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公开(公告)号:CN103642930B
公开(公告)日:2015-02-18
申请号:CN201310711918.2
申请日:2013-12-20
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用于哺乳动物核酸样品质量控制的引物、探针及分子检测方法。所述的引物和探针如SEQ ID NO.1-4所示。所述分子检测方法是用上述引物和探针对核酸样品进行PCR扩增,根据PCR过程中荧光强度的变化,以及PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳的条带,对核酸样品进行定量或/和分型。使用本发明可以方便、有效地监控在样品采集、运输、保存、提取等任何环节出现的潜在问题,为提高PCR的可信度、降低其假阴性报告率等提供技术支持。
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公开(公告)号:CN104313191A
公开(公告)日:2015-01-28
申请号:CN201410655921.1
申请日:2014-11-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/68 , C12Q1/70 , C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2600/112 , C12Q2537/143 , C12Q2561/113 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明提供了一种一步法反转录PCR检测和分型埃博拉病毒5种亚型的引物、探针及试剂盒,引物和探针的核苷酸序列如图1-图8,试剂盒包括样品DNA模板或者定量标准试剂、PCR缓冲液、FRET-上游引物、FRET-下游引物、的6-FAM探针、LCRed640探针、商业化Taq酶、dNTP、商业化反转录酶、商业化RNA酶抑制剂。本发明依据埃博拉病毒5种亚型中保守区间巧妙地设计1条上游引物、1对探针和5条针对五种埃博拉病毒亚型的下游引物,从而可以同时检测5种亚型的埃博拉病毒。
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公开(公告)号:CN104212905A
公开(公告)日:2014-12-17
申请号:CN201410476184.9
申请日:2014-09-18
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/6893 , C12Q1/6858 , C12Q2600/178 , C12Q2531/113 , C12Q2561/113
Abstract: 一种检测所有泰勒虫的引物、探针及试剂盒和扩增体系,该引物、探针由FRET-PCR引物、探针组成,序列如下:FRET-上游引物:5’-TAGTGACAAGAAATAACAATACGGGGCTT-3’FRET-下游引物:5’-CAGCAGAAATTCAACTACGAGCTTTTTAACT-3’6-FAM探针:5’-CCAATTGATACTCTGGAAGAGGTTT-6-FAM-3’LCRed640探针:5’-LCRed640-AATTCCCATCATTCCAATTACAAGAC-磷酸-3’。能够灵敏、特异、快速地检测所有泰勒虫的实时定量PCR,同时确保不扩增其它非泰勒虫的病原微生物。
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公开(公告)号:CN104328222B
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201410655886.3
申请日:2014-11-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒及其检测方法,反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒包括引物、探针和FRET-PCR标准品,其特征在于:所述引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和Cy5探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述Cy5探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列。本发明操作便捷,适合于检测大量样本,可以快速,高度灵敏、特异、快速检测的并分型所有登革病毒的血清型。
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公开(公告)号:CN104328222A
公开(公告)日:2015-02-04
申请号:CN201410655886.3
申请日:2014-11-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/68 , C12Q1/70 , Y02A50/53 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒及其检测方法,反转录PCR检测和分型登革病毒的试剂盒包括引物、探针和FRET-PCR标准品,其特征在于:所述引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和Cy5探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述Cy5探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列。本发明操作便捷,适合于检测大量样本,可以快速,高度灵敏、特异、快速检测的并分型所有登革病毒的血清型。
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公开(公告)号:CN103789442A
公开(公告)日:2014-05-14
申请号:CN201410061800.4
申请日:2014-02-24
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12Q1/6848 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107 , C12Q2531/113 , C12Q2549/119
Abstract: 本发明涉及一种实时FRET-PCR和巢式PCR检测和分型立克次氏体的引物、探针及试剂盒。所述引物、探针如序列1-8所示。本发明设计FRET-PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有立克次氏体种属的核酸,从而快速的判断出阳性样品;然后选择相同基因的其他保守区间设计巢式PCR的2对引物,并通过巢式PCR、琼脂糖凝胶电泳和测序确定相应阳性样品的立克次氏体种属。因此,此系统不仅能快速、特异的检测到所有种属的立克次氏体,而且能确定其种属。
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公开(公告)号:CN103060469A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201310035350.7
申请日:2013-01-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及嗜皮菌分子诊断的荧光定量PCR检测引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1、2、3所示,所述探针为SEQ ID NO.4和5。将上述引物和探针与PCR反应液组成荧光定量PCR检测试剂盒。用本发明的引物和探针能对刚果嗜皮菌和龟型嗜皮菌进行分型。本发明用于检测嗜皮菌时,具有快速、更特异、更灵敏的优点。
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公开(公告)号:CN103789442B
公开(公告)日:2015-08-19
申请号:CN201410061800.4
申请日:2014-02-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种实时FRET-PCR和巢式PCR检测和分型立克次氏体的引物、探针及试剂盒。所述引物、探针如序列1-8所示。本发明设计FRET-PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有立克次氏体种属的核酸,从而快速的判断出阳性样品;然后选择相同基因的其他保守区间设计巢式PCR的2对引物,并通过巢式PCR、琼脂糖凝胶电泳和测序确定相应阳性样品的立克次氏体种属。因此,此系统不仅能快速、特异的检测到所有种属的立克次氏体,而且能确定其种属。
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公开(公告)号:CN103710450A
公开(公告)日:2014-04-09
申请号:CN201310728970.9
申请日:2013-12-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2545/101 , C12Q2563/107
Abstract: 一种检测犬恶丝虫的荧光定量PCR引物、探针及试剂盒,所述引物序列如SEQ ID NO.1和2所示,所述探针为SEQ ID NO.3和4。采用上述引物和探针可通过FRET-PCR技术对犬恶丝虫进行检测可特异扩增引起犬恶丝虫病的唯一病原体-犬恶丝虫的核酸,而不扩增其它类似但不引起犬恶丝虫病的丝虫的核酸。
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公开(公告)号:CN103060469B
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201310035350.7
申请日:2013-01-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及嗜皮菌分子诊断的荧光定量PCR检测引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQIDNO.1、2、3所示,所述探针为SEQIDNO.4和5。将上述引物和探针与PCR反应液组成荧光定量PCR检测试剂盒。用本发明的引物和探针能对刚果嗜皮菌和龟型嗜皮菌进行分型。本发明用于检测嗜皮菌时,具有快速、更特异、更灵敏的优点。
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