徐斌 ,  陈坤琳

IPC: G01N33/68 ,  C12Q1/02 ,  G01N15/14 ,  G01N15/1409

Abstract: 本发明公开了一种定量牛外周血中抗原特异性抗体反应的方法及应用，包括，采集抗原免疫前后牛外周血；利用流式细胞术检测牛外周血中CD21+IgG+ER+B细胞数量和百分比；利用流式细胞术检测牛外周血中CD21+IgG+CD27+B细胞数量和百分比；计算抗原免疫前后牛外周血中CD21+IgG+ER+B细胞和CD21+IgG+CD27+B细胞的数量及百分比的增量；初次接触抗原个体的抗原特异性抗体水平利用CD21+IgG+ER+B细胞数目或百分比的增量来定量，再次接触抗原个体的抗原特异性抗体水平利用CD21+IgG+CD27+B细胞数目或百分比的增量来定量。本发明可以显著的提高奶牛的综合抗病能力，为培育中国荷斯坦奶牛高免疫力新品系提供实验支撑。

公开(公告)号：CN114369152A

公开(公告)日：2022-04-19

申请号：CN202210076793.X

申请日：2022-01-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 商绍彬 ,  贺双江 ,  郝小利 ,  杨奕

IPC: C07K14/54 ,  C12N15/70 ,  C12N15/85 ,  C12N15/24 ,  A61K38/20 ,  A61K39/39 ,  A61P37/04 ,  C07K16/24 ,  C07K16/06 ,  G01N33/577 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明涉及一种重组鸡白细胞介素‑9蛋白及其抗体的制备与应用，本发明要解决的技术问题是制备出具有生物学功能的重组鸡IL‑9原核蛋白与真核蛋白，并测定其生物学活性。本发明还需解决的技术问题是制备检测鸡IL‑9的单克隆和多克隆抗体。并利用这些抗体实现检测鸡体内免疫细胞表达的天然IL‑9蛋白。本发明成功解决了鸡IL‑9细胞因子重组表达难的问题，重组的鸡IL‑9蛋白具有激活鸡巨噬细胞及促进鸡T细胞增殖的生物学活性，提示其具有免疫增强功能。本发明中的鸡IL‑9蛋白及抗体易于大量生产，便于后期在养鸡业和家禽免疫学基础研究中的应用。

公开(公告)号：CN110607324A

公开(公告)日：2019-12-24

申请号：CN201911025733.X

申请日：2019-10-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨章平 ,  张志鹏 ,  杨奕 ,  陈代杰 ,  张慧敏

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/56 ,  A61P15/14

Abstract: 本发明提供一种奶牛溶菌酶基因（Lyz）乳腺特异性表达质粒及其构建方法和应用。具体地，PCR扩增Lyz基因的编码序列，将其插入到携带增强的绿色荧光蛋白基因的通用表达载体pEGFP-N1的多克隆位点中。通用表达载体pEGFP-N1经Ase I+Hind III双酶切，去除CMV启动子，克隆奶牛乳腺特异性表达β-乳球蛋白基因（BLG）启动子序列并取代Ase I和HindIII酶切位点，构建奶牛溶菌酶基因（Lyz）乳腺特异性表达质粒。采用上述重组质粒转染奶牛乳腺上皮细胞,得到的细胞系可用于分泌具有生物活性的奶牛溶菌酶，用于奶牛乳腺组织免疫机制研究；该重组质粒还可应用于基因治疗奶牛乳房炎制剂的研发。

公开(公告)号：CN104313185B

公开(公告)日：2016-02-24

申请号：CN201410597176.X

申请日：2014-10-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王成明 ,  杨奕 ,  陆光武 ,  杨章平 ,  毛永江 ,  郭伟娜 ,  危蓝菁 ,  张继垒 ,  李静

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种检测牛白血病的荧光定量PCR的试剂盒，包括FRET-PCR引物、探针和标准阳性模板，所述FRET-PCR引物为上游引物和下游引物；所述探针为6-FAM探针和LCRed640探针；所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列；所述下游引物具有SEQ ID No.2的核苷酸序列；所述6-FAM探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列；所述LCRed640探针具有SEQ ID No.4的核苷酸序列；所述标准阳性模板具有SEQ ID No.5的核苷酸序列。本发明提供了一种操作快速、方法简便、检测灵敏度高的牛白血病的实时定量PCR的检测试剂盒。